貝那普利對(duì)氨氯地平藥代動(dòng)力學(xué)的影響研究

房紹鵬

（吉林省食品藥品審評(píng)中心，吉林 長(zhǎng)春 130062）

慢性腎臟病的發(fā)病率逐年增加，單一用藥治療高血壓的有效率僅為40%[1]，增加劑量雖可提高療效，但同時(shí)也提高了不良反應(yīng)的發(fā)生率。為了增加療效，降低心血管事件的發(fā)生率，通常將轉(zhuǎn)換酶抑制劑貝那普利和鈣拮抗劑氨氯地平聯(lián)合用藥治療高血壓，其降壓療效約為單方制劑治療2倍[2]。本試驗(yàn)研究氨氯地平的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)及其與貝那普利的相互作用，總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 藥品與試劑

復(fù)方貝那普利片（廠家：北京諾華制藥有限公司，批號(hào)：H20090180）10mg，苯磺酸氨氯地平片（廠家：北京賽科藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)：H20010700）5mg，普奈洛爾（廠家：山西晉華藥業(yè)有限公司，批號(hào)：H14023169），乙酸乙酯、異丙醇、甲酸、冰醋酸為色譜純，鹽酸、碳酸鈉為分析純。

1.1.2 儀器

LC-MS/MS系統(tǒng)包括質(zhì)譜儀、高效液相色譜儀和質(zhì)譜工作站。

1.1.3 受試者

健康男性受試者18例，年齡（25±3）歲，體質(zhì)量指數(shù)（21.0±1.1）kg/m2，經(jīng)體檢、胸片、心電圖、血尿常規(guī)、血生化檢查均無(wú)異常，無(wú)藥物過(guò)敏史和藥物依賴史，無(wú)精神病史，無(wú)家族性疾病史，無(wú)體位性低血壓史。試驗(yàn)前2周內(nèi)未服用任何藥物，所有受試者自愿參加試驗(yàn)并簽署知情同意書，試驗(yàn)方案經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 本試驗(yàn)為隨機(jī)、開(kāi)放試驗(yàn)

采用兩制劑、兩周期交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)。18例健康男性受試者自身對(duì)照，交叉口服復(fù)方貝那普利或氨氯地平，試驗(yàn)清洗期為12d。受試者禁食12h后口服規(guī)定制劑，200mL溫開(kāi)水送服，藥后4h統(tǒng)一進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)餐，試驗(yàn)期間禁忌煙酒和含咖啡因飲料。避免臥床，但也避免劇烈運(yùn)動(dòng)。分別于服藥前（0h）和服藥后15.0、25.0、35.0、45.0min，1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、8.0、10.0、12.0、24.0、48.0、72.0、96.0、120.0h于肘正中靜脈取血5mL，置于含肝素的離心試管內(nèi)，離心分離血漿，存于-70℃冰箱內(nèi)待測(cè)。

1.2.2 色譜、質(zhì)譜條件

色譜柱：NucleosilODS柱（50cm×2mm，5μm）；流動(dòng)相=甲醇∶水∶冰醋酸∶三乙胺（70∶30∶1.5∶1，V/V/V/V）；流速：0.2mL/min；柱溫：30℃。離子源為電噴霧離子源，離子噴射電壓4500V，溫度為320℃；氣簾氣體（N2）壓力為30unit，離子源氣GS1（N2）壓力為29unit，離子源氣體GS2（N2）壓力為22unit，碰撞氣CAD（N2）壓力為5unit；正離子方式檢測(cè)；掃描方式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z 409.4→m/z238.1（氨氯地平）和m/z 260.3→m/z 116.3（普奈洛爾，內(nèi)標(biāo)）；氨氯地平和內(nèi)標(biāo)普奈洛爾的DP電壓為40V，碰撞能量為25eV，EP為8V。

1.2.3 血漿樣品預(yù)處理

取0.2mL血漿樣品加入1mol/L NaOH溶液50μL，混勻后加入提取劑乙酸乙酯（含內(nèi)標(biāo)普奈洛爾0.2μg/L）1mL進(jìn)行提取，渦流混合5min，離心10min（3000r/min），分取上層有機(jī)相于室溫下氮?dú)饬鞔蹈?，殘留物溶?.1mL流動(dòng)相中，取10μL進(jìn)樣。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本組數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量單位采用（±s）表示，組間比較采用均數(shù)t檢驗(yàn)，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 方法的專屬性

