延胡索乙素對老齡大鼠血液粘度及紅細胞變形性的影響

馬伯艷，袁良杰，牛雯穎，李麗琦，肖洪彬

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040;2.黑龍江省中醫(yī)研究院，黑龍江 哈爾濱 150036)

現(xiàn)代醫(yī)學研究認為，血液流變學和動力學異常是諸多老年疾病的重要致病因素和基本病理改變。中醫(yī)理論認為，人體血液正常在脈管中運行以濡養(yǎng)五臟六腑、四肢百骸，賴之于氣的正常推動、溫煦。隨著年齡的增長，人體氣血運行逐漸遲緩而形成瘀滯，最終形成“濃”、“黏”、“凝”、“聚”的病理狀態(tài)，即血液流變學發(fā)生改變。延胡索(CorydalisyanhusuoW.T.Wang)是常用的活血化瘀、理氣止痛中藥，延胡索乙素(dl－tetrahydropalmatine，dl－THP)是延胡索中主要成分，具有明顯鎮(zhèn)痛鎮(zhèn)靜催眠作用［1－3］。本文以老齡大鼠為研究對象，以青年大鼠作為對照，就dl－THP對老齡大鼠血液粘度及紅細胞變形性的影響進行實驗研究，現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 材料

1.1 動物

清潔級健康Wistar老齡大鼠30只、青年大鼠10只，由黑龍江中醫(yī)藥大學GRP提供(合格證號SCXK(黑)2008004);室溫20～22℃，自由飲水，固體飼料飼養(yǎng)。

1.2 藥物

羅痛定片:四川金藥師制藥有限公司生產(chǎn)，主要成分為延胡索乙素，批號091101。

1.3 試劑

1%抗凝劑:2ml肝素鈉注射液(每瓶 2ml，12500U)加10.5ml生理鹽水而成;20%烏拉坦:20g氨基甲酸乙酯用生理鹽水溶解，定容至100ml即可，密封常溫保存。

1.4 儀器

KQ－800KDE型高功率數(shù)控超聲儀(昆山市超聲儀器有限公司);BECKMAN超速離心機(美國貝克曼庫爾特有限公司);LBY－N6B型血液粘度儀(北京普利生儀器有限公司);LBY－BX型紅細胞變形儀(北京普利生儀器有限公司);TGL－16G型高速臺式離心機(上海醫(yī)用分析儀器廠);分析天平(梅特勒托利多儀器上海有限公司)。

2 方法

2.1 動物分組及給藥

25～36月齡Wistar大鼠30只，雌雄各半，體質(zhì)量(320±46)g，按體質(zhì)量隨機分為延胡索乙素高(延高)、低劑量組(延低)、老齡空白組。另取3～4月齡Wistar青年大鼠10只，雌雄各半，體質(zhì)量(108±19)g，作為青年空白組。延胡索乙素高劑量組按132.8mg/kg濃度灌胃給藥、低劑量組按33.2mg/kg濃度灌胃給藥，各組按10ml/kg體積灌胃，每日1次，連續(xù)給藥14天。

2.2 取血

取血前禁食24h，不禁水，末次給藥1h后，大鼠腹腔注射20%烏拉坦5ml/kg麻醉，分離右側(cè)頸總動脈，采血測定各項指標。

2.3 全血粘度及血漿黏度測定 LBY－N6B型血液粘度儀測定。

2.4 紅細胞變形性測定方法 激光衍射法。

2.5 統(tǒng)計學處理

3 結(jié)果

3.1 延胡索乙素對老齡大鼠全血粘度及血漿黏度的影響 結(jié)果見表1。

表1 延胡索乙素對老齡大鼠全血粘度及血漿黏度的影響(s，n=10)

表1 延胡索乙素對老齡大鼠全血粘度及血漿黏度的影響(s，n=10)

注:與老齡空白組比較，*P﹤0.05，＊＊P﹤0.01。

組別 全血粘度(mpa.s)血漿黏度(mpa.s)低切(10s－1)高切(150s－1)青年對照 8.09 ±1.60＊＊ 3.77±0.33＊＊ 0.95±0.02＊＊老齡空白 11.88 ±2.41 4.42 ±0.68 1.06 ±0.067延高 9.57 ±1.76* 3.92 ±0.53 1.03 ±0.036延低10.10 ±1.91 4.13 ±0.75 1.05 ±0.043

由表1可見，老齡空白對照組在高、低切變率下的全血粘度及血漿黏度與青年對照組比較，均顯著升高(P＜0.01)，表明老齡大鼠全血粘度和血漿黏度均高于青年大鼠;與老齡空白對照組比較，延胡索乙素高劑量組顯著降低老齡大鼠低切變率下的全血粘度(P＜0.05)，但對高切變率下全血黏度及血漿黏度影響不顯著，延胡索乙素低劑量組對全血粘度及血漿黏度雖有降低趨勢，但無統(tǒng)計學意義。

