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    黃芪多糖的生物學(xué)功能及其在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用研究進(jìn)展

    2011-08-15 00:44:06莊金秋梅建國(guó)沈志強(qiáng)
    中國(guó)豬業(yè) 2011年7期
    關(guān)鍵詞:黃芪淋巴細(xì)胞多糖

    莊金秋 梅建國(guó) 沈志強(qiáng)

    (1山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東省濱州市 256600;2吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院,吉林省長(zhǎng)春市 130062)

    黃芪多糖的生物學(xué)功能及其在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用研究進(jìn)展

    莊金秋1,2梅建國(guó)1,2沈志強(qiáng)1

    (1山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東省濱州市 256600;2吉林大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院,吉林省長(zhǎng)春市 130062)

    中華人民共和國(guó)藥典規(guī)定中藥黃芪(Radix Astragali,RA)為豆科黃芪屬植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根,主要分布于我國(guó)東北和華北。黃芪入藥始載于 《神農(nóng)本草經(jīng)》,原名 “黃耆”,在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中有著廣泛的應(yīng)用。中醫(yī)認(rèn)為其味甘,性微溫,歸脾、肺經(jīng),具有補(bǔ)氣升陽(yáng)、益衛(wèi)固表、托毒生肌、利水退腫之功效。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)黃芪中含有多種生物活性成分,如多糖、皂甙、黃酮、氨基酸、微量元素、核黃素、葉酸、香豆素、有機(jī)酸、膽堿等,最主要的活性成分是多糖、皂甙、黃酮類、氨基酸和微量元素。其中黃芪多糖 (Astragalus polysaccharide,APS)作為黃芪重要的活性成分之一,已成為研究報(bào)道的熱點(diǎn),被廣泛用于獸醫(yī)臨床,效果確切。大量的科學(xué)實(shí)驗(yàn)證明黃芪多糖對(duì)機(jī)體特異性免疫與非特異性免疫具有廣泛的影響。黃芪多糖作為中藥免疫增強(qiáng)劑的典型代表,具有調(diào)節(jié)免疫、抗病毒、抗腫瘤、延緩衰老、抗氧化、抗應(yīng)激、抗輻射和調(diào)節(jié)血糖等作用,而且對(duì)正常動(dòng)物以及腫瘤、藥物等引起的免疫功能低下均有提高細(xì)胞免疫和體液免疫的功能。目前,黃芪多糖作為免疫增強(qiáng)劑和抗病毒藥物在畜牧業(yè)中已開(kāi)始應(yīng)用。黃芪多糖作為飼料添加劑具有明顯的優(yōu)勢(shì),其在畜牧生產(chǎn)及飼料加工中的應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。本文就黃芪多糖的理化性質(zhì)、生物學(xué)功能以及在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用做一綜述,旨在為獸醫(yī)臨床提供參考。

    1 黃芪多糖的組成與理化性質(zhì)

    1.1 黃芪多糖的組成

    黃芪多糖的成分主要包括葡萄糖、阿拉伯糖、葡糖醛酸和半乳糖醛酸,另外還含有蔗糖、微量葉酸、膽堿、甜菜堿、β-谷甾醇、胡蘿卜甙、亞油酸與亞麻酸等。1979年上海藥物研究所從蒙古黃芪中分離出葡萄糖和阿拉伯糖的多聚體和多糖化合物。黃喬書(shū)等(1982)從蒙古黃芪的水提液中分離到兩種葡聚糖 (AG-1、AG-2)和兩種雜多糖 (AH-1、AH-2)。AG-1為水溶性,AG-2為水不溶性。AH-1為水溶性酸性雜多糖,含己糖醛酸、葡萄糖、鼠李糖、阿拉伯糖。所含己糖醛酸為半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸。AH-2為葡萄糖和阿拉伯糖組成的水溶性多糖。方圣鼎等 (1997)報(bào)道蒙古黃芪中已發(fā)現(xiàn)3種多糖成分:分別為黃芪多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,其中黃芪多糖Ⅰ是由葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖組成的雜多糖;而黃芪多糖Ⅱ和Ⅲ是僅由葡萄糖組成的葡聚糖。1983年王志學(xué)等從膜莢黃芪根中分離出了蔗糖結(jié)晶。Masashi Tomoda等(1992)從膜莢黃芪中得到一種多糖,主要由α-1,2-糖苷鍵連接的L-鼠李糖、α-1,4-糖苷鍵連接的半乳糖及 α-1,5-糖苷鍵連接的阿拉伯糖組成,分支點(diǎn)位于鼠李糖和半乳糖上,屬果膠類多糖。王彥榮 (2007)試驗(yàn)研究結(jié)果表明,APS是一種水溶性的中性多糖;粗提物中含有還原糖,經(jīng)提純處理后還原糖除凈;APS水溶液能使碘液變藍(lán);APS的熔點(diǎn)高于200℃;各組分均有較大的比旋光值,為D型單糖以α-糖苷鍵連接而成;紫外圖譜顯示多糖的特征吸收峰。

