益肺康心膠囊對(duì)大鼠肺心病模型血漿內(nèi)皮素、一氧化氮、心鈉素的影響*

梁 群 蔣希成 吳海坤

黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院（黑龍江哈爾濱150040）

肺心病多因久病肺虛，痰瘀潴留，每因復(fù)感外邪誘使病情發(fā)作或加劇。近年來，中醫(yī)藥治療肺心病的報(bào)道日益增多，已取得了可喜的成果。為了明確益肺康心膠囊治療肺心病的藥效，筆者采用野百合堿復(fù)制大鼠肺心病動(dòng)物模型，觀察其對(duì)肺心病大鼠內(nèi)皮素（ET）、一氧化氮（NO）及心鈉素（ANF）的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 wistar大鼠，體質(zhì)量（200±20）g，雄性，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提拱，按清潔級(jí)標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)。

1.2 藥物 益肺康心膠囊：10g/粒，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室提供，主要成分為人參、黃芪、茯苓、蛤蚧、麥冬、半夏、干姜、厚樸、陳皮、丹參、當(dāng)歸、桃仁、地龍、葶藶子、杏仁等中藥。硝苯地平：每片10mg，常州康普藥業(yè)有限公司，批號(hào)1006030。

1.3 試劑及儀器 野百合堿：每支8mg，研域（上海）化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)315220。ET、NO和ANF試劑盒（北京東雅生物技術(shù)研究所提供）；紫外分光光度計(jì)（美國DV640 Beckman loulter）；FJ-2008P型-自動(dòng)免疫計(jì)數(shù)器 （南昌新長(zhǎng)征醫(yī)療科技發(fā)展有限公司）。

1.4 分組與造模 將40只大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、治療組、對(duì)照組，每組10只?？瞻捉M不造模，其余3組均造模。將野百合堿用無水乙醇和生理鹽水（2∶8）混合液配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的溶液，按照50mg/kg腹腔注射1次，14d后即形成動(dòng)物模型。根據(jù)大鼠體質(zhì)量折算系數(shù)，造模14d后，治療組將益肺康心膠囊細(xì)粉加蒸餾水配制成0.26g/mL的水溶液，按2.6g/kg灌胃，每日1次。對(duì)照組將硝苯地平配制成0.27mg/mL的水溶液，按2.7mg/kg灌胃，每日1次?？瞻捉M與模型組均灌同體積的生理鹽水。連續(xù)給藥15d，至檢查前24h停藥。

1.5 標(biāo)本采集及測(cè)定 ET測(cè)定：采用放射免疫分析方法。取靜脈血1mL，注入含7.5%EDTA-2Na 15μL和抑肽酶20μL的試管中，混勻，4℃，3000r/min離心 10min，分離血漿。-20℃保存，測(cè)定前，使樣本置于室溫或冷水中復(fù)融，再次4℃，3000r/min離心5min，取上清液測(cè)定。ANF測(cè)定：采用放射免疫分析方法。取靜脈血2mL，注入含7.5%EDTA-2Na 30μL和抑肽酶30μL的試管中，混勻，4℃ 3000r/min離心 10min，分離血漿，-20℃保存，測(cè)定前使樣本置于室溫或冷水中復(fù)融，再次4℃3000r/min離心5min，取上清液測(cè)定。NO測(cè)定：采用鎘還原比色法。取靜脈血1mL，放入肝素抗凝管中，測(cè)血漿中NO穩(wěn)定代謝產(chǎn)物亞硝酸/硝酸根離子（NO2ˉ/NO3ˉ）。

2 結(jié) 果

2.1 益肺康心膠囊對(duì)肺心病大鼠ET及ANF水平的影響 表1。模型組與空白組比較，ET與ANF水平均顯著升高（P＜0.01），治療組、對(duì)照組與模型組比較ET與ANF水平明顯下降（P＜0.05或0.01），治療組與對(duì)照組比較無顯著差異（P＞0.05）。

