不同餌料搭配對凡納濱對蝦幼體與仔蝦的影響

王家偉，戴習(xí)林，謝 劍，臧維玲，丁福江

（1.上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306；2.上海申漕特種水產(chǎn)開發(fā)公司，上海 201376）

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗于2008年3～5月在上海申漕特種水產(chǎn)開發(fā)公司進(jìn)行。試驗用幼體為購自廈門的凡納濱對蝦無節(jié)幼體（子一代，F(xiàn)1），在長方形 51×61×38 cm3塑料箱（118L)內(nèi)培養(yǎng)。試驗用水采用濃縮海水與天然河口水調(diào)配成鹽度為28.6的育苗海水，過濾、消毒后使用。

1.2 試驗餌料

試驗用餌料為牟氏角毛藻（Chaetoceros mulleri，CM）、綠色巴夫藻（Pavlova vilids，PV）、湛江叉鞭金藻（Dircaraleria galbana，DG），云微藻（Chlorophyta sp，Cs）、褶皺臂尾輪蟲（Brachionus plicatilis，BP）、蒙古裸腹溞（MM），以及購自市場的鹵蟲（Aitemia salina，AS）卵、雙色蝦片、螺旋藻粉、食母生、B.P粉（一種微囊飼料）和對蝦人工配合飼料（FD）。

單胞藻用f/2配方配制的營養(yǎng)液培養(yǎng)；采用酵母（YE）為主、單胞藻為輔，交替飼養(yǎng)BP和MM，分別在投喂幼體前8 h和12 h用單胞藻營養(yǎng)強(qiáng)化。

1.3 試驗設(shè)計

試驗設(shè)計6種餌料搭配，每種2個重復(fù)，每組對蝦無節(jié)幼體（N）密度為4～5萬尾/m3。以全FD為對照組，試驗用餌料種類和搭配列于表1。

表1 各試驗組餌料投喂種類和密度

1.4 試驗管理

試驗期間，連續(xù)充氣，水溫30±0.2℃，光照強(qiáng)度3 000～10 000 Lx。每日測定水化學(xué)指標(biāo)和餌料密度，自M1開始每日換水20%，上午每個水槽隨機(jī)采樣5點估算幼體數(shù)，記錄幼體發(fā)育狀況。

1.5 脂肪酸和水質(zhì)指標(biāo)的測定

總脂抽提參照Folch法[7]，采用14%的三氟化硼-甲醇（v/v）進(jìn)行甲脂化，儀器為Agilent-6890氣相色譜。水質(zhì)測定方法：CODMn采用堿性高錳酸鉀法，NO2--N采用重氮偶氮比色法，NO3--N采用鋅鎘還原-重氮偶氮比色法[8]，pHB-4型 pH計測定pH值。

2 結(jié)果與分析

2.1 餌料脂肪酸含量與組成

2.1.1 單胞藻脂肪酸含量 單胞藻脂肪酸相對含量測定結(jié)果列于表2。由表2知，PV的n-3HUFA和∑EFA相對含量最高分別為51.7%和31.2%，CM、DG次之，Cs最低，分別僅為PV的1/6和1/2。C18∶3n-3僅在PV和CM中檢出。EPA在PV和CM中相對含量高，分別為27.9%和23.8%，Cs中未檢出。DG、PV的DHA相對含量都很高，分別為19.8%和12.6%，Cs較低為8.8%。

表2 單胞藻脂肪酸相對含量

2.1.2 營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的脂肪酸含量與組成 營養(yǎng)強(qiáng)化后的BP體內(nèi)脂肪酸相對含量列于表3。由表3可知，BPCs體內(nèi)∑EFA、n-3HUFA的相對含量最高，分別為17.4%與26%，次之為BPCM，分別是23.3%與17%。C18∶3n-3在5種藻液強(qiáng)化BP體內(nèi)均未檢出，DHA僅在BPDG體內(nèi)未檢出，其余3種必需脂肪酸均被檢出。5種藻液強(qiáng)化BP體內(nèi)EPA和DHA相對含量都存在較大差異，BPCs體內(nèi)DHA和EPA含量最大分別為17.4%和8.6%，分別是BPDG的3倍和17倍。

供給情況：氮肥方面，尿素企業(yè)復(fù)產(chǎn)停產(chǎn)交替，總體以復(fù)產(chǎn)增產(chǎn)居多，企業(yè)整體開工率小幅上升至54%。磷肥方面，個別前期短期檢修的企業(yè)陸續(xù)復(fù)產(chǎn)，二銨企業(yè)整體開工率升至66%。鉀肥方面，鹽湖基準(zhǔn)產(chǎn)品60%粉晶到站價2200-2250元/噸，每日發(fā)運(yùn)量200-300車；港口鉀供應(yīng)持續(xù)緊俏；邊貿(mào)鉀供應(yīng)仍偏緊。復(fù)合肥方面，經(jīng)銷商拿貨緩慢，部分企業(yè)因庫存較多降低產(chǎn)量，各地環(huán)保壓力不減，企業(yè)整體開工率下降至40%。