    1.2 黃芪多糖的分子量分布

    由于多糖的分子量分布很廣,即使采用相同的黃芪原料,提取或分離過(guò)程中的差異也可能造成產(chǎn)物的不同,目前已分離純化出十幾種黃芪多糖。在進(jìn)行黃芪多糖分離純化時(shí)醇沉往往是第一步操作,不同醇沉條件對(duì)黃芪多糖的組成、得率和含量影響較大。閆巧娟等(2004)報(bào)道,通過(guò)分級(jí)醇沉試驗(yàn)得出,各醇沉濃度對(duì)應(yīng)的得率都隨醇濃度的升高而呈增加的趨勢(shì);糖的含量變化起伏較大,醇濃度為60%時(shí)所得多糖含量比較低,醇濃度為30%和70%時(shí)所得多糖含量較高。分步醇沉試驗(yàn)表明,醇濃度為10%時(shí)沉淀下來(lái)的多糖所占比例最大,乙醇濃度達(dá)到80%時(shí)大部分多糖都可以沉淀下來(lái);而所得多糖含量除90%醇濃度時(shí)較低外,其余相差不大。超濾試臉表明,超濾后黃芪多糖大部分分布在離心沉淀和150千道爾頓 (150 kDa)以上部分,兩者占了57.6%;其含量除3 kDa以下和6 kDa至50 kDa部分較低外,其它部分含量相差不大。含最最高的是150 kDa以上部分。

    1.3黃芪多糖的提取與含量測(cè)定

    黃芪多糖是黃芪提取物,是以黃芪干燥的根為原料提取的產(chǎn)品,商品提取物中黃芪多糖的含量通常為70%。其主要提取方法有水提取法、堿水提取法、微波提取法、酶提取法,常用的方法是水提取法,即黃芪根粉末經(jīng)蒸餾水連續(xù)煎煮,濃縮上清液用高濃度乙醇沉淀,最后以丙酮洗滌、過(guò)濾,濾渣經(jīng)抽真空所得多糖提取物。由于所采用的提取方法以及藥物產(chǎn)地和品種的不同,所得到的黃芪多糖有的為葡聚糖,有的為雜多糖,但都發(fā)現(xiàn)它們的生物學(xué)功能相近(萬(wàn)善霞等,2004)。目前測(cè)定黃芪多糖含量的方法主要有苯酚-濃硫酸比色法和蒽酮-濃硫酸比色法。這兩種方法均以葡萄糖和葡聚糖 (相對(duì)分子質(zhì)量約為20 000 Da)兩種物質(zhì)為對(duì)照品進(jìn)行比色測(cè)定黃芪多糖的含量。楊莉等(2005)報(bào)道,以葡聚糖為對(duì)照品、蒽酮-濃硫酸比色法測(cè)定線性關(guān)系較好(r=0.9990),平均回收率97.9%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.53%,采用此種方法對(duì)7個(gè)品種黃芪藥材中黃芪多糖含量的測(cè)定結(jié)果表明,不同品種黃芪藥材中黃芪多糖含量在5%~8%之間。杜文等 (2001)報(bào)道,用硫酸-苯酚法測(cè)定黃芪總多糖的含量,蒙古黃芪的黃芪多糖含量為(73.310±0.962)mg/g,膜莢黃芪的黃芪多糖含量為 (48.800±1.245)mg/g。

    2 黃芪多糖的生物學(xué)功能

    黃芪多糖具有免疫增強(qiáng)作用,對(duì)特異性免疫和非特異性免疫均有促進(jìn)作用。主要包括促進(jìn)動(dòng)物免疫器官發(fā)育;提供更多更好的免疫活性細(xì)胞,活化免疫細(xì)胞 (T細(xì)胞、B細(xì)胞、K細(xì)胞和NK細(xì)胞等);激活巨噬細(xì)胞功能,增強(qiáng)其吞噬、處理、傳遞抗原的作用;促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌及提高細(xì)胞因子的生物活性,如白細(xì)胞介素、轉(zhuǎn)移因子等;促進(jìn)和調(diào)節(jié)補(bǔ)體、抗體和溶菌酶的產(chǎn)生等(姜國(guó)均等,2005)。黃芪多糖不僅能增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能,而且還具有抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、抗應(yīng)激、抗輻射和調(diào)節(jié)血糖等多種生物學(xué)功能。

