• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    新疆地區(qū)煙粉虱類群mtDNA COI基因序列分析

    2011-07-05 03:43:48段曉東馬麗娟姚正培冷春麗馬德英新疆農業(yè)大學農學院新疆烏魯木齊8005烏魯木齊市農業(yè)技術推廣中心新疆烏魯木齊800教育部棉花工程研究中心新疆烏魯木齊8005
    生物安全學報 2011年1期
    關鍵詞:虱的煙粉堿基

    段曉東,馬麗娟,姚正培,曹 騫,冷春麗,馬德英,新疆農業(yè)大學農學院,新疆烏魯木齊8005;烏魯木齊市農業(yè)技術推廣中心,新疆烏魯木齊800;教育部棉花工程研究中心,新疆烏魯木齊8005

    煙粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是一種嚴重危害農業(yè)生產的世界性害蟲,廣泛分布于除南極洲外的90多個國家和地區(qū)(Brown et al.,1995)。由于寄主范圍、寄主植物適應性和傳毒能力等方面的不同,煙粉虱被認為是一個由11個定義明確的高級群組成的復合體,至少包含24個形態(tài)學上難以分辨的種(De Barro et al.,2011),主要有B 型、Q 型和非 B/Q 型(包括 A、K、D、E、G、H、L、M、N 等多種生物型)。其中,B型煙粉虱幾乎在全世界均有分布,其他生物型多為區(qū)域性分布。Q型煙粉虱最初記載于西班牙,現(xiàn)在已經分布于許多國家和地區(qū),如意大利、以色列、摩洛哥、日本、美國、墨西哥、中國等(Palumbo et al.,2001;Horowitz et al.,2003;Muniz,2000;Ueda & Brown,2006;褚棟等,2005)。由于Q型煙粉虱比B型表現(xiàn)出更強的抗藥性,更大的產卵量、化蛹率和成蟲羽化率以及更強的耐極限溫度等生存能力,在部分地區(qū)逐漸取代了B型種群,成為當?shù)氐膬?yōu)勢種群(Hu et al.,2011;Chu et al.,2010)。目前,Q型煙粉虱已經受到越來越多的關注。

    我國于2003年首次在云南昆明發(fā)現(xiàn)了Q型煙粉虱(褚棟等,2005),其后又在北京、河南、山東、遼寧、湖北等地發(fā)現(xiàn)(饒瓊等,2009)。有關新疆煙粉虱的發(fā)生狀況也有一些報道,但均為B型(羅晨等,2002;Ma et al.,2007;Teng et al.,2010)。鑒于近年來Q型煙粉虱在我國的快速擴散,本研究采用mtDNA COI基因作為分子標記,再對新疆地區(qū)煙粉虱的生物型進行鑒定,以期為有關部門對其開展監(jiān)測和防治工作提供依據。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    從新疆煙粉虱發(fā)生的地理區(qū)域采集樣品。挑選煙粉虱雌蟲,-20℃下保存,作為分析蟲樣。煙粉虱的采集時間、地點和寄主見表1。

    表1 被測試煙粉虱種群的信息Table 1 Information on the origin of the tested B.tabaci populations from Xinjiang,NW China,2008 ~2010

    1.2 基因組DNA的提取方法及檢測

    基因組DNA的提取采用氯仿/異戊醇抽提法(周志湘等,2007)。將單頭雌性煙粉虱樣本置于1.5 mL離心管中,用液氮破碎研磨,滴加150 μL提取緩沖液(pH 8.0,50 mmol·L-1Tris-HCl、20 mmol·L-1NaCl、1 mmol·L-1EDTA、1%SDS)勻漿;滴加 5 μL 蛋白酶K(20 mg·mL-1),混勻;60 ℃水浴1 h(中途混勻1~2次);100℃沸水浴5 min。DNA勻漿液中加入200 μL氯仿/異戊醇(24∶1)抽提2次,每次輕柔混勻數(shù)十次,冰上放置 10 min,10000 r·min-1離心 10 min,取上清液;加入2倍體積預冷無水乙醇,輕輕混勻,于 -20 ℃放置30 min,然后12000 r·min-1離心15 min,棄上清液;加入2倍體積預冷的75%乙醇,12000 r·min-1離心15 min,棄上清液。將EP管倒扣于干凈濾紙上,自然干燥30 min,每管加入30 μL超純水,充分溶解后于-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.3 PCR擴增及電泳

