壯藥黃根對(duì)肝纖維化大鼠肝臟纖維增生程度的影響

楊增艷 韋金育 張青青 韋 濤

廣西民族醫(yī)藥研究院，廣西 南寧 530001

黃根為茜草科植物南山花Prismatomeris connata Y．Z．Ruan．的根。具有利濕退黃，強(qiáng)筋壯骨，祛瘀生新，涼血止血等功效，可用于風(fēng)濕骨痛，跌打損傷，白血病，矽肺，牙齦出血，尿路感染的治療［1］。在廣西壯族民間常用黃根治療急、慢性肝炎。本課題組通過(guò)研究黃根對(duì)肝纖維化大鼠模型的病理學(xué)改變，進(jìn)而觀察其抗肝纖維化作用。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

Wistar大鼠60只，SPF級(jí)，體重203±13.1g，雌雄各半。購(gòu)自廣西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。飼養(yǎng)于20～25℃，相對(duì)濕度60±10%環(huán)境中。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物

黃根醇提物，本院提取。臨用時(shí)蒸餾水調(diào)制所需濃度。秋水仙堿，云南昊幫制藥有限公司生產(chǎn)。批號(hào):090920。用研缽研成粉末，蒸餾水溶解并稀釋至實(shí)驗(yàn)所需濃度，臨用搖勻。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

BS224S型電子天平 (北京賽多利斯);AMS－18A全自動(dòng)生化分析儀 (北京奧普森);SW－261－79型電熱恒溫水浴箱 (上海醫(yī)療器械廠)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 造模方法

首次大鼠皮下注射純CCl45ml/kg體重，以后改為皮下注射CCl440%花生油溶液3ml/kg體重，每3天1次，共6周。喂正常固體飼料，自由飲水［2］。

2.2 藥效實(shí)驗(yàn)

Wistar大鼠60只，隨機(jī)分為6組:黃根高劑量組、黃根中劑量組、黃根低劑量組、空白組、模型組、秋水同堿組，每組10只。自造模第1天起，黃根高、中、低劑組分別按5.6g(生藥)/Kg、2.8g(生藥)/Kg、1.4g(生藥)/Kg劑量給藥，秋水仙堿組按0.2mg/Kg劑量給藥?？瞻捉M、模型組分別予等體積蒸餾水，每天灌胃1次，共6周。各組末次給藥后禁食12小時(shí)，稱(chēng)重，經(jīng)戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，取大鼠右小葉肝臟，剪取約0.5厘米厚度肝組織，中性甲醛緩沖液固定，石蠟包埋，切片為5μm厚度。經(jīng)多級(jí)酒精脫水，二甲苯透明，作HE染色，天狼猩紅染色，光鏡下拍攝病理組織照片，觀察纖維組織增生程度的變化情況［3］。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 大鼠肝組織病理學(xué)照片

空白組大鼠肝組織中肝小葉結(jié)構(gòu)清晰完整，肝細(xì)胞索排列整齊，無(wú)肝細(xì)胞變懷壞死，無(wú)炎細(xì)胞浸潤(rùn)，無(wú)纖維增生 (見(jiàn)圖1)。模型組大鼠肝組織可見(jiàn)肝細(xì)胞排列紊亂，肝細(xì)胞空泡樣變性、壞死，匯管區(qū)大量纖維組織增生并有散在炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，部分大鼠可見(jiàn)纖維組織增生延伸到肝小葉，分隔肝小葉形成假小葉 (見(jiàn)圖2)。陽(yáng)性藥組和高劑量組大鼠肝細(xì)胞變性壞死減輕，部分大鼠可見(jiàn)假小葉(見(jiàn)圖3－4);中劑量組和低劑量組大鼠肝細(xì)胞變性、壞死仍較明顯，匯管區(qū)纖維組織增生，部分大鼠可見(jiàn)假小葉(見(jiàn)圖5－6)。

3.2 大鼠肝組織膠原纖維增生的影響

表3 各組大鼠組織膠原纖維增生程度分級(jí)比較情況 (各組n=10)

光鏡下觀察，纖維組織增生情況以“++++”為最嚴(yán)重，“－”為無(wú)纖維增生［4］。正常組大鼠肝組織切片顯示無(wú)肝纖維化形成，模型組纖維增生明顯，說(shuō)明模型已造模成功。高劑量組和模型組對(duì)肝纖維化大鼠均有改善，可明顯降低大鼠纖維增生程度 (P＜0.01)。各組的Riddit分析的R值見(jiàn)表3。

4 討論

病理學(xué)是用自然科學(xué)的方法，研究疾病的病因、發(fā)病機(jī)制、形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能和代謝等方面的改變，揭示疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，從而闡明疾病本質(zhì)的醫(yī)學(xué)科學(xué)［5］。在肝纖維化發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，觀察肝細(xì)胞的功能代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)變化，更有助于探討抗肝纖維化的作用機(jī)理和作用規(guī)律。本實(shí)驗(yàn)的病理學(xué)結(jié)果表明:黃根高劑量組大鼠肝細(xì)胞變性壞死程度減輕，提示黃根具抗肝纖維化作用。但有關(guān)黃根抗肝纖維化的作用機(jī)制，還有待今后更進(jìn)一步的研究。

［1］梁?jiǎn)⒊?，鐘鳴．中國(guó)壯藥學(xué)［M］．廣西民族出版社，2005．

［2］鐘鳴，黃琳蕓，余勝民，等．排錢(qián)草對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的影響［J］．中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，1999，9(4):22．

［3］孫設(shè)宗，唐微，張紅梅．等．云芝多糖對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性肝損傷保護(hù)作用的研究［J］．中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2008，18(9):1217．

［4］中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)肝病專(zhuān)業(yè)委員會(huì)．肝纖維化中西醫(yī)結(jié)合診療指南［J］．中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2006，26(11):1052．

［5］楊燕初，孟冬月．病理學(xué)［M］．人民軍醫(yī)出版社，2007．