    2.1 黃芪多糖對(duì)機(jī)體免疫器官的影響

    免疫器官是動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)的主要場(chǎng)所。動(dòng)物免疫器官的重量與免疫器官的發(fā)育狀況直接影響到機(jī)體免疫力的高低。黃芪多糖對(duì)動(dòng)物機(jī)體免疫器官的影響,主要體現(xiàn)在增加動(dòng)物胸腺、脾臟和法氏囊重量及對(duì)創(chuàng)傷動(dòng)物免疫器官重量減輕的拮抗作用。此外,黃芪多糖對(duì)腸系膜淋巴結(jié)重量也有一定的增加作用。且黃芪多糖能夠影響動(dòng)物免疫器官的發(fā)育,進(jìn)而影響機(jī)體的免疫功能。梁華平等 (1996)報(bào)道,黃芪多糖能顯著增加小鼠脾臟、胸腺重量,提高其脾臟指數(shù)及胸腺指數(shù),也可增加腸系膜淋巴結(jié)重量。單俊杰等 (2002)通過(guò)試驗(yàn)也證實(shí),黃芪多糖能顯著增加正常小鼠的脾臟重量。另外,王福傳等 (2003)研究發(fā)現(xiàn),含有黃芪多糖的中草藥免疫增強(qiáng)劑能顯著提高雞法氏囊、脾臟的重量。梁華平也曾報(bào)道,黃芪多糖對(duì)創(chuàng)傷性小鼠脾臟、胸腺重量的減輕均有拮抗作用。王志祥等 (2006)研究發(fā)現(xiàn),添加0.2%或0.3%的黃芪提取物對(duì)肉仔雞的胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)都有顯著提高,對(duì)脾臟指數(shù)具有提高的趨勢(shì)。這些研究結(jié)果表明,黃芪多糖不但可以促進(jìn)機(jī)體正常免疫器官的發(fā)育和免疫活性細(xì)胞的生成,提高免疫活性,而且能抵抗免疫抑制劑對(duì)免疫器官的損害及修復(fù)受損的免疫器官,使免疫器官的組織結(jié)構(gòu)恢復(fù)到正常水平,維持機(jī)體的正常免疫機(jī)能。

    2.2 黃芪多糖增強(qiáng)機(jī)體非特異性免疫的功能

    非特異性免疫又稱天然免疫,是機(jī)體防御外界病原體入侵的第一道屏障,包括機(jī)體的屏障作用,吞噬細(xì)胞的吞噬和NK細(xì)胞的直接殺傷作用,效應(yīng)細(xì)胞釋放的免疫分子發(fā)揮的調(diào)理作用,以及協(xié)助特異性免疫發(fā)揮免疫效應(yīng)。

    2.2.1黃芪多糖增強(qiáng)專職抗原遞呈細(xì)胞對(duì)抗原的攝取、加工和遞呈能力

    樹(shù)突狀細(xì)胞 (DC)是目前已知的功能最強(qiáng)的專職抗原遞呈細(xì)胞,它能顯著刺激初始T細(xì)胞的增生。CDla是未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞的標(biāo)志,隨著DC的成熟,CDla的表達(dá)逐漸降低;CD83是成熟DC的特異性標(biāo)志;CD80、CD86是 DC表面重要的共刺激分子,在DC發(fā)揮功能過(guò)程中起重要作用。黃芪多糖能刺激DC的成熟和促進(jìn)其功能。鄧旻等(2007)研究黃芪多糖在體外對(duì)臍血單核細(xì)胞向樹(shù)突狀細(xì)胞分化的作用及細(xì)胞免疫學(xué)特征變化的作用時(shí)發(fā)現(xiàn):黃芪多糖能顯著提高 DC表面抗原 CDla、CD83、CD80和CD86的表達(dá),進(jìn)而誘導(dǎo)臍血單核細(xì)胞 (DCs前體細(xì)胞)定向分化為功能性 (成熟)DCs。黃芪多糖通過(guò)提高DC表面功能性,使其攝入抗原、加工抗原和遞呈抗原的功能得到加強(qiáng),進(jìn)而加速免疫細(xì)胞發(fā)生一系列免疫反應(yīng)來(lái)清除入侵病原。此外,內(nèi)皮細(xì)胞作為抗原遞呈細(xì)胞與T細(xì)胞接觸可為T(mén)細(xì)胞活化提供重要的共刺激信號(hào),參與免疫應(yīng)答進(jìn)程。郝鈺等 (2000)證實(shí),黃芪多糖可通過(guò)增強(qiáng)淋巴細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附而促進(jìn)淋巴細(xì)胞再循環(huán),增加淋巴細(xì)胞與抗原的接觸機(jī)會(huì),從而擴(kuò)大免疫反應(yīng),增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。

    2.2.2 黃芪多糖增強(qiáng)巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞和NK細(xì)胞的功能