3.2 延胡索乙素對老齡大鼠紅細胞壓積及變形性的影響 結(jié)果見表2。

表2 延胡索乙素對老齡大鼠紅細胞壓積及變形性的影響(s，n=10)

表2 延胡索乙素對老齡大鼠紅細胞壓積及變形性的影響(s，n=10)

注:與老齡空白組比較，*P﹤0.05，＊＊P﹤0.01。

紅細胞變形指數(shù)200s－1 500s－1 1 000s－1青年對照 41.4 ±1.57＊＊ 44.5 ±2.22＊＊ 46.1 ±2.35組別＊＊老齡空白 37.9 ±1.72 40.8 ±1.08 42.2 ±1.12延高 38.7 ±1.80 41.4 ±2.16 43.0 ±2.30延低38.3 ±2.38 41.1 ±1.83 42.9 ±1.63

由表2可見，與青年對照組比較，老齡空白對照組的紅細胞變形指數(shù)均顯著降低(P＜0.01);延胡索乙素兩個劑量組雖有升高紅細胞變形性的趨勢，但與老齡空白組比較沒有統(tǒng)計學意義。

4 討論

血液流變學屬生物力學及生物流變學分支，是近30年來才發(fā)展成為一門獨立的新興的邊緣學科。對血液流變特性研究的重大意義在于它可以給某些疾病的發(fā)生、發(fā)展提供預報性資料，甚至于在尚無臨床癥狀時作為預報某些疾病的重要手段。中醫(yī)學關(guān)于血瘀證的研究成果表明，血液流變學中各項指標的改變可以很大程度上反映血瘀證的“濃”、“黏”、“凝”、“聚”狀態(tài)。從血液流變學角度探討血瘀證實質(zhì)以及活血化瘀藥物的作用和機制是目前研究熱點。全血粘度是反映血液流變學基本特征的參數(shù)，也是反映血液粘滯程度的重要指標，血液粘度增高會引起血流阻力增加，使血流速度減慢，最后導致血流停滯，直接影響臟器血液供應(yīng)，導致疾病。因此，血液粘度檢驗可為臨床許多疾病的診治和預防提供一定的參考依據(jù)。不同切變率下的全血粘度值意義不同，其中低切變率下的全血粘度值反映紅細胞的聚集程度;高切變率下的全血粘度反映紅細胞的變形程度;中切粘度值為低切到高切粘度變化的過渡點，其臨床意義不十分明顯。血漿粘度是影響全血粘度的重要因素之一，血漿粘度升高全血粘度必然增高，其特點是不隨著切變率的變化而變化。紅細胞變形性是指紅細胞在外力作用下，改變自身形態(tài)的能力。紅細胞變形性下降使紅細胞不能通過直徑比其小的血管，引起紅細胞聚集，血液粘滯度增高，造成微循環(huán)障礙等。本研究結(jié)果顯示，老齡大鼠較之青年大鼠各切變率下全血粘度以及血漿粘度顯著升高(P＜0.01，P＜0.01)、紅細胞變形性明顯降低(P＜0.01)，提示隨著年齡增長，血液流變學發(fā)生異常。而延胡索乙素可以改善低切變率下全血粘度(P＜0.05)，對血漿粘度有降低趨勢，同時對紅細胞變形性有升高趨勢，但與老齡空白組比較無統(tǒng)計學意義。提示作為活血行氣藥物延胡索主要成分的延胡索乙素，可能主要影響老齡大鼠紅細胞聚集性，而對紅細胞變形性影響不明顯。紅細胞是血液中重要的有形成分，其聚集性和變形性是影響血液流變學的主要因素，而紅細胞本身聚集性、變形性改變與紅細胞膜結(jié)構(gòu)和成分變化有關(guān)，因此，本課題將進一步從紅細胞膜成分、結(jié)構(gòu)等微觀層次探討延胡索乙素對老齡大鼠血液粘度以及紅細胞變形性產(chǎn)生影響的機制。

［1］徐婷，金昔陸，曹惠明.延胡索乙素藥理作用的研究進展［J］.中國臨床藥學雜志，2001，10(1):58 －60.

［2］王琴，華渡，呂圭源.延胡索乙素的心血管藥理作用研究概況［J］.中華實用中西醫(yī)雜志，2006，19(15):1864－1865.

［3］王紅，田明，王淼，等.延胡索現(xiàn)代藥理及臨床研究進展［J］.中醫(yī)藥學報，2010，38(6):108 －111.