工廠化栽培白玉菇的液體種菌株篩選

許占伍 張引芳 朱愛(ài)蓮 金 力 李春光 閔 亮

(上海浦東天廚菇業(yè)有限公司,上海浦東 201203)

白玉菇 (Hypsizygus marmoreus)是近年來(lái)從日本引進(jìn)的食用菌新品種,隸屬于傘菌目,白蘑科,玉蕈屬。在日本,人們常把它與珍貴的松茸相提并論,被冠名為 “假松茸”,享有 “聞則松茸,食之玉蕈”之譽(yù)。在我國(guó)有著極好的發(fā)展前景。

液體菌種是食用菌領(lǐng)域正在研究和使用的一項(xiàng)新技術(shù),特別是大規(guī)模工廠化生產(chǎn)食用菌的今天,液體菌種已成為菌種發(fā)展的趨勢(shì)。[1]目前,國(guó)內(nèi)白玉菇工廠化栽培中仍然以固體菌種為主,其生長(zhǎng)周期長(zhǎng),易長(zhǎng)瘤蓋。為了做好白玉菇液體菌種工廠化栽培的推廣工作,保證其穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn),提高栽培的經(jīng)濟(jì)效益,本試驗(yàn)對(duì)收集來(lái)的白玉菇菌株進(jìn)行了品比試驗(yàn)。篩選出一適合工廠化液體培養(yǎng)、生長(zhǎng)周期短、產(chǎn)量穩(wěn)定的白玉菇液體菌株。

1 材料與方法

1.1 供試菌株 B-3、B-6、B-10、B-13均引自日本,以本公司當(dāng)家品種TB-4固體種為對(duì)照。

1.2 試驗(yàn)方法

(1)不同菌株平皿試驗(yàn)。采用標(biāo)準(zhǔn)PDA培養(yǎng)基做成平板,挑取0.5 cm ×0.5 cm大小菌種塊接入,生化培養(yǎng)箱培養(yǎng),溫度22～24℃,觀察菌絲形態(tài)、色澤和長(zhǎng)勢(shì),每24小時(shí)測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度,做好記錄,每一菌株接10塊,3個(gè)重復(fù),結(jié)果取平均值。

(2)搖瓶試驗(yàn)。按本公司液體菌種2號(hào)培養(yǎng)基配方,每個(gè)菌株各做3個(gè)搖瓶,于22～24℃、180 r/min搖床培養(yǎng)5天。搖勻后每24小時(shí)取樣檢測(cè)pH,每瓶各取10 mL測(cè)定菌絲濕重,取1 mL培養(yǎng)液稀釋到10 mL,均勻后取1 mL于培養(yǎng)皿中統(tǒng)計(jì)菌絲球個(gè)數(shù)并觀察菌絲均一度。[2]

(3)液體發(fā)酵罐試驗(yàn)。按天廚液體菌種2號(hào)培養(yǎng)基配方,配制液體培養(yǎng)基,將搖瓶菌種接入發(fā)酵罐內(nèi),22～24℃溫度下培養(yǎng)5天,觀察發(fā)酵罐液體顏色,每24小時(shí)取樣檢測(cè)pH值與菌球量,每罐各取10 mL測(cè)定菌絲濕重,做3個(gè)重復(fù),結(jié)果取平均值。

(4)栽培試驗(yàn)。栽培種配方為本公司 “天廚之星”白玉菇栽培配方。B-10,B-13各做3批次,每次各接96筐,記錄培養(yǎng)時(shí)間。觀察搔菌時(shí)培養(yǎng)料色澤,原基誘出量及子實(shí)體整齊度,統(tǒng)計(jì)單產(chǎn),結(jié)果取平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同菌株平皿試驗(yàn) 試驗(yàn)中的5個(gè)菌株,接種24小時(shí)后,B-10、B-13接種點(diǎn)菌絲有萌發(fā)的跡象;接種48小時(shí)后B-3、B-6、TB-4接種點(diǎn)菌絲開(kāi)始萌發(fā);接種14天后,B-10菌絲粗壯濃白、日均生長(zhǎng)速度5.2mm,為最快;B-13和TB-4菌絲均粗壯較白,日均生長(zhǎng)速度分別為4.9 mm和4.6 mm;B-3、B-6菌絲生長(zhǎng)速度都較慢,且生長(zhǎng)不均勻,不宜進(jìn)行下一步試驗(yàn)。挑選B-10,B-13,TB-4作進(jìn)一步研究。