    反應程序參考Simon et al.(1994),引物分別為C1-J-2195(5'-ttg att ttt tgg tca tcc aga agt-3')和L2-N-3014(5'-tcc aat gca cta atc tgc cat att a-3')。在1.6%瓊脂糖凝膠上電泳,EB染色后,在凝膠成像系統(tǒng)上觀察,記錄結果。

    1.4 序列的測定與比較

    使用EZNA Gel Extraction Spinportocal D2500-01(OMEGA)膠回收試劑盒進行PCR產物回收純化,純化后的樣品送至北京六合華大基因科技股份有限公司測序。每個地理種群至少測3個煙粉虱個體。登錄NCBI網站,查閱并下載相關的煙粉虱mtDNA COI基因片段序列(表2),通過DNAstar分析軟件,對測序結果及相關引用序列進行比對分析。利用軟件中的MegAlign-ClustalV模型計算出煙粉虱不同地理種群的進化分歧矩陣,并構建系統(tǒng)進化樹,以此分析煙粉虱種群間的遺傳關系,對新疆煙粉虱種群生物型進行鑒定,并推斷其可能來源地。

    2 結果與分析

    2.1 新疆煙粉虱生物型及不同生物型mtDNA COI的序列差異

    所有樣品均得到約840 bp的序列,經測序并提交到GenBank,獲取基因序列編碼。從每個種群所測序列中截取與China Beijing-B相應的720 bp片段序列進行分析。結果表明,同一地區(qū)不同寄主植物上采集到的煙粉虱個體的COI基因序列存在明顯差異;同一地區(qū)同一寄主植物上采集到的煙粉虱種群的COI基因序列也存在明顯差異(表3、圖1)。

    表2 引用mtDNA COI基因片段在GenBank中的登錄號Table 2 The code for reference mtDNA COI sequences and the respective GenBank accession numbers

    表3 被測試煙粉虱種群的生物型Table 3 Biotype of tested B.tabaci populations

    由烏魯木齊市花卉市場采集到的HH-1與吐魯番市溫室不同寄主上采集到的LJ、XHS、QZ煙粉虱個體的COI基因序列完全一樣。序列中各個堿基的含量分別為 178A、142G、308T、92C,A+T 的含量為67.5%。它們與 Morocco Casablanca-Q、France Gironde-Q、USA California-Q、China Jiangsu-Q、China Wuhan-Q等5個已知Q型煙粉虱個體COI基因序列相應的720 bp片段完全一樣;與China Yangzhou-Q、China Jingzhou-Q等2個已知Q型煙粉虱個體COI基因序列相比,具有1個堿基的區(qū)別,為第57位點上的G→C;與Morocco Nador-Q相比,有2個堿基的區(qū)別,為第266位點上的T→C和第294位點上的A→G;與Sudan-Q相比,有12個堿基的區(qū)別,分別為第15位點上的T→A、第74位點上的T→G、第75位點上的G→A、第76位點上的A→C、第87位點上的C→T等;與China Beijing-B、China Guangdong-B、China Hubei-B、USA Florida-B等4個已知B型煙粉虱個體COI基因序列相比,有37個堿基的區(qū)別。

    由吐魯番市煙草上采集的YC與China Yangzhou-Q、China Jingzhou-Q等2個已知Q型煙粉虱個體COI基因序列相比,具有2個堿基的區(qū)別,為第3位點上的T→G和第7位點上的C→T;與Morocco Casablanca-Q、France Gironde-Q、USA California-Q、China Jiangsu-Q、China Wuhan-Q等5個已知Q型煙粉虱個體COI基因序列相比,具有3個堿基的區(qū)別,分別為第3位點上的T→G、第7位點上的C→T、第57位點上的G→C;與Morocco Nador-Q相比,有5個堿基的區(qū)別,分別為第3位點上的T→G、第7位點上的C→T、第57位點上的G→C、第266位點上的T→C、第294位點上的 A→G;與Sudan-Q相比,有15個堿基的區(qū)別,分別為第3位點上的T→G、第7位點上的C→T、第15位點上的T→A、第57位點上的G→C、第74位點上的T→G等。

