RP-HPLC考察注射用鹽酸頭孢吡肟與氟康唑氯化鈉注射液配伍的穩(wěn)定性

鄭 芳，鐘基大，朱雪松*，李春雷，李志浩

頭孢吡肟(Cefepime)是一種新型氨基噻唑-聯(lián)-氧亞胺頭孢菌素，通過抑制細菌細胞壁的生物合成而達到殺菌作用［1］。可用于治療多種細菌感染性疾?。?］。氟康唑(Fluconazole)為新型氟代三唑類抗真菌藥物，有廣譜抗真菌作用［3-7］。臨床上對嚴重感染的病例，特別是深部真菌感染，常將二藥聯(lián)合應用以達到治療的目的。由于兩藥的配伍穩(wěn)定性未知，為了用藥安全，臨床用藥時，兩藥不僅分開注射，中間還以適量糖或鹽的大輸液作為間隔，這樣需要增加患者的補液量以及輸注的次數(shù)，增添患者痛苦。為此，本實驗參照有關文獻［8-10］，模擬臨床用藥濃度，在室溫［(20 ±1)℃］、不避光條件下，對注射用鹽酸頭孢吡肟與氟康唑氯化鈉注射液的配伍穩(wěn)定性進行考察，為配合臨床治療、合理應用抗菌藥物提供理論依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 日本島津LC-9A高效液相色譜儀，島津SPD-6A紫外檢測器，浙大N2000色譜工作站;HS-2060超聲儀;pHs-3D型酸度計(上海雷磁儀器廠);島津AEU-210電子天平。

1.2 試藥 頭孢吡肟對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:130524-200802l);氟康唑對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:100314-200402);注射用鹽酸頭孢吡肟(商品名:達力能，深圳致君制藥有限公司，批號:20100303;規(guī)格:1.0 g/支);氟康唑氯化鈉注射液(商品名:辰澤，山東魯抗辰欣藥業(yè)有限公司，批號:1005215202，規(guī)格:100mL含氟康唑0.2 g與氯化鈉0.9 g);乙腈為色譜純;水為新制注射用水;其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 溶液配制 ①對照品貯備液:分別精密稱取頭孢吡肟和氟康唑對照品適量，分別用注射用水和磷酸鹽緩沖液［10］［取磷酸二氫鉀1.0 g，磷酸氫二鈉1.8 g，加水900mL溶解，用磷酸或10mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至(7.1±0.1)，用水稀釋至1000mL］溶解并稀釋配制成濃度分別為1.010 mg/mL和2.502 mg/mL的頭孢吡肟、氟康唑對照品貯備液。②配伍溶液:取注射用鹽酸頭孢吡肟1支，加入100mL氟康唑氯化鈉注射液中，搖勻，即得配伍溶液。③供試品溶液:取注射用鹽酸頭孢吡肟1支，加入100mL 0.9%氯化鈉注射液中，搖勻，即得鹽酸頭孢吡肟供試品溶液。

2.2 含量測定方法

2.2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗 色譜柱:Agilent HC C18(150mm ×4.6mm，5μm);檢測波長［10］:頭孢吡肟與氟康唑分別為206 nm、260 nm;流速:0.8mL/min;進樣量:20μL;柱溫:25 ℃;頭孢吡肟流動相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(10∶90);氟康唑流動相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液(18∶82)。在上述色譜條件下，兩主峰的理論塔板數(shù)均不低于6000，兩主峰之間及與相鄰的雜質峰的分離度大于3.0(見圖1)。

圖1 高效液相色譜圖

2.2.2 標準曲線的建立 頭孢吡肟:精密吸取“2.1”項下頭孢吡肟對照品貯備液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分置10mL 量瓶中，用注射用水稀釋至刻度，搖勻。在“2.2.1”項色譜條件下分別進樣分析。以峰面積A為縱坐標、濃度C(mg/L)為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程:A=1.06×104C+8.40 ×103，r=0.9995(n=6)，線性范圍:50.5～505.0μg/L。

氟康唑:精密吸取“2.1”項下氟康唑對照品貯備液 1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL，分置 10mL量瓶中，加“2.1”項下的磷酸鹽緩沖液至刻度，搖勻。在“2.2.1”項色譜條件下，分別進樣上述溶液20μL，記錄峰面積。以峰面積(Y)為縱坐標、濃度(X)為橫坐標繪制標準曲線，得氟康唑的回歸方程:Y=872.2 X-903.4，r=0.9993(n=6)，線性范圍:250.2～1501.2μg/mL。

2.2.3 精密度試驗 分別進樣“2.1”項下稀釋10倍的頭孢吡肟和5倍的氟康唑對照品貯備液，重復進樣6次，測定峰面積，結果頭孢吡肟峰面積RSD為0.41%;氟康唑峰面積RSD為0.54%。