    巨噬細(xì)胞在殺滅和清除抗原的過(guò)程中起著重要作用。黃芪多糖對(duì)巨噬細(xì)胞的激活作用表現(xiàn)在增加巨噬細(xì)胞的數(shù)量,促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞分泌IL-2,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能。馬興銘和趙進(jìn)昌 (2003)研究發(fā)現(xiàn),黃芪多糖能提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù),促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,從而增強(qiáng)體液免疫。孟憲榮等 (2002)報(bào)道,黃芪多糖能促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞的功能,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用,提高自然殺傷細(xì)胞 (NK)細(xì)胞的活性。單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)能非特異性地吞噬侵入畜禽體內(nèi)的病原體和有害異物,能將抗原提呈給T、B淋巴細(xì)胞,從而參與機(jī)體的特異性免疫應(yīng)答。NK細(xì)胞是一類重要的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞,被公認(rèn)為免疫監(jiān)視細(xì)胞中最理想的效應(yīng)細(xì)胞,研究發(fā)現(xiàn)黃芪多糖能刺激NK細(xì)胞增殖并增強(qiáng)其殺傷能力。APS在體內(nèi)和體外均能明顯促進(jìn)小鼠NK細(xì)胞活性。唐雪明等 (1997)研究表明,以不同途徑給予APS,均能顯著增強(qiáng)雛雞外周血中NK細(xì)胞的活性,其中注射效果優(yōu)于口服。翁玲等 (2003)通過(guò)研究黃芪多糖粉針劑 (APS-P)對(duì)正常及化療小鼠免疫功能的影響發(fā)現(xiàn),APS-P能夠有效地促進(jìn)化療后小鼠免疫系統(tǒng)功能的恢復(fù),增強(qiáng)對(duì)S-l80荷瘤小鼠NK細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞的能力,其作用效果與豬苓多糖 (PUPS)相當(dāng)。APS可以明顯增強(qiáng)淋巴因子活化的殺傷細(xì)胞 (LAK)的細(xì)胞毒作用,有效劑量范圍為0.001~0.01mg,在0.01mg時(shí)具有最大的增強(qiáng)作用,此時(shí)細(xì)胞的細(xì)胞毒性為原LAK細(xì)胞的3倍。胡庭俊等 (2005)研究表明,黃芪多糖能明顯促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞NO增殖,提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能。

    2.3 黃芪多糖增強(qiáng)機(jī)體特異性免疫的功能

    發(fā)揮特異性免疫功能的細(xì)胞主要為T(mén)淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。其中,T淋巴細(xì)胞主要發(fā)揮細(xì)胞免疫功能并對(duì)體液免疫進(jìn)行調(diào)節(jié),B淋巴細(xì)胞主要發(fā)揮體液免疫功能,其分泌的抗體除發(fā)揮體液免疫反應(yīng)外還可以介導(dǎo)細(xì)胞毒作用。

    2.3.1 黃芪多糖增強(qiáng)機(jī)體體液免疫的功能

    體液免疫是由B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答,其效應(yīng)是由B細(xì)胞通過(guò)對(duì)抗原的識(shí)別、活化、增殖,最后分化成漿細(xì)胞并分泌抗體來(lái)實(shí)現(xiàn)的。黃芪多糖可以作為B淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)因子刺激B淋巴細(xì)胞分化增殖和促進(jìn)漿細(xì)胞分泌特異性抗體來(lái)增強(qiáng)機(jī)體對(duì)疫苗的免疫反應(yīng)。程志斌等 (2002)報(bào)道,黃芪多糖能使脾內(nèi)漿細(xì)胞增生,促進(jìn)抗體的合成,增強(qiáng)體液免疫。馬興銘和趙進(jìn)昌 (2003)研究也發(fā)現(xiàn),黃芪多糖能提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù),促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體,從而增強(qiáng)體液免疫。動(dòng)物試驗(yàn)表明,黃芪多糖可糾正環(huán)磷酰胺對(duì)抗體形成細(xì)胞的抑制作用,黃芪多糖在體外有抑制T細(xì)胞反應(yīng),促進(jìn)B細(xì)胞功能的作用。黃芪多糖能使脾內(nèi)漿細(xì)胞增生,促進(jìn)抗體的合成,增強(qiáng)體液免疫。黃芪多糖能促進(jìn)雛雞未成熟T細(xì)胞的轉(zhuǎn)化并提高其活性,刺激T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的功能。高微微等 (2001)采用酶聯(lián)免疫吸附分析法 (ELISA)檢測(cè)不同工藝生產(chǎn)的黃芪多糖和黃芪皂苷體外對(duì)刀豆素球蛋白 (ConA)和細(xì)菌脂多糖 (LPS)刺激雞外周血中淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),不同工藝生產(chǎn)的黃芪多糖對(duì)細(xì)菌脂多糖誘導(dǎo)和ConA誘導(dǎo)的雞外周血B淋巴細(xì)胞增殖的促進(jìn)作用不同。這說(shuō)明黃芪多糖與淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化與增殖具有一定的量效和時(shí)效關(guān)系,且不同加工工藝生產(chǎn)的黃芪多糖對(duì)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和增殖的影響也不同。黃芪多糖能顯著提高斷奶仔豬淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù);并且提高仔豬抗綿羊紅細(xì)胞抗體效價(jià) (SRBC)。黃芪多糖能使小鼠脾臟增大,脾內(nèi)漿細(xì)胞增生,促進(jìn)抗體合成,增強(qiáng)體液免疫功能 (吳沛竹,1989)。許杜娟等 (2003)試驗(yàn)顯示,APS既可刺激正常小鼠脾細(xì)胞的增殖反應(yīng),又可明顯促進(jìn)適量濃度ConA與LPS誘導(dǎo)脾細(xì)胞的增殖反應(yīng)。

    黃芪多糖作為疫苗免疫調(diào)節(jié)劑在細(xì)菌滅活苗、病毒滅活苗以及病毒弱毒苗上的研究顯示出了明顯的提高特異性抗體滴度的作用,顯著提高了疫苗的攻毒保護(hù)率,延長(zhǎng)有效保護(hù)期。