    由烏魯木齊市不同寄主上采集到的JK-S、HH-2、ZH-O與吐魯番市不同寄主上采集到的TC1、TC2、TC3煙粉虱個體COI基因序列完全一樣。序列中各個堿基的含量分別為182A、139G、310T、89C,A+T 的含量為 68.3%。它們與 China Beijing-B、China Guangdong-B、China Hubei-B、USA Florida-B 等 B 型煙粉虱序列相應的720 bp片段完全一樣。

    2.2 煙粉虱不同生物型mtDNA COI的遺傳距離和系統(tǒng)發(fā)育樹分析

    采用DNAstar軟件中的MegAlign-ClustalV模型計算出煙粉虱不同地理種群的進化分歧矩陣,并構建系統(tǒng)進化樹(圖2~3)。結果發(fā)現(xiàn),煙粉虱和白粉虱Trialeurodes vaporariorum首先分開,同源性接近于70.0%;其后B型煙粉虱和Q型煙粉虱分開,形成2個分支,同源性為93.8% ~94.9%。在Q型分支中,被測樣本 HH-1、LJ、XHS、QZ 與 Morocco Casablanca-Q、France Gironde-Q、USA California-Q、China Jiangsu-Q、China Wuhan-Q、Morocco Nador-Q等6個已知Q型煙粉虱種群聚為一類,同源性為99.7% ~100%;被測樣本YC與China Yangzhou-Q、China Jingzhou-Q等2個已知Q型煙粉虱種群聚為一類,同源性為99.7%;非洲Sudan-Q煙粉虱種群獨自為一類,與其他Q型煙粉虱種群的同源性為97.8% ~98.2%。在B型分支中,被測樣本 JK-S、HH-2、ZH-O、TC1、TC2、TC3 與China Beijing-B、China Guangdong-B、China Hubei-B、USA Florida-B等4個已知B型煙粉虱種群聚為一類,同源性為100%,屬于同一個進化分支。

    圖2 煙粉虱種群的系統(tǒng)聚類樹Fig.2 The relatinoship of the B.tabaci groups from Xinjiang,NW China and references,based on the mt COI gene sequences

    圖3 煙粉虱種群mtDNA COI基因720 bp片段序列的同源性比較Fig.3 Percent identity of 720 the characters examined for COI sequences of B.tabaci collections and reference sequences

    3 討論

    本研究結果表明,在吐魯番市的溫室蔬菜、烏魯木齊市花卉市場內發(fā)現(xiàn)了Q型煙粉虱,并且在寄主一品紅不同樣本群檢測出了B和Q等2種生物型,表明Q型煙粉虱已經傳入新疆。同時,根據被測煙粉虱樣品與已知Q型煙粉虱mtDNA COI基因在NCBI上進行BLAST比對分析發(fā)現(xiàn),自2003年首次在我國發(fā)現(xiàn)Q型煙粉虱至2010年在新疆首次發(fā)現(xiàn),其都在不斷發(fā)生著遺傳變化。由烏魯木齊市花卉市場采集到的HH-1和吐魯番市溫室不同寄主上采集到的 LJ、XHS、QZ 與 Morocco Casablanca-Q、France Gironde-Q、USA California-Q、China Jiangsu-Q、China Wuhan-Q等5個已知Q型煙粉虱的同源性為100%。然而,由吐魯番市煙草上采集的YC與以上5個已知Q型煙粉虱的同源性為99.6%;與China Yangzhou-Q、China Jingzhou-Q等2個已知Q型煙粉虱的同源性為99.7%;與Morocco Nador-Q的同源性為99.3%;與Sudan-Q的同源性為97.8%。這表明入侵新疆的Q型煙粉虱可能有不同來源。

    另外,來自野生植物、花卉市場、溫室、棉田的被測樣本 JK-S、HH-2、ZH-O、TC1、TC2、TC3 與 China Beijing-B、China Guangdong-B、China Hubei-B、USA Florida-B等4個已知B型煙粉虱的同源性為100%。由此可以看出,吐魯番、烏魯木齊主要農業(yè)生產區(qū)域的煙粉虱生物型仍然為B型。B型煙粉虱在新疆依然是主要的防治對象。同時,B型煙粉虱未出現(xiàn)Q型煙粉虱所表現(xiàn)的基因分化現(xiàn)象,這可能與Q型煙粉虱種群間遺傳多樣性高于B型種群有關(Moya et al.,2001)。