2.2.4 重復性試驗 取同一批樣品，按“2.1”項下配伍溶液配制方法平行制備12份，取6份稀釋100倍后進樣，記錄峰面積，頭孢吡肟峰面積RSD為0.89%(n=6);另6份稀釋4倍后進樣，記錄峰面積，氟康唑峰面積RSD為0.98%(n=6)。

2.2.5 溶液穩(wěn)定性試驗 將注射用頭孢吡肟鈉與氟康唑氯化鈉注射液分別用注射用水和磷酸鹽緩沖液配制成濃度約為0.1 mg/mL與0.5 mg/mL的溶液，置于室溫［(20 ±1)℃］下，分別于 0、1、2、3、4 h 時，在上述色譜條件進樣 20μL，測定峰面積。結果頭孢吡肟與氟康唑峰面積RSD分別為0.58%、0.69%(n=5)。說明氟康唑與頭孢吡肟鈉在上述條件下4 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.6 加樣回收率實驗 精密量取已知含量的頭孢吡肟鈉供試品溶液1.0mL，分置9個100mL的量瓶中，分別精密加入頭孢吡肟對照品貯備液8.0、10.0、12.0mL各3份，分置上述量瓶中，用注射用水稀釋至刻度，搖勻，20μL進樣;精密量取已知含量的氟康唑氯化鈉注射液5.0mL，分置9個25mL的量瓶中，分別精密加入氟康唑對照品貯備液3.2、4.0、4.8mL各3份，分置上述量瓶中，用磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，20μL進樣;以“2.2.1”項下方法測定峰面積，代入回歸方程計算濃度(X)，并計算回收率，結果見表1。

2.3 配伍穩(wěn)定性試驗

2.3.1 外觀、pH值變化 取“2.1”項下配伍溶液適量，室溫下分別于 0、1、2、3、4、5、6 h用納氏比色管觀察顏色變化，并測定pH值，結果配伍液無色澄明，無肉眼可見的物理變化，pH值結果見表2。

表1 加樣回收率試驗結果(n=9)

表2 注射用鹽酸頭孢吡肟與氟康唑氯化鈉注射液配伍后pH值及含量變化

2.3.2 相對百分含量變化 取“2.1”項下配伍溶液適量，放置室溫下，分別于 0、1、2、3、4、5、6 h，即刻注射用水稀釋100倍后，立即進樣，測定頭孢吡肟的峰面積;同上法取“2.1”項下配伍溶液適量，在各時間點即刻用磷酸鹽緩沖液稀釋4倍后，立即進樣，測定氟康唑的峰面積。以配伍0 h含量為100%，計算藥物相對含量變化，結果見表2。

注射用鹽酸頭孢吡肟與氟康唑氯化鈉注射液配伍6 h內(nèi)，在室溫、不避光條件下，配伍液無色澄明，無肉眼可見的物理變化發(fā)生。表2結果顯示，配伍4 h內(nèi)，兩主藥含量及pH值均無明顯變化，在4～6 h變化較大，但在臨床治療中，根據(jù)兩藥滴速(說明書規(guī)定)，2 h內(nèi)已足夠將100mL的混合液靜滴完畢，而兩藥連續(xù)輸注的中間相互混合的時間更短。因此，在此實驗條件下，兩藥短時配伍基本穩(wěn)定。

3 討論

本文配伍試驗結果表明，注射用鹽酸頭孢吡肟與氟康唑氯化鈉注射液配伍6 h內(nèi)基本穩(wěn)定。若兩藥連續(xù)輸注時，中間可以不用適量糖或鹽的大輸液作為間隔，可直接將注射用鹽酸頭孢吡肟加入到氟康唑氯化鈉注射液中。這樣既減少了患者的補液量以及輸注的次數(shù)，減輕了患者的痛苦，降低了醫(yī)療費用，又節(jié)省了醫(yī)患雙方的時間。

由于頭孢吡肟與氟康唑極性相差大，而且在同樣稀釋倍數(shù)下的各自最大吸收波長處，頭孢吡肟的吸收度也比氟康唑大得多，所以二者含量測定不能在同一色譜條件下測定，故采用“2.2.1”項色譜條件，將氟康唑氯化鈉注射液的臨床用藥濃度稀釋4倍、頭孢吡肟稀釋100倍后進行含量測定。本實驗選用高效液相色譜法對注射用鹽酸頭孢吡肟與氟康唑氯化鈉注射液配伍后含量進行測定，結果表明，此方法靈敏度高、專屬性好，對于醫(yī)院臨床藥學開展藥物監(jiān)測具有一定意義。

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