β-HCG在惡性腫瘤診斷中的臨床價(jià)值

浦 春 楊書才

（皖南醫(yī)學(xué)院弋磯山醫(yī)院，安徽 蕪湖 241001）

國(guó)內(nèi)外大量資料[1-3]表明，腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、惡變以及轉(zhuǎn)移與人絨毛膜促性腺激素β亞單位的作用密切相關(guān)。人絨毛膜促性腺激素[2,3]（Human Chorionic Gonadotropin，HCG）是由胎盤合體滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種維持婦女妊娠的糖蛋白激素。HCG由A鏈和B鏈共價(jià)結(jié)合而成，其N端的A鏈與LH、TSH、FSH 共用，羥基端B鏈?zhǔn)翘禺惖模磉_(dá)完整的這種激素分子活性。臨床上首先應(yīng)用的是其在妊娠診斷中的意義，后來(lái)在某些滋養(yǎng)層疾病和某些腫瘤診斷中的價(jià)值漸為人們所認(rèn)識(shí)。近年來(lái)國(guó)外學(xué)者對(duì)異位分泌β-HCG的研究日益增加，并將其確認(rèn)為揭示腫瘤生物學(xué)意義的一個(gè)頗有潛力的診斷指標(biāo)。本研究從6237人份檢測(cè)多腫瘤標(biāo)志物的病例中篩選出44份β-HCG陽(yáng)性的病例，并對(duì)病例進(jìn)行具體的分析，以探討其對(duì)惡性腫瘤的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

2009年7月至2011年7月在皖南醫(yī)學(xué)院弋磯山醫(yī)院就診或者參加健康體檢并檢測(cè)多腫瘤標(biāo)志物（C12）的病人共計(jì)6237人次，從中篩選出44份β-HCG陽(yáng)性（β-HCG＞3ng/mL）的病例。

1.2 標(biāo)本采集

空腹靜脈采血2mL，不加抗凝劑，離心2000rpm×5min，分離血清，4℃冰箱保存，2d內(nèi)完成檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)儀器及試劑

湖州數(shù)康生物科技有限公司生產(chǎn)的HD-2001A生物芯片檢測(cè)儀，多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測(cè)試劑（C-12）。

1.4 檢測(cè)原理

多腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)系統(tǒng)是基于雙抗體夾心的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法，在固相基質(zhì)上包被12種腫瘤標(biāo)志物的抗體，捕捉被檢者血清中對(duì)應(yīng)的腫瘤標(biāo)志物，結(jié)合第二抗體（標(biāo)有示蹤標(biāo)記物），然后催化化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生光信號(hào)，用專門的芯片閱讀儀讀取光信號(hào)，對(duì)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行定量檢測(cè)。

1.5 檢測(cè)方法

將待測(cè)血清和已配制好的標(biāo)準(zhǔn)品加入芯片各小孔中，100μL/孔，37℃，250rpm搖床振蕩30min；用洗液沖洗各孔，將芯片放入洗盒，注滿洗液，37℃，250rpm搖床洗滌8min，重復(fù)洗滌4次；輕拍干，反應(yīng)液l00μL /孔，37℃ 250rpm搖床振蕩30分鐘；用洗液沖洗各孔，剝離芯片上部，如上洗滌4次；輕拍干，每孔加入20μJ已等比混合15min的檢測(cè)液A和B：將芯片放入檢測(cè)儀，讀取圖像，分析數(shù)據(jù)。

1.6 檢測(cè)項(xiàng)目正常參考范圍

HGH＜7.5ng/ml，f-PSA＜1ng/mL，PSA＜5ng/mL，NSE＜13ng/mL，CA125＜35kU/L，F(xiàn)e＜322ng/mL（男）、＜219ng/mL（女），CA19-9＜35kU/L.AFP＜20ng/mL，CEA＜5ng/mL，CA242＜20kU/L，β-HCG＜3ng/mL，CA15-3＜35kU/L （超過(guò)臨界值計(jì)算機(jī)自動(dòng)判定為陽(yáng)性）。

2 結(jié) 果

2.1 β-HCG陽(yáng)性的病例中各種腫瘤的分布

見(jiàn)表1。

表1 β-HCG陽(yáng)性的病例中各種腫瘤的分布

2.2 CA125和β-HCG同時(shí)陽(yáng)性在病例中所占的比例

在44份β-HCG陽(yáng)性的病例中，統(tǒng)計(jì)到CA125的陽(yáng)性率非常高，有33份病例是陽(yáng)性，占了所有病例的75%。

3 討 論

正常的hCG主要功能是維持妊娠黃體，使胚胎得以發(fā)育，從而維持到足月妊娠，胎兒得以分娩。同時(shí)hCG對(duì)母體有免疫抑制作用，以維持妊娠和保持免疫耐受，使胚胎不被母體作為同種異體抗原而被排斥。當(dāng)前β-HCG的在診斷中的應(yīng)用主要集中在早期妊娠診斷及異位妊娠的診斷，很少有人關(guān)注其在惡性腫瘤診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