    Q型煙粉虱的發(fā)現(xiàn)對新疆的棉花種植業(yè)及設施農業(yè)生產提出了警示和更加嚴峻的挑戰(zhàn),同時印證了Ma et al.(2007)的預測。因此,有關部門在關注B型煙粉虱的同時,也應對新疆Q型煙粉虱的傳播及危害引起足夠的重視,并及時采取措施防止其進一步擴散。此外,已經成功建立的針對B型煙粉虱的防治策略與技術體系都將面臨挑戰(zhàn),因為Q型煙粉虱較B型擁有更強、更廣泛的抗性程度(Hu et al.,2011;Chu et al.,2010)。今后我們還需檢測 Q型煙粉虱的抗藥性狀況,以便針對B型和Q型煙粉虱的發(fā)生狀況和分布區(qū)域提出不同的防治策略。

    褚棟,張友軍,叢斌,徐寶云,吳青君.2005.云南Q型煙粉虱種群的鑒定.昆蟲知識,42(1):54-56.

    羅晨,姚遠,王戎疆,閻鳳鳴,胡敦孝,張芝利.2002.利用mtDNA COI基因序列鑒定我國煙粉虱的生物型.昆蟲學報,45(6):759-763.

    饒瓊,羅漢鋼,汪細橋,周國珍,張宏宇,羅晨.2009.武漢地區(qū)煙粉虱的危害及其生物型鑒定.華中農業(yè)大學學報,28(5):205-210.

    周志湘,萬方浩,張桂芬,陳斌.2007.煙粉虱基因組DNA快速提取方法.植物保護,33(5):131-133.

    Brown J K,F(xiàn)rohlich D R and Rosell R C.1995.The sweetpotato or silverleaf whiteflies:biotypes of Bemisia tabaci or a speciescomplex? AnnualReview ofEntomology,40:511-534.

    Chu D,Wan F H,Zhang Y J and Brown J K.2010.Change in the biotype composition of Bemisia tabaci in Shandong Province of China from 2005 to 2008.Environmental Entomology,39:1028-1036.

    De Barro P J,Liu S S,Boykin L M and Dinsdale A B.2011.Bemisia tabaci:a statement of species status.Annual Review of Entomology,56:1 -19.

    Horowitz A R,Denholm I,Gorman K,Cenis J L,Kontsedalov S and Ishaaya I.2003.Biotype Q of Bemisia tabaci identified in Israel.Phytoparasitica,31:94 -98.

    Hu J,De Barro P J,Zhao H,Wang J,Nardi F and Liu S S.2011.An extensive field survey combined with a phylogenetic analysis reveals rapid and widespread invasion of two alien whiteflies in China.PLoS ONE,6(1):e16061.doi:10.1371/journal.pone.0016061

    Ma D Y,Gorman K,Devine G,Luo W C and Denholm I.2007.The biotype and insecticide-resistance status of whiteflies,Bemisia tabaci(Hemiptera:Aleyrodidae),invading cropping systems in Xinjiang Uygur Autonomous Region.Northwestern China Crop Protection,26:612 -617.

    Moya A,Guirao P,Cifuentes D,Beitia F and Cenis J L.2001.Genetic diversity of Iberian populations of Bemisia tabaci(Hemiptera:Aleyrodidae)based on random amplified polymorphic DNA-polymerase chain reaction.Molecular Ecology,10:891-897.

    Muniz M.2000.Host suitability of two biotypes of Bemisia tabaci on some common weeds.Entomologia Experimentalis et Applicata,95:63 -70.

    Palumbo J C,Horow I and Prabhaker N.2001.Insecticidal control and resistance management for Bemisia tabaci.Crop Protection,20:739 -765.

    Simon C,F(xiàn)rati F,Beckenbach A,Crespi B,Liu H and Flook P.1994.Evolution,weighting,and phylogenetic utility of mitochondrial gene sequences and a compilation of conserved Polymerase Chain Reaction primers.Annals of the Entomological Society of America,87:651 -701.

    Teng X,Wan F H and Chu D.2010.Bemisia tabaci biotype Q dominates other biotypes across China.Florida Entomologist,93:363-368.