    2.3.2黃芪多糖增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞免疫的功能

    發(fā)揮特異性細(xì)胞免疫功能的細(xì)胞主要是T淋巴細(xì)胞。輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)和細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞 (Tc)是兩類主要的功能性淋巴細(xì)胞,Th通過(guò)分泌各種細(xì)胞因子發(fā)揮其輔助免疫反應(yīng)的功能,Th根據(jù)其細(xì)胞因子分泌模式的不同分為T(mén)hl和 Th2兩個(gè)主要功能亞群。Thl分泌IL-2、IFN-γ等Thl類細(xì)胞因子,參與細(xì)胞免疫的調(diào)節(jié),Th2主要分泌IL-4、IL-5、IL-10等Th2類細(xì)胞因子,參與體液免疫的調(diào)節(jié)。Tc通過(guò)對(duì)感染細(xì)胞的細(xì)胞毒作用發(fā)揮對(duì)感染細(xì)胞和病原的殺傷作用。黃芪多糖對(duì)機(jī)體細(xì)胞免疫有顯著影響。研究表明黃芪多糖能夠促進(jìn)抗原刺激,引起T淋巴細(xì)胞分化和增殖,而且對(duì)抗原刺激后Th細(xì)胞分泌細(xì)胞因子功能和Tc細(xì)胞的細(xì)胞毒作用有增強(qiáng)效應(yīng)。王德云等(2004)認(rèn)為,黃芪多糖能顯著促進(jìn)雛雞T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,并有一定的量效和時(shí)效關(guān)系。邱妍等 (2008)用雞新城疫-傳染性支氣管炎二聯(lián) (NDV-IBV)弱毒苗首次免疫的同時(shí),給予低劑量的APS,每天1次,連續(xù)3天。28日齡用NDV-IBV滅活油乳苗再次免疫。結(jié)果表明,APS能顯著提高新城疫HI抗體效價(jià),促進(jìn)外周血T淋巴細(xì)胞增殖,提高CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞含量和CD4+/ CD8+值。黃芪注射液對(duì)外周血淋巴細(xì)胞CD4+/CD8+比值有明顯調(diào)節(jié)作用,而且可以提高CD3+T淋巴細(xì)胞亞群水平,并恢復(fù)至正常水平。張紅英等 (2010)發(fā)現(xiàn)黃芪多糖在免疫早期對(duì)CD4+T細(xì)胞的增殖有一定促進(jìn)作用,能提高外周血淋巴細(xì)胞中CD8+T細(xì)胞的百分比。

    2.3.3黃芪多糖對(duì)體液因子的影響

    黃芪多糖發(fā)揮作用的體液因子包括干擾素、白細(xì)胞介素和補(bǔ)體。對(duì)干擾素(IFN)產(chǎn)生的影響:許杜娟和陳敏珠(2003)發(fā)現(xiàn),黃芪多糖對(duì)脾細(xì)胞干擾素-γ和腹腔巨噬細(xì)胞腫瘤壞死因子-α的產(chǎn)生有顯著促進(jìn)作用,顯著增強(qiáng)小鼠免疫功能。對(duì)白細(xì)胞介素的影響:體外應(yīng)用APS發(fā)現(xiàn)其可促進(jìn)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生白細(xì)胞介素-1(IL-1),抑制前列環(huán)素(PCE2)合成,體內(nèi)應(yīng)用可明顯提高T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化,促進(jìn)已受抑制的IL-2的產(chǎn)生及IL-2R的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖;APS在體外可明顯增強(qiáng)重組白介素2(rIL-2)誘導(dǎo)的LAK細(xì)胞活性,其機(jī)理可能是APS能協(xié)同rIL-2激活淋巴細(xì)胞,促進(jìn)某些細(xì)胞因子分泌。對(duì)補(bǔ)體的影響:關(guān)玉峰(1997)的研究表明,APS、人參多糖均有促進(jìn)補(bǔ)體恢復(fù)的作用。用眼鏡蛇蛇毒因子 (CVF)造成豚鼠低補(bǔ)體狀態(tài),給藥8天后用電鏡觀察,可見(jiàn)中性白細(xì)胞顆粒已明顯減少,白細(xì)胞、吞噬功能均已正常,補(bǔ)體活力恢復(fù)。徐紅微(1992)的研究也表明黃芪具有恢復(fù)機(jī)體補(bǔ)體水平和功能的作用。

    2.3.4黃芪多糖對(duì)免疫記憶的影響

    黃芪多糖能延長(zhǎng)疫苗特異性抗體水平的持續(xù)時(shí)間和加強(qiáng)再次抗原刺激所引起的特異性免疫應(yīng)答,由此推斷黃芪多糖可能對(duì)機(jī)體免疫記憶發(fā)揮作用。其發(fā)揮作用的途徑可能是延長(zhǎng)記憶性淋巴細(xì)胞的存活時(shí)間、延緩記憶性淋巴細(xì)胞的凋亡等。