將受試者空白血漿的色譜圖和血漿中加入氨氯地平和內(nèi)標(biāo)普奈洛爾得到的色譜圖進(jìn)行比較，證明血漿中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾測(cè)定。其中氨氯地平和內(nèi)標(biāo)普奈洛爾的保留時(shí)間分別為2.2、1.2min。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍

取標(biāo)準(zhǔn)系列血漿樣品0.2mL，分別對(duì)應(yīng)氨氯地平血漿濃度為0.02、0.04、0.08、0.20、0.40、0.80、2.00、4.00μg/L，其余同“1.2.3血漿樣品預(yù)處理”項(xiàng)下操作，以待測(cè)物氨氯地平的濃度為橫坐標(biāo)，以待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值為縱坐標(biāo)，用加權(quán)最小二乘法進(jìn)行線性回歸。測(cè)定血漿中氨氯地平濃度的線性范圍為0.02～4.00μg/L，最低定量濃度均為0.02μg/L。氨氯地平的典型線性回歸方程為y=0.143x-0.00249 （r=0.9949）。

2.3 方法的精密度和準(zhǔn)確度

制備氨氯地平低、中、高（0.04、0.20、4.00μg/L）3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品各6份，連續(xù)測(cè)定4d，求得本法的精密度與準(zhǔn)確度。氨氯地平3個(gè)濃度水平的日內(nèi)和日間的RSD均＜15%，相對(duì)回收率為98.0%～100%。

2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

本試驗(yàn)分別考察了血漿樣品經(jīng)提取后在室溫放置24h和反復(fù)凍融3次后的穩(wěn)定性，結(jié)果表明苯磺酸氨氯地平的血漿樣品在本試驗(yàn)條件下是穩(wěn)定的，相對(duì)回收率為97.2%～99.8%。

2.5 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

見(jiàn)表1。

表1 受試者單次口服復(fù)方貝那普利或苯磺酸氯地平后氨氯地平的平均藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)[（±s），n=18]

表1 受試者單次口服復(fù)方貝那普利或苯磺酸氯地平后氨氯地平的平均藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)[（±s），n=18]

參數(shù) 復(fù)方貝那普利 苯磺酸氨氯地平Ke（/h） 0.014±0.002 0.015±0.002 t1/2 （h） 35±12 38±6 tmax（h） 5.4±1.1 5.2±1.2 Cmax（μg/L） 2.2±0.4 2.3±0.2 AUC0-324[μg/（L·h）]98±25 99±10 AUC0-∞[μg/（L·h）]101±15 104±20 CL/F（L/h） 70±25 48±20

3 討 論

氨氯地平是二氫吡啶類鈣拮抗劑，可抑制鈣離子跨膜進(jìn)入平滑肌細(xì)胞和心肌細(xì)胞，舒張血管平滑肌而產(chǎn)生擴(kuò)張血管、抗高血壓的作用。氨氯地平與鈣通道的相互作用取決于它和受體位點(diǎn)結(jié)合和解離的漸進(jìn)性速率，是一個(gè)慢通道阻滯劑。單藥治療高血壓往往難以達(dá)到理想目標(biāo)值貝那普利和氨氯地平聯(lián)用具有良好的降壓效果，并且對(duì)于合并蛋白尿、心血管疾病、糖尿病等高風(fēng)險(xiǎn)人群具有特別的益處。本文研究結(jié)果經(jīng)方差分析表明無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，說(shuō)明兩種藥物在健康人體內(nèi)的吸收速率、吸收程度及消除速率基本一致，即在貝那普利和苯磺酸氨氯地平組成的復(fù)方藥物制劑中，貝那普利不影響氨氯地平在健康受試者體內(nèi)的吸收、分布和消除。tmax和t1/2與國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道基本保持一直。

[1]朱錦秀,李見(jiàn)春,鄭青山.氨氯地平治療輕、中度高血壓有效性與安全性的Meta分析[J].中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2005,10(2):204-210.

[2]劉培良,陳瑤,安向光,等.氨氯地平和苯那普利聯(lián)合治療對(duì)高血壓患者腎功能的影響[J].中國(guó)心血管病研究雜志,2005,3(10):760-762.