    Ueda S and Brown J K.2006.First report of the Q biotype of Bemisia tabaci in Japan by mitochondrial cytochrome oxidase I sequence analysis.Phytoparasitica,34:405 -411.

    猜你喜歡
    虱的煙粉堿基
    煙粉虱MEAM1和MED成蟲在辣椒上傳播番茄褪綠病毒的特性
    昆蟲學報(2022年11期)2022-12-28 02:44:18
    應用思維進階構建模型 例談培養(yǎng)學生創(chuàng)造性思維
    8種藥劑對甘藍煙粉虱的田間防治效果比較試驗
    中國科學家創(chuàng)建出新型糖基化酶堿基編輯器
    生命“字母表”迎來4名新成員
    科學24小時(2019年5期)2019-06-11 08:39:38
    生命“字母表”迎來4名新成員
    近10年我國煙粉虱發(fā)生為害及防治研究進展
    植物保護(2018年5期)2018-12-05 10:36:16
    保護地蔬菜白粉虱的發(fā)生與防治
    新農業(yè)(2017年2期)2017-11-06 01:02:23
    幾種生物藥劑防治梨木虱的田間藥效試驗
    大棚青椒煙粉虱的發(fā)生特點與防控對策
    亚洲情色 制服丝袜| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲精品自拍成人| 午夜福利乱码中文字幕| 国产在线视频一区二区| 又黄又粗又硬又大视频| 欧美一级毛片孕妇| 18在线观看网站| 久久av网站| tube8黄色片| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 国产av国产精品国产| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 黄频高清免费视频| 啦啦啦 在线观看视频| 在线观看免费视频网站a站| 丝袜在线中文字幕| 欧美激情久久久久久爽电影 | 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 黄色a级毛片大全视频| 制服诱惑二区| 中文字幕人妻丝袜制服| 日韩电影二区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 咕卡用的链子| 欧美一级毛片孕妇| 亚洲精品自拍成人| 国产欧美亚洲国产| 日本欧美视频一区| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久久久网色| 亚洲精品国产色婷婷电影| 香蕉国产在线看| 国产在线免费精品| 色老头精品视频在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 桃花免费在线播放| 国产成人精品在线电影| 飞空精品影院首页| 9热在线视频观看99| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产成人精品久久二区二区免费| av片东京热男人的天堂| 亚洲人成电影观看| 90打野战视频偷拍视频| 91精品三级在线观看| 欧美黑人精品巨大| 国产精品久久久av美女十八| 国产高清视频在线播放一区 | 午夜福利在线免费观看网站| 午夜福利视频在线观看免费| 久久久国产一区二区| 日韩有码中文字幕| 中亚洲国语对白在线视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产伦理片在线播放av一区| 国产成人系列免费观看| 久久精品国产a三级三级三级| 97精品久久久久久久久久精品| 热99国产精品久久久久久7| 99久久99久久久精品蜜桃| 欧美另类亚洲清纯唯美| 性少妇av在线| 精品一区二区三区四区五区乱码| 久久精品亚洲av国产电影网| 婷婷丁香在线五月| 操美女的视频在线观看| 69精品国产乱码久久久| 男女免费视频国产| 久久中文字幕一级| www.av在线官网国产| 亚洲国产精品999| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 欧美中文综合在线视频| 日本wwww免费看| 中亚洲国语对白在线视频| 日本a在线网址| 大陆偷拍与自拍| 国产一区二区三区综合在线观看| 午夜影院在线不卡| 少妇 在线观看| 亚洲av成人一区二区三| 真人做人爱边吃奶动态| 高清在线国产一区| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 精品免费久久久久久久清纯 | 法律面前人人平等表现在哪些方面 | 国产不卡av网站在线观看| 午夜福利视频在线观看免费| 精品福利观看| 国产成人精品久久二区二区免费| 久久青草综合色| 9色porny在线观看| av在线播放精品| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 国产精品一区二区在线不卡| 久9热在线精品视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 桃花免费在线播放| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 超色免费av| 欧美日韩av久久| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久 | 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲成人免费电影在线观看| 国产精品一二三区在线看| 成年人午夜在线观看视频| 国产欧美亚洲国产| 国产高清videossex| 亚洲国产成人一精品久久久| 操出白浆在线播放| 91字幕亚洲| 一区在线观看完整版| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产精品欧美亚洲77777| 丰满迷人的少妇在线观看| 99久久99久久久精品蜜桃| 又黄又粗又硬又大视频| 蜜桃国产av成人99| 日韩精品免费视频一区二区三区| 久久女婷五月综合色啪小说| 欧美日韩成人在线一区二区| 2018国产大陆天天弄谢| 一本综合久久免费| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 在线精品无人区一区二区三| 亚洲国产欧美一区二区综合| 一区二区av电影网| 高潮久久久久久久久久久不卡| 丝袜脚勾引网站| www.