表3 單胞藻營養(yǎng)強(qiáng)化輪蟲的肪酸相對含量

2.1.3 營養(yǎng)強(qiáng)化后蒙古裸腹溞的脂肪酸含量 單胞藻營養(yǎng)強(qiáng)化的MM的脂肪酸相對含量測定結(jié)果列于表4。由表4可見，MMDG和MMPV體內(nèi)∑EFA的相對含量最高，分別為44.3%和42.4%，約為MMYE的2倍，而MMCs和MMMA體內(nèi)∑EFA相對含量低于MMYE。MMPV體內(nèi)EPA的相對含量最高為13.5%，是MMMA的4倍，MMDG雖未檢到EPA，但DHA含量最高，為31.6%，分別是MMPV、MMCM、MMYE的 1.5、2、4 倍，而 MMCs和 MMMA未檢出。所有組MM體內(nèi)未檢出C18∶3n-3，∑n-3HUFA含量呈現(xiàn)與∑EFA一樣的規(guī)律。

表4 單胞藻營養(yǎng)強(qiáng)化蒙古裸腹溞脂肪酸相對含量

2.2 凡納濱對蝦幼體培育效果

凡納濱對蝦仔蝦和幼體各階段存活率及發(fā)育情況分別列于表5和圖1、圖2。表5表明，N變態(tài)為Z1階段（N→Z1），投喂Cs和混合藻的幼體存活率r最低，分別只有78.4%和65.8%，其它組r均在80%以上。Z1→Z2，CM、DG、CMF、PV 組是高 r組，Cs組最低為45.6%。

表5 凡納濱對蝦幼體、仔蝦發(fā)育狀況與存活率

由圖 1可知，Z2→Z3，F(xiàn)D 組 r最高，達(dá)到94.6%，CM與CMF組次之，且三者間無明顯差異，Cs、DG和PV組r最低，分別只有75.0%、71.2%和64.8%，且相互間無差異。Z3→M1，CM組r最高為93.4%，顯著高于PV、CMF組的80.8%與78.1%，DG組最低為48.3%。

M1→P，幼體變態(tài)情況分別是r為90%組（CMF、PV 組）、80%組 （DG、CM 組）、70%組（MA、Cs、FD組）。P階段，F(xiàn)D組r最低為49.8%，其余組均在90%以上。

由表5可發(fā)現(xiàn)，各實驗組N變態(tài)為Z2與M變態(tài)為P速度一致，PV和Cs組Z2，2 d才發(fā)育至Z3，其余組僅1 d；CM組、CMF組與FD組Z3，3 d內(nèi)全部變態(tài)為M1，而PV藻組和Cs組需5 d。

由圖2可知，出苗率最高發(fā)生在CM藻與CMF組，PV組次之為26.2%，Cs與FD組最低，低于10%。

圖1 凡納濱對蝦幼體各階段的存活率

圖2 凡納濱對蝦幼體各階段的存活率

3 討 論

3.1 輪蟲和蒙古裸腹溞的營養(yǎng)強(qiáng)化效果

BP和MM是人工育苗中的重要生物餌料，但是酵母培養(yǎng)的BP和MM體內(nèi)EPA和DHA含量很低，有資料報道酵母輪蟲n-3HUFA、EPA和DHA的相對含量分別只有0.9%、0.7%和0.2%[4]。除MMDG 的 EPA 未檢出外，MMCM、MMPV、MMCs體內(nèi)∑EFA、n-3HUFA、EPA和 DHA含量都高于MMYE，營養(yǎng)強(qiáng)化的MM和相對應(yīng)的藻類體內(nèi)脂肪酸的組成和相對含量趨于一致，此與何志輝等[11]的研究結(jié)果一致，表明蒙古裸腹溞的生化組成明顯受食物條件的控制。

同時試驗所用4種藻類除BPDG的EPA含量沒有提高外，BPCM、BPPV、BPCs體內(nèi) n-3HUFA、EPA 和DHA含量都明顯高于BPYE；Cs中n-3HUFA、EPA含量最低，但BPCs中n-3HUFA、EPA含量最高，PV體內(nèi)n-3HUFA、EPA含量最高，但其BPPV體內(nèi)n-3HUFA、EPA含量卻較低，營養(yǎng)強(qiáng)化的BP和相對應(yīng)的藻類體內(nèi)脂肪酸的組成和相對含量并不趨于一致，與陳煒[12]的研究結(jié)果相似，表明輪蟲的脂肪酸組成明顯受餌料影響，但又不完全取決于餌料。因此，采用合適的單胞藻強(qiáng)化BP和MM，可顯著提高它們體內(nèi)的HUFA，而且MM受食物的影響要大于褶皺臂尾輪蟲，生產(chǎn)過程中，可選擇HUFA含量高的單胞藻強(qiáng)化MM，而對于BP并非如此。