表1 各組大鼠ET及ANF水平比較 (ng/L，±s）

表1 各組大鼠ET及ANF水平比較 (ng/L，±s）

與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。 下同。

組別n ANF空白組 435.28±23.83**模型組 658.43±49.88治療組 560.41±42.17*對(duì)照組 536.29±56.66**10 10 10 10 ET 125.84±11.31**315.2±15.22 214.96±20.03*224.75±26.54**

2.2 益肺康心膠囊對(duì)大鼠NO的影響 見表2。模型組與空白組比較，NO顯著下降（P＜0.01），治療組與模型組比較，NO顯著上升（P＜0.05），對(duì)照組與模型組比較 NO 顯著上升（P＜0.01），治療組與對(duì)照組比較無顯著差異（P＞0.05）。

表2 益肺康心膠囊對(duì)肺心病大鼠NO的影響 (±s）

表2 益肺康心膠囊對(duì)肺心病大鼠NO的影響 (±s）

n組別空白組模型組治療組對(duì)照組10 10 10 10 NO 41.61±7.09**34.18±5.33 49.87±7.45*55.32±12.91**

3 討 論

ET是血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與釋放的縮血管活性多肽，其縮血管作用強(qiáng)烈而持久，主要通過自分泌及旁分泌機(jī)制發(fā)揮作用[1]。缺氧、酸中毒、肺部感染均可導(dǎo)致血ET在肺循環(huán)過程中的惡劣機(jī)制減弱，從而導(dǎo)致血ET含量的增加。NO作為內(nèi)皮衍生舒張因子是一種近年來發(fā)現(xiàn)的重要信使分子，具有多種生理功能，包括血管調(diào)節(jié)、舒張支氣管、神經(jīng)介質(zhì)、機(jī)體防御等作用。生理情況下，二者在維持血管舒縮平衡、抗血小板聚集，及防止血管內(nèi)凝血方面有重要的作用。DinhAT等[2]研究發(fā)現(xiàn)原發(fā)或繼發(fā)性肺動(dòng)脈高壓時(shí)肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞NO合成酶表達(dá)減少而使NO量下降，從而導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓形成。說明缺氧時(shí)內(nèi)皮功能紊亂，NO釋放減少是造成肺動(dòng)脈高壓和肺心病形成的重要原因。ANF升高可降低肺血容量和肺動(dòng)脈高壓。因此，血漿ANF水平可反映肺動(dòng)脈高壓的進(jìn)展。經(jīng)強(qiáng)心、利尿、擴(kuò)血管治療后，隨著癥狀和心功能的改善，ANF水平明顯降低；而在治療不當(dāng)，病情惡化時(shí)ANF水平又進(jìn)行性升高。因此，循環(huán)ANF水平是反映血流動(dòng)力學(xué)異常和心力衰竭嚴(yán)重程度、觀察療效、隨訪病情的可靠指標(biāo)[3]。

益肺康心膠囊是筆者多年使用治療肺心病的有效驗(yàn)方，有補(bǔ)養(yǎng)心肺，化痰降氣，化瘀宣肺的功效。本實(shí)驗(yàn)提示，益肺康心膠囊具有與卡托普利類似的作用，可能是其改善心功能、防治肺心病的作用機(jī)制之一。

[1]Dzau VJ.Autocrine and paracrinemechanisms in the pathophysiology ofheart failure[J].Am JCardiol，1992，70（10）：4-11.

[2]A Tuan Dinh， Xuan MD，TimothyW，et al.Impairment of endothelium-dependent pulmonary artery relaxation in chronic obstructive lung disease[J].NEngl JMed，1991，324（22）：1539-1547.

[3]芪蛭膠囊對(duì)肺心病心衰大鼠血漿內(nèi)皮素、一氧化氮和血漿心鈉素的影響[J].中醫(yī)藥信息，2004，21（5）：37