近年來(lái)發(fā)現(xiàn)異位hCG與正常hCG的生物學(xué)功能存在很大的差異，β亞基主要和激素與受體的結(jié)合有關(guān)，且與惡性腫瘤自我生長(zhǎng)的調(diào)控功能、腫瘤的轉(zhuǎn)移特性和分化程度、以及與腫瘤微環(huán)境和免疫耐受的形成等都具有密切關(guān)系[4]。有實(shí)驗(yàn)表明一定濃度的hCG能顯著抑制PHA刺激的T淋巴細(xì)胞體外增殖和轉(zhuǎn)化，電鏡下發(fā)現(xiàn)瘤細(xì)胞表面也具有與滋養(yǎng)層細(xì)胞表面相似的呈膜狀分布的hCG[5]，因此認(rèn)為，腫瘤組織分布的一定濃度的分泌性hCG可能與腫瘤微環(huán)境的形成有一定的關(guān)系，而瘤細(xì)胞表面的膜結(jié)合型hCG特別是高度糖基化的hCGβ鏈的過(guò)度表達(dá)，使得腫瘤細(xì)胞呈強(qiáng)陰電荷，從而抑制NK、T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞的活化、導(dǎo)致免疫細(xì)胞的活性降低甚至無(wú)能，造成腫瘤的免疫耐受。也有學(xué)者認(rèn)為hCGβ亞單位可以特異性刺激癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，認(rèn)為腫瘤性hCG是一種自分泌因子，具有生長(zhǎng)因子樣作用，類似于神經(jīng)生長(zhǎng)因子、血小板衍生生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子[6]。Melmed等（1993年）報(bào)道功能性hCG二聚體能促進(jìn)小鼠惡性淋巴瘤NB2細(xì)胞的體外生長(zhǎng)。其作用機(jī)制可能為：腫瘤細(xì)胞表面有hCG的受體，與hCG結(jié)合后可激活胞內(nèi)cAMP信號(hào)傳導(dǎo)途徑，調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的其他“生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子”的產(chǎn)生，后者進(jìn)一步促進(jìn)和調(diào)控腫瘤細(xì)胞的增殖、分化和生長(zhǎng)。

本研究回顧了2009年7月至2010年月來(lái)我院入診的6237份比例，從中篩選出了44份β-HCG陽(yáng)性的病例，發(fā)現(xiàn)肺癌占34%，肝癌、胃癌、結(jié)腸癌各占11%，賁門癌占4.5%，乳腺癌、胰腺癌、甲狀腺癌各占2%。這與國(guó)外學(xué)者報(bào)導(dǎo)的hCG在膀胱、肺、胃、結(jié)腸、食管等腫瘤中表達(dá)，并與腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有關(guān)是基本吻合的[7-9]。

在本次研究中，令人感興趣的是我們還發(fā)現(xiàn)了CA125與β-HCG具有極高的相關(guān)性，雖然肺癌的病人CA125陽(yáng)性率比較高，但是這還不足以解釋肺癌只占34%，而CA125和β-HCG同時(shí)陽(yáng)性卻占了75%。目前有關(guān)CA125和β-HCG的相關(guān)性研究只集中于異位妊娠的診斷。目前還沒(méi)有看到任何文獻(xiàn)或研究報(bào)導(dǎo)過(guò)在腫瘤診斷中的應(yīng)用。如果我們?cè)谶@方面開(kāi)展研究，CA125和β-HCG的聯(lián)合檢測(cè)也有可能有助于對(duì)惡性腫瘤的臨床診斷。

綜上所述，β-HCG作為一種惡性腫瘤標(biāo)記物在許多腫瘤組織細(xì)胞中都得以證實(shí)，隨腫瘤的類型、起源不同，β-HCG分泌水平也有所差異，而且其分泌量與腫瘤的分級(jí)密切相關(guān);含量越高，腫瘤組織細(xì)胞分化越低，腫瘤預(yù)后越差。還可以通過(guò)抑制機(jī)體抗腫瘤免疫活性而促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。因而，可以認(rèn)為β-HCG的檢測(cè)對(duì)惡性腫瘤診斷、監(jiān)測(cè)病情變化、評(píng)價(jià)藥物療效、隨訪均是個(gè)極為重要的指標(biāo)，并可為探索腫瘤生物治療開(kāi)辟新途徑。

[1] Acevodo HF,Tong JY,Hartsock RJ.Human chorinonic gonado tropin-beta subunit gene expression in cultured human fetal and cancer cells of different types and o rigins[J].Cancer,1995,76(8):1647-1473.

[2] 徐世文,潘菊芬,鄧為民,等.應(yīng)用親和層析獲取高活性HCG的初步研究[J].免疫學(xué)雜志,1998,14 (1) : 33-35.

[3] Bidart JM,Baudin E,Troalen F,et al.Eutopic and ectopic production of glycoprotein hormones alpha and beta subunit[J ].Ann Endocrinol Paris,1997,58 (2): 12-28.

[4] Hayashi T,Arai G,HyochiN,et al.Suppression of spermatogenesis in ipsilateral and contralateral testicular tissues in patientswith seminoma by human chorionic gonadotropin beta subunit[J].Urology,2001,58 (2) :251-257.

[5] Kayisli U A,Selam B,Guzeloglu K O,et al.Human chorionic gonadotrop in contributes to maternal immunotolerance and endometrial apop tosis by regulating Fas2Fas ligand system [J].J Immunol,2003,171(5): 2305-2313.

[6] Moroni M,Veronese S,Schiavo R,et al.Ep idermal growth factor receptor exp ression and activation in nonseminomatous germ cell tumors[J].Clin Cancer Res,2001,7(9): 2770-2775.

[7] Janssens J P,Verlinden I,GungorN,et al.Protein biomarkers for breast cancer p revention[J].Eur Cancer,2004,13(4): 307-317.

[8] Keizo M,Yasushi A,Akihara O.Autop sy case of p rimarychorocarcinoma of the urinary bladder[J].Pathol Int,2005,55 (4) : 216-222.

[9] Chen F,Tatsumi A,Numoto S.Combined choriocarcinoma and acedocarcinoma of the lung occurring in a man: case report andreview of the literature[J].Cancer,2001,91(1): 123-129.