    2.4 黃芪多糖的抗病毒和抗腫瘤作用

    復(fù)方黃芪多糖能對(duì)多種病毒產(chǎn)生干擾、結(jié)合等作用,也可促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬作用以殺滅病毒 (艾連中等,2008)。鄒宏字等研究表明,黃芪多糖有明顯的抗流感作用。孟憲榮等(2002)研究發(fā)現(xiàn),黃芪多糖可增強(qiáng)雞體內(nèi)抗氧化酶系統(tǒng)的功能,降低過(guò)氧化脂質(zhì) (LPO)含量,減少活性氧自由基對(duì)機(jī)體的損傷,從而降低馬立克氏病的發(fā)病率和死亡率。劉永杰等 (1999)報(bào)道黃芪多糖能降低人工感染馬立克氏病強(qiáng)毒雛雞的發(fā)病率。李繁等 (2000)研究報(bào)道黃芪多糖能增強(qiáng)馬立克氏病疫苗的血清抗體效價(jià)。陸綱等 (2003)利用黃芪多糖注射液對(duì)患有雞新城疫的肉雞和蛋雞進(jìn)行了治療性試驗(yàn),結(jié)果表明,黃芪多糖對(duì)自然感染雞新城疫的治愈率達(dá)到 88.54%,比空白對(duì)照組高 40%,差異極顯著,優(yōu)于雞新城疫Ⅳ系疫苗緊急接種。胡元亮等 (2003)在雞胚細(xì)胞上雞新城疫 (ND)、雞傳染性法氏囊病病毒 (IBDV)的研究試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),黃芪多糖能夠使雞在病毒接種后72小時(shí)細(xì)胞的病變程度明顯減輕,試驗(yàn)采用的中藥黃芪多糖能抑制病毒感染細(xì)胞,且有一定的量效和時(shí)效關(guān)系。金光明等(2005)研究了黃芪多糖對(duì)雛雞傳染性法氏囊病的免疫效果,結(jié)果顯示黃芪多糖注射液組雛雞死亡率顯著低于對(duì)照組(P<0.05),說(shuō)明黃芪多糖能夠降低IBD的發(fā)病率和死亡率,發(fā)揮促進(jìn)免疫的作用,提高機(jī)體的免疫功能,對(duì)IBD的防治有一定作用。APS用于防治雞傳染性法氏囊病效果顯著,對(duì)防治禽成髓細(xì)胞性白血病強(qiáng)毒感染也有一定作用 (郭曉清,2005)。 謝麟等 (2002) 報(bào)道,APS能使動(dòng)物體誘生內(nèi)源性干擾素,作用于細(xì)胞后產(chǎn)生抗病毒蛋白,以抑制病毒蛋白合成,從而產(chǎn)生抗病毒感染作用。劉海清等報(bào)道,黃芪注射液與NDⅣ系疫苗聯(lián)合使用能提高免疫后雞血清HI抗體效價(jià),適宜用做免疫增強(qiáng)劑。此外,黃芪多糖對(duì)雞傳染性法氏囊病、豬圓環(huán)病毒病、豬流感、藍(lán)耳病等病毒性疾病均有一定的療效。

    近年來(lái),有關(guān)黃芪多糖抗腫瘤免疫機(jī)制方面的研究較多。黃芪多糖對(duì)多種實(shí)驗(yàn)性腫瘤有明顯的抑制作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,黃芪多糖與IL-2/LAK抗腫瘤作用機(jī)制相似,并對(duì)IL-2/LAK抗腫瘤效應(yīng)有明顯的增強(qiáng)作用,二者配伍應(yīng)用可明顯提高LAK細(xì)胞對(duì)靶細(xì)胞的殺傷力。王光等 (1994)研究表明黃芪多糖可增強(qiáng)IL-2/LAK對(duì)小鼠黑色毒瘤的抗腫瘤作用。姚金鳳等 (2005)報(bào)道,黃芪多糖能顯著增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對(duì)黑色素瘤細(xì)胞的殺傷作用。周淑英等(1995)研究表明,黃芪多糖對(duì)S180腫瘤和肝癌有顯著抑制作用。陳光等(2002)研究發(fā)現(xiàn),黃芪多糖在一定程度上有誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用,但凋亡的數(shù)目并不占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),說(shuō)明誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡是黃芪多糖抗腫瘤的一條途徑,但不是主要途徑,其抗腫瘤作用可能是通過(guò)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)來(lái)實(shí)現(xiàn)。黃芪作為一種補(bǔ)益類中藥,無(wú)細(xì)胞毒作用,其通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞因子的分泌,提高細(xì)胞免疫功能以及某些非特異性免疫作用而發(fā)揮抗腫瘤作用。

