肺鱗狀細(xì)胞癌組織中磷酯酶CE1的表達(dá)

葛曉晴，任景麗，楊鯤鵬，王旭廣，黃壯士，張 進(jìn)，陳培楠，谷 博，王立東

1)鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院胸外科鄭州450014 2)鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科鄭州450014 3)河南省食管癌重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室鄭州450052

近年來，肺癌的發(fā)病率逐年上升，嚴(yán)重危害人類健康，肺鱗狀細(xì)胞瘤約占肺癌的50%。最近的研究［1］發(fā)現(xiàn)磷酯酶 CE1(phospholipase C epsilon-1，PLCE1)為食管癌的易感基因，而食管癌的病理類型90%以上為鱗狀上皮細(xì)胞癌。作者采用免疫組化SP法檢測肺鱗狀細(xì)胞癌組織中 PLCE1的表達(dá)，并探討其表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 收集鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院2006年11月至2010年7月手術(shù)切除并經(jīng)病理證實(shí)的肺鱗狀細(xì)胞癌組織48例，患者男44例，女4例，年齡31～77歲，≥60歲27例;按肺癌國際TNM分期標(biāo)準(zhǔn)(第7版)，Ⅰ+Ⅱ期20例，Ⅲ期28例;組織學(xué)分級G1、G233例，G315例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例;術(shù)前均未經(jīng)任何放療和化療。同時(shí)選取48例癌旁正常肺組織作為對照。

1.2 PLCE1檢測 標(biāo)本經(jīng)福爾馬林固定后石蠟包埋，連續(xù)4 μm厚度切片。切片脫蠟后，于高溫pH 9.0 EDTA抗原修復(fù)液中修復(fù)6 min，自然冷卻至室溫，以體積分?jǐn)?shù)3%的H2O2阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，再經(jīng)一抗、二抗(均按150倍稀釋)作用后，DAB顯色并在光鏡下控制呈色，蘇木素復(fù)染后脫水，中性樹膠封片。兔抗人PLCE1抗體購自Sigma公司，Envision試劑盒購自DAKO公司。采用已知陽性肺鱗狀細(xì)胞癌的組織切片作為陽性對照;用PBS代替一抗作陰性對照。

1.3 結(jié)果判定 以細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)棕黃色或棕褐色顆粒狀著色為陽性細(xì)胞。每張切片隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野，計(jì)算陽性細(xì)胞所占的百分比，≥30%為陽性［2］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，采用配對χ2檢驗(yàn)比較正常和癌組織中PLCH陽性表達(dá)率的差異，采用χ2檢驗(yàn)比較不同人口學(xué)與臨床病理特征腫瘤組織中PLCE1的陽性表達(dá)率，檢驗(yàn)水準(zhǔn) α =0.05。

2 結(jié)果

2.1 肺癌及正常組織中PLCE1的表達(dá) 肺鱗狀細(xì)胞癌組織中PLCE1的陽性表達(dá)率為81.3%(39/48)，高于正常肺組織的12.5%(6/48)，見表1。

2.2 肺鱗狀細(xì)胞癌組織中PLCE1的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 見表2。

表1 肺正常和癌組織中PLCE1的表達(dá) 例

表2 不同人口學(xué)與臨床病理特征肺鱗狀細(xì)胞癌組織中PLCE1表達(dá)的比較 例(%)

3 討論

PLCE1 基因位于常染色體 10q23.32-q24.1，其編碼蛋白為 PLCE1［3］，是 PLC 家族的新成員［2］。PLCE1通過水解4，5-二磷酸(PIP2)產(chǎn)生第二信使肌醇1，4，5-三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)等，參與細(xì)胞信號的傳導(dǎo)，調(diào)控基因表達(dá)，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分化、細(xì)胞凋亡及血管新生［1，4］。在現(xiàn)有的研究中，發(fā)現(xiàn)PLCE1可能與化學(xué)致癌物誘發(fā)的皮膚腫瘤有關(guān)［5］，可能抑制結(jié)腸癌和膀胱癌的發(fā)生發(fā)展［6-9］，與腎病綜合征、家族性腎病綜合征關(guān)系密切［8-9］。

近幾年對PLCE1的研究主要與腎病綜合征的發(fā)生有關(guān)［2-6］，但對肺癌中PLCE1是否表達(dá)國內(nèi)外暫無此項(xiàng)報(bào)道。該研究發(fā)現(xiàn)PLCE1在肺鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)明顯高于正常肺上皮組織，PLCE1的表達(dá)與肺鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和腫瘤分期有關(guān)，說明PLCE1在肺鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用，PLCE1的檢測可能有助于肺鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后的判斷。

PLCE1在肺鱗狀細(xì)胞癌組織中的作用機(jī)制尚不十分明確，需進(jìn)一步探討，以期為肺鱗狀細(xì)胞癌的診斷和臨床治療提供新的線索。

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