自偷自拍.com| 18禁国产床啪视频网站| 国产成人av激情在线播放| 亚洲精品第二区| 中文字幕制服av| 悠悠久久av| 欧美精品一区二区大全| 精品福利观看| 操出白浆在线播放| 老汉色av国产亚洲站长工具| 在线 av 中文字幕| 香蕉国产在线看| 少妇精品久久久久久久| 老熟女久久久| 新久久久久国产一级毛片| 妹子高潮喷水视频| 在线观看www视频免费| av免费在线观看网站| 9热在线视频观看99| 一区二区三区乱码不卡18| 久久青草综合色| 久久ye,这里只有精品| 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲性夜色夜夜综合| 久久精品人人爽人人爽视色| 一个人免费在线观看的高清视频 | 在线观看免费午夜福利视频| 99香蕉大伊视频| 99热网站在线观看| 欧美国产精品一级二级三级| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲欧美清纯卡通| 丁香六月天网| 亚洲九九香蕉| 在线av久久热| 欧美国产精品va在线观看不卡| 丁香六月天网| 老鸭窝网址在线观看| 精品欧美一区二区三区在线| 欧美黄色淫秽网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 久久精品人人爽人人爽视色| videos熟女内射| 日韩视频一区二区在线观看| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲av电影在线进入| 亚洲av成人一区二区三| 亚洲成人手机| 一级毛片女人18水好多| 大码成人一级视频| 久久久精品94久久精品| 欧美大码av| 久久午夜综合久久蜜桃| 窝窝影院91人妻| 国产国语露脸激情在线看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 91成年电影在线观看| 在线天堂中文资源库| 亚洲欧美精品自产自拍| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 人妻人人澡人人爽人人| 五月天丁香电影| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 国产成人免费观看mmmm| 一区二区三区精品91| 男女免费视频国产| 色94色欧美一区二区| kizo精华| 亚洲第一av免费看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 午夜两性在线视频| a级毛片黄视频| 91九色精品人成在线观看| 黄色a级毛片大全视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面 | av网站免费在线观看视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 精品国产乱码久久久久久男人| 午夜福利乱码中文字幕| 国产男人的电影天堂91| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产精品国产av在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 99热全是精品| 久久青草综合色| 精品国产一区二区久久| 丝袜喷水一区| 超色免费av| 伊人久久大香线蕉亚洲五| av网站在线播放免费| 国产不卡av网站在线观看| 久久狼人影院| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 精品少妇内射三级| 久久人妻熟女aⅴ| 久久久久网色| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲精品国产区一区二| 中文字幕人妻丝袜一区二区| www.熟女人妻精品国产| 一个人免费看片子| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产伦人伦偷精品视频| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 黄色视频不卡| 亚洲人成77777在线视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 丝袜人妻中文字幕| 99热国产这里只有精品6| 中文字幕人妻熟女乱码| 女人精品久久久久毛片| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 在线观看免费高清a一片| 高清欧美精品videossex| 水蜜桃什么品种好| 亚洲av片天天在线观看| 久久影院123| 日日夜夜操网爽| 成人国产av品久久久| 亚洲少妇的诱惑av| a级片在线免费高清观看视频| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 久久久国产精品麻豆| 国产一区二区三区综合在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲综合色网址| 精品第一国产精品| www.熟女人妻精品国产| 中文字幕色久视频| 在线av久久热| 久久ye,这里只有精品| 国产熟女午夜一区二区三区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 成人av一区二区三区在线看 | av天堂久久9| 国产主播在线观看一区二区| kizo精华| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产在线观看jvid| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产麻豆69| 久久久久网色| 国产不卡av网站在线观看| 久9热在线精品视频| 欧美中文综合在线视频| 国产免费一区二区三区四区乱码| 日韩一区二区三区影片| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 少妇的丰满在线观看| av福利片在线| 成年女人毛片免费观看观看9 | www.