    2.5 黃芪多糖的抗氧化和抗衰老作用

    黃芪多糖抗氧化和衰老作用的機(jī)制可能與其提高機(jī)體免疫功能,清除自由基及抗脂質(zhì)過(guò)氧化有關(guān)。眾多試驗(yàn)表明,APS的生物學(xué)保護(hù)作用可通過(guò)增強(qiáng)免疫器官中SOD和GSH-Px活性,提高免疫防御和免疫監(jiān)視,增強(qiáng)實(shí)質(zhì)器官的抗氧化作用,減少其細(xì)胞的病理變化,保護(hù)和維持機(jī)體的重要生命活動(dòng),提高機(jī)體抗病力?;钚宰杂苫南俺趸锲缁?(SOD)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶 (GSH-Px)活性的升高有利于動(dòng)物抗氧化和抗衰老。吳勇等(2002)研究發(fā)現(xiàn),黃芪多糖可以提高SOD及總抗氧化活力,說(shuō)明黃芪多糖有較好的抗氧化作用。丁利君和吳倩萍(2003)研究發(fā)現(xiàn),黃芪多糖對(duì)羥自由基、超氧自由基有清除作用,且在一定濃度范圍內(nèi),與劑量呈正相關(guān)性。李宏全等 (2002)研究表明,黃芪多糖可提高雞的抗氧化作用,可通過(guò)增強(qiáng)免疫器官中GSH-Px、SOD活性提高雞的免疫防御和免疫監(jiān)視功能。葛斌等 (2004)研究了黃芪多糖的抗衰老作用及其機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn),黃芪多糖能使衰老模型小鼠胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)明顯升高,血清和肝組織中丙二醛 (MDA)顯著下降及SOD活力顯著升高,腎組織中GSHPx30活力及一氧化氮合酶 (NOS)活力顯著升高。孫成文等 (1996)研究發(fā)現(xiàn),黃芪多糖可阻止心臟損傷模型小鼠體內(nèi)黃嘌呤和黃嘌呤氧化酶的氧化損傷作用,使致?lián)p心臟的各項(xiàng)指標(biāo)一致向正常方向轉(zhuǎn)化,這表明黃芪多糖對(duì)培養(yǎng)的心肌細(xì)胞和離體心臟均具有抗自由基損傷的作用。凌洪鋒等 (2005)應(yīng)用D-半乳糖復(fù)制小鼠衰老模型與動(dòng)脈粥樣硬化 (AS)兔模型,觀察黃芪多糖的抗氧化作用。結(jié)果表明,黃芪多糖顯著提高了血中超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶(CAT)及谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性,降低了血漿、腦勻漿及肝勻漿中過(guò)氧化脂質(zhì) (LPO)水平,并顯著降低了丙二醛水平,從而起到抗衰老及抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。王志祥等 (2006)添加黃芪提取物提高了肉仔雞血清GSH-Px和SOD活性,降低了MDA濃度。賀生中等 (2007)研究表明,APS能使傳染性法氏囊感染雛雞血清中SOD活性提高和MDA含量降低。

    2.6 黃芪多糖的抗應(yīng)激作用

    彭玉麟報(bào)道 (2001),黃芪多糖可阻止應(yīng)激反應(yīng)警戒期的腎上腺增生和胸腺萎縮,阻止應(yīng)激反應(yīng)抵抗期和衰竭期出現(xiàn)的異常反應(yīng),從而起到抗應(yīng)激作用。劉風(fēng)華 (1998)使用黃芪、甘草等復(fù)方添加劑用于蛋雞抗應(yīng)激試驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組比對(duì)照組生產(chǎn)性能指標(biāo)提高,并可預(yù)防熱應(yīng)激,全面協(xié)調(diào)生理功能作用明顯,特別對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝過(guò)程中酶的雙向調(diào)節(jié)效果顯著,在一定程度上減輕和消除了熱應(yīng)激對(duì)蛋雞生理機(jī)能的影響。韓燕 (2003)報(bào)道黃芪多糖對(duì)刺激后的小鼠的體重、白細(xì)胞數(shù)目及肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)都有明顯的促增長(zhǎng)和保護(hù)作用。劉潤(rùn)珍等用黃芪多糖注射液對(duì)4批次8 000只健康京白雞從7日齡開(kāi)始注射,產(chǎn)蛋前共注射5次,產(chǎn)蛋后改為飲水服用黃芪多糖注射液,可大大提高雛雞的抗病力和成活率,且對(duì)雛雞的增重、生長(zhǎng)發(fā)育和蛋雞產(chǎn)蛋無(wú)任何不良影響。

    2.7 黃芪多糖調(diào)節(jié)血糖的作用

    黃芪多糖具有雙向調(diào)節(jié)血糖的作用。它能使葡萄糖超負(fù)荷的小鼠血糖明顯降低,也能明顯對(duì)抗腎上腺素引起的小鼠血糖升高反應(yīng),而且它還能明顯對(duì)抗苯乙雙胍引起的小鼠實(shí)驗(yàn)性低血糖,但是它對(duì)胰島素性低血糖無(wú)明顯影響。通過(guò)超微結(jié)構(gòu)觀察,發(fā)現(xiàn)黃芪多糖對(duì)小鼠肝細(xì)胞無(wú)損傷作用,不能引起肝糖元異生和積蓄。楊明等 (1992)研究表明,黃芪多糖的雙向調(diào)節(jié)作用可能與其具有緩沖能力有關(guān)。