3.2 HUFA對凡納濱對蝦幼體存活率的影響

蝦蟹類中，機(jī)體吸收的部分n-3HUFA尤其是EPA和DHA能用于合成磷脂，構(gòu)成磷脂雙層膜，磷脂能促進(jìn)膽固醇 (合成蛻皮激素的前體物質(zhì))的吸收和利用，n-3HUFA間接影響了蝦蟹類幼體的蛻皮與提高幼體變態(tài)和存活率[13]。但大部分海水蝦蟹類卻不能合成EPA和DHA，只能從食物中獲得[14]。Z1→Z2，r最低組是n-3HUFA含量最低的Cs組，甚至低于FD組；BPDG體內(nèi)n-3HUFA含量最低，尤其是EPA含量僅占總脂含量的0.5%，對應(yīng)的Z2→M階段，投喂BPDG組r最低，幼體發(fā)育速度較慢?？梢婐D料中n-3HUFA的含量顯著影響幼體發(fā)育，BPCs、BPDG不能完全滿足幼體發(fā)育的需要。

比較藻類脂肪酸含量發(fā)現(xiàn)，CM含有全部的對蝦5種必需不飽和脂肪酸，而其它藻類體內(nèi)最多檢到4種，這可能是CM組和CMF組的各階段幼體與仔蝦r高，變態(tài)速率快的原因之一。梁華芳等[15]也發(fā)現(xiàn)CM投喂凡納濱對蝦效果要好于PV、球等鞭金藻、中肋骨條藻。

對于Cs組，又發(fā)現(xiàn)即使在Z2→M階段投喂HUFA最高的BPCs，幼體的存活率仍較低，且Z2、Z3生長緩慢，2 d才全部變態(tài)為Z3，5 d全部變態(tài)為M1。此可能是Z1階段幼體餌料HUFA含量低，進(jìn)而影響Z2→M階段幼體發(fā)育，這與Legger等[16]發(fā)現(xiàn)藍(lán)對蝦早期幼體攝取的HUFA對后期幼體的營養(yǎng)狀況有明顯影響的結(jié)論一致。

3.3 餌料搭配對凡納濱對蝦幼體發(fā)育的影響

BPMA與MMMA體內(nèi)HUFA均最低，且均不含DHA，MA組的Z1→M的幼體變態(tài)率均較低，Z3發(fā)育緩慢，并沒有體現(xiàn)出MA營養(yǎng)互補(bǔ)，增加強(qiáng)化效果，促進(jìn)幼體發(fā)育的優(yōu)勢。這可能由于幾種藻混合使用產(chǎn)生“毒性”作用，曹淑莉等[17]也作了類似的報道。

有資料表明鹵蟲HUFA含量低，本次試驗的仔蝦培育階段，AS與CM或強(qiáng)化MM搭配飼養(yǎng)的仔蝦r是AS搭配FD的2倍，這表明AS與CM或強(qiáng)化MM都能形成營養(yǎng)互補(bǔ)，提高仔蝦存活率。

投喂合適的單胞藻、BP、MM等活餌料的蝦苗出苗率優(yōu)于FD組，分析兩者育苗效果不同的原因，首先是活餌料均勻散布于水體中，對蝦幼體可一直攝取，而配合飼料易沉底，過量投喂也難以提高攝食率；其次是配合飼料易敗壞水質(zhì)，試驗中投喂過FD的CMF組與FD組水體中弧菌含量和CODMn 分別為 440、400、5.54、5.90 mg/L，明顯高于未投FD組，而活餌料不僅對水質(zhì)污染小，單胞藻還可凈化水體，做動物性活餌料的營養(yǎng)強(qiáng)化飼料。

綜上所述，CM或Cs可用來強(qiáng)化BP，CM或PV可用來強(qiáng)化MM，CM、PV和DG可作為凡納濱對蝦Z1的開口餌料，后階段幼體培育階段可用來調(diào)節(jié)水質(zhì)，并作輔助餌料，但不宜采用兩種或兩種以上的MA強(qiáng)化或投喂?？捎脧?qiáng)化BP培育凡納濱對蝦Z2→M，可交替使用強(qiáng)化蒙古裸腹溞與鹵蟲無節(jié)幼體培育仔蝦。在生產(chǎn)中可采用BPCM或BPCs、AS、MMPV的餌料搭配培育凡納濱對蝦蝦苗。

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