自偷自拍.com| 国产精品国产av在线观看| 久久免费观看电影| 午夜久久久在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲男人天堂网一区| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 女人久久www免费人成看片| 18在线观看网站| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 国产成人啪精品午夜网站| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 18在线观看网站| 在线av久久热| 精品少妇黑人巨大在线播放| 国产免费现黄频在线看| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 精品人妻在线不人妻| 女性被躁到高潮视频| 亚洲欧美清纯卡通| 一进一出抽搐动态| 亚洲国产欧美在线一区| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲成人手机| 久久人人爽人人片av| 日本欧美视频一区| 午夜福利免费观看在线| 日本一区二区免费在线视频| 久久久久久久久免费视频了| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久亚洲国产成人精品v| 日韩视频一区二区在线观看| 国产色视频综合| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 成人国产一区最新在线观看| 久久久国产精品麻豆| 日韩有码中文字幕| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产成人欧美在线观看 | 天天操日日干夜夜撸| 亚洲国产av新网站| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产一级毛片在线| 97人妻天天添夜夜摸| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久99一区二区三区| 日本一区二区免费在线视频| 国产人伦9x9x在线观看| 国产免费一区二区三区四区乱码| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久人人97超碰香蕉20202| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产精品亚洲av一区麻豆| 无限看片的www在线观看| 精品一品国产午夜福利视频| 在线看a的网站| av福利片在线| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲欧洲日产国产| 亚洲专区字幕在线| 国产成人精品在线电影| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 窝窝影院91人妻| 五月天丁香电影| 老司机靠b影院| 18禁国产床啪视频网站| av超薄肉色丝袜交足视频| 久久热在线av| 精品福利观看| 成年动漫av网址| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 亚洲欧洲日产国产| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产免费现黄频在线看| 中文欧美无线码| 80岁老熟妇乱子伦牲交| videosex国产| 女人久久www免费人成看片| 精品国产乱码久久久久久小说| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久久久久久大尺度免费视频| 捣出白浆h1v1| 18禁国产床啪视频网站| 99热全是精品| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲中文日韩欧美视频| 免费在线观看影片大全网站| 18禁国产床啪视频网站| 免费在线观看黄色视频的| 久久热在线av| 午夜精品国产一区二区电影| 国产av精品麻豆| bbb黄色大片| 丝袜脚勾引网站| 日韩视频在线欧美| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 麻豆国产av国片精品| 免费av中文字幕在线| 亚洲欧美清纯卡通| 国产日韩欧美在线精品| 久久香蕉激情| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 99国产极品粉嫩在线观看| 男女边摸边吃奶| 在线观看舔阴道视频| 欧美黑人精品巨大| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 成人av一区二区三区在线看 | 9191精品国产免费久久| 亚洲国产精品999| 日韩有码中文字幕| 国产99久久九九免费精品| 亚洲成人免费av在线播放| 欧美xxⅹ黑人| 国产亚洲欧美精品永久| 国产成人欧美| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 午夜福利影视在线免费观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 老司机影院成人| 久久99一区二区三区| 九色亚洲精品在线播放| 欧美日韩成人在线一区二区| 三上悠亚av全集在线观看| 精品熟女少妇八av免费久了| 亚洲人成电影观看| 久久国产精品人妻蜜桃| 91成人精品电影| 国产欧美日韩综合在线一区二区| a 毛片基地| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 欧美久久黑人一区二区| 999久久久国产精品视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 一本色道久久久久久精品综合| av在线app专区| 亚洲av欧美aⅴ国产| 中文字幕高清在线视频| 日韩精品免费视频一区二区三区| 最新在线观看一区二区三区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 五月开心婷婷网| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产深夜福利视频在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产亚洲精品一区二区www | 国产一区二区 视频在线| h视频一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区视频| 成年av动漫网址| 嫁个100分男人电影在线观看| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品免费视频内射| tocl精华| 