    3黃芪多糖在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用

    黃芪多糖在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的應(yīng)用日趨廣泛。研究結(jié)果表明,應(yīng)用黃芪多糖作為豬飼料添加劑對(duì)提高斷奶仔豬成活率、增重和斷奶重,抑制腸道有害菌群,降低仔豬腹瀉發(fā)生率,增強(qiáng)仔豬免疫力以及提高生產(chǎn)性能等方面都有明顯的效果。王樹(shù)華等 (1999)用含黃芪的八味中草藥配方測(cè)仔豬增重效果,結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃芪對(duì)仔豬生長(zhǎng)有促進(jìn)作用。李同洲等 (2007)研究顯示,添加黃芪多糖可以提高斷奶仔豬的日增重,改善飼料增重比,降低腹瀉率,同時(shí)提高了斷奶仔豬對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化率,其中以添加0.05%的黃芪多糖效果最好。胡倉(cāng)云等(2007)研究表明,黃芪多糖既能提高仔豬的免疫功能、增強(qiáng)機(jī)體抵抗力、降低斷奶仔豬腹瀉的發(fā)病率、提高成活率,又能促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)發(fā)育,提高增重速度。宗秀君等 (2009)研究表明,黃芪多糖對(duì)仔豬黃痢治療效果好,特別是在發(fā)病初期治療效果更顯著。此外,在黃芪多糖提高母豬繁殖性能方面,侯曉礁等 (2009)在妊娠后期母豬飼糧中添加 300 g/t黃芪多糖粉,窩均產(chǎn)仔數(shù)、窩均活仔數(shù)、窩均活仔重均高于對(duì)照組,弱仔率、死胎率、木乃伊率和畸形率分別比對(duì)照組降低 3.53%、1.03%、0.35%和0.32%。

    斷奶仔豬在各種應(yīng)激的影響下,常常引發(fā)免疫功能下降,導(dǎo)致對(duì)外界病原微生物抵御能力降低,容易造成消化系統(tǒng)紊亂、嚴(yán)重腹瀉、生長(zhǎng)停滯,甚至死亡。黃芪多糖具有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用,它能提高淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率,提高機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答能力,增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬能力,對(duì)各種藥物及不同原因引起的免疫功能降低,均有增強(qiáng)作用。郭小清等 (2004)報(bào)道,黃芪多糖作為干擾素的誘生劑具有抗病毒、增強(qiáng)免疫功能的作用,對(duì)豬圓環(huán)病毒病、豬流感、藍(lán)耳病等病毒性疾病的防治,取得了一定成效。任敏等 (2006)研究了在斷奶應(yīng)激模式下,APS的添加對(duì)斷奶仔豬免疫功能及腹瀉指標(biāo)的影響,結(jié)果表明,在斷奶仔豬日糧中添加APS可明顯提高仔豬的細(xì)胞免疫功能和體液免疫功能,有效消除早期斷奶應(yīng)激所致的免疫抑止作用,明顯降低腹瀉頻率。許靜波等 (2007)研究結(jié)果表明,應(yīng)用一定劑量的黃芪多糖能極顯著提高仔豬豬瘟疫苗免疫后的抗體水平 (P<0.01),顯著提高仔豬外周血嗜中性白細(xì)胞百分?jǐn)?shù)和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率 (P<0.05)。張飛等 (2010)報(bào)道,一定劑量的黃芪多糖能顯著提高斷奶仔豬血清中SOD含量(P<0.05),顯著降低斷奶仔豬血清中MDA含量 (P<0.05),對(duì)恢復(fù)早期斷奶仔豬血清中NO含量有明顯的促進(jìn)作用,這說(shuō)明一定劑量的黃芪多糖對(duì)提高斷奶仔豬的免疫功能和抗氧化性能具有一定的促進(jìn)作用。

    綜上所述,黃芪多糖能明顯促進(jìn)機(jī)體非特異性免疫和特異性免疫,提高機(jī)體的抗病力和抵抗力;可作為免疫佐劑與疫苗配合使用,顯著提高疫苗保護(hù)力和機(jī)體抵抗力;還能誘生干擾素產(chǎn)生抗病毒、抗腫瘤作用,用于治療病毒性、腫瘤性疾病。黃芪多糖具有極其廣泛的生物學(xué)功能,作為中草藥的一種,具有安全、無(wú)毒、穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),在養(yǎng)豬生產(chǎn)中的作用效果顯著,應(yīng)用前景廣闊。將黃芪多糖開(kāi)發(fā)為一類增強(qiáng)豬只免疫功能、提高豬群抗病和抗感染能力的飼料添加劑使用,這對(duì)于防治畜禽疾病,推進(jìn)動(dòng)物飼料 “無(wú)抗生素化”或減量使用抗生素的進(jìn)程,消除國(guó)際上對(duì)我國(guó)豬肉出口的 “綠色貿(mào)易壁壘”,保證豬肉生產(chǎn)的安全和我國(guó)生豬產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展都具有重大意義。

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