亚洲伊人色综图| 色综合欧美亚洲国产小说| 久久久欧美国产精品| 青春草亚洲视频在线观看| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 精品国产国语对白av| 亚洲国产日韩一区二区| 中文字幕av电影在线播放| 老司机影院毛片| 色老头精品视频在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产成人免费观看mmmm| 少妇被粗大的猛进出69影院| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 日本一区二区免费在线视频| 国产又爽黄色视频| 亚洲精品国产一区二区精华液| 精品乱码久久久久久99久播| 久久青草综合色| www.999成人在线观看| 国产精品一区二区免费欧美 | 精品第一国产精品| 国产91精品成人一区二区三区 | 久久久久久久久免费视频了| 精品人妻在线不人妻| 2018国产大陆天天弄谢| 精品亚洲成国产av| 色婷婷av一区二区三区视频| 嫩草影视91久久| 视频区图区小说| 蜜桃国产av成人99| 中文欧美无线码| 超碰97精品在线观看| 久久久久国内视频| 亚洲专区国产一区二区| 久久久久精品人妻al黑| 动漫黄色视频在线观看| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 久久久久精品国产欧美久久久 | 久久狼人影院| 国产男人的电影天堂91| 中文字幕制服av| 成人黄色视频免费在线看| 久久综合国产亚洲精品| 91字幕亚洲| 中亚洲国语对白在线视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 国产精品二区激情视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲第一青青草原| av网站在线播放免费| 搡老岳熟女国产| 成人国语在线视频| 亚洲伊人色综图| 99久久国产精品久久久| 好男人电影高清在线观看| 欧美日韩福利视频一区二区| 婷婷色av中文字幕| 国产欧美日韩一区二区精品| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 国产亚洲精品一区二区www | 欧美精品啪啪一区二区三区 | 99热网站在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 久久久精品94久久精品| 妹子高潮喷水视频| 又大又爽又粗| 亚洲三区欧美一区| 日韩大码丰满熟妇| 丰满饥渴人妻一区二区三| 丝袜人妻中文字幕| 又紧又爽又黄一区二区| 久久免费观看电影| 欧美日韩av久久| 亚洲av欧美aⅴ国产| 真人做人爱边吃奶动态| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产精品成人在线| 久久 成人 亚洲| 另类精品久久| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 五月天丁香电影| 最近最新免费中文字幕在线| 国产视频一区二区在线看| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 久久久久国产精品人妻一区二区| 18在线观看网站| 激情视频va一区二区三区| 这个男人来自地球电影免费观看| 一区二区三区激情视频| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 老熟妇仑乱视频hdxx| 精品一区二区三区四区五区乱码| videos熟女内射| 人妻久久中文字幕网| 男女无遮挡免费网站观看| 欧美另类一区| 999久久久国产精品视频| 一区二区日韩欧美中文字幕| 老司机福利观看| 国产在线观看jvid| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 精品福利永久在线观看| 精品福利永久在线观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 国产有黄有色有爽视频| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲成人免费电影在线观看| 一区在线观看完整版| 12—13女人毛片做爰片一| 久久香蕉激情| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产男女内射视频| 美女高潮到喷水免费观看| 久热爱精品视频在线9| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 欧美午夜高清在线| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久久久国内视频| av在线老鸭窝| 亚洲精品av麻豆狂野| 午夜福利在线观看吧| 精品亚洲成国产av| 看免费av毛片| 交换朋友夫妻互换小说| 伊人久久大香线蕉亚洲五| av天堂久久9| 国产伦人伦偷精品视频| 中文字幕制服av| 伦理电影免费视频| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 欧美 日韩 精品 国产| 久久久精品94久久精品| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产成人欧美| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲九九香蕉| 国产一级毛片在线| svipshipincom国产片| 国产成人精品在线电影| 久久久精品区二区三区| 精品欧美一区二区三区在线| 成人免费观看视频高清| 韩国高清视频一区二区三区| 欧美另类亚洲清纯唯美| 黄色视频,在线免费观看| 国产精品一二三区在线看| 午夜激情久久久久久久| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 母亲3免费完整高清在线观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 9色porny在线观看| 欧美在线一区亚洲| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 天堂8中文在线网| 久久免费观看电影| 欧美av亚洲av综合av国产av| 真人做人爱边吃奶动态| 国产色视频综合|