2.2 搖瓶試驗(yàn) 從表1可以看出隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加,pH值、菌含量也隨之遞增。B-10菌絲長(zhǎng)勢(shì)均勻成球狀、濃密有漂浮狀小菌絲球 (圖 1),培養(yǎng)第7天菌含量達(dá)2.696 g/10mL,菌絲球個(gè)數(shù)為2 850個(gè)/mL;B-13菌絲成絲狀、分布稀疏,菌含量也較B-10明顯降低;TB-4菌絲球大小參差不齊,第7天菌含量只有1.690 g/10mL,且其液體色澤較深,不適合發(fā)酵罐試驗(yàn)。

表1 B-10、B-13、TB-4搖瓶階段生長(zhǎng)特性

2.3 液體發(fā)酵罐試驗(yàn) 從表2可以看出,在發(fā)酵罐培養(yǎng)過(guò)程中,隨著培養(yǎng)時(shí)間增加,pH值下降,菌含量遞增。B-10較B-13生長(zhǎng)速度快,B-10的菌絲成球狀,且周圍絨毛狀菌絲萌發(fā)多,活力較強(qiáng)。其菌絲球分布均勻,發(fā)酵液清澈,無(wú)異味。B-13菌絲成絲狀,稀疏細(xì)小活力差 (圖2)。

表2 B-10、B-13發(fā)酵罐階段生長(zhǎng)特性

2.4 栽培試驗(yàn) 試驗(yàn)結(jié)果表明,B-10培養(yǎng)周期為80天,比B-13縮短5天;生育周期比B-13縮短3天,平均每個(gè)生育室可在2天內(nèi)清倉(cāng)。整個(gè)生產(chǎn)周期比B-13縮短8天,搔菌時(shí)培養(yǎng)料柔軟、呈乳黃色。B-10原基較易誘出,芽出量多且整齊,菇色潔白、花紋少,平均單瓶產(chǎn)量達(dá)156 g,生產(chǎn)上連續(xù)使用未發(fā)現(xiàn)有瘤蓋菇發(fā)生;而B(niǎo)-13芽出量少、不整齊,平均單產(chǎn)為129.5 g,菇乳黃色,有少量瘤蓋菇發(fā)生。

3 結(jié) 論

圖1 B-10、TB-4在平皿中的菌絲形態(tài)

圖2 B-10、B-13在發(fā)酵罐中的菌絲形態(tài)

通過(guò)菌絲體形態(tài)、搖瓶液態(tài)培養(yǎng)和發(fā)酵罐三個(gè)層面的菌株篩選,B-10在液體培養(yǎng)時(shí)表現(xiàn)為菌絲生長(zhǎng)速度快,菌絲球分布均勻,活力強(qiáng),菌含量高;出菇試驗(yàn)時(shí)芽出量大,生產(chǎn)周期短,產(chǎn)量高,品質(zhì)好,平均單瓶產(chǎn)達(dá)到156.3 g,表現(xiàn)最佳。故選其作為生產(chǎn)用種,命名為 “天廚之星”白玉菇菌種。

TB-4為本公司以往固體種當(dāng)家菌株,其固體種生產(chǎn)綜合性狀較突出,而液體培養(yǎng)產(chǎn)量相對(duì)較差,究其原因可能是固體菌種無(wú)法立即適應(yīng)液體培養(yǎng)條件,“水”感性狀較差。目前本公司應(yīng)用B-10生產(chǎn)的同時(shí),對(duì)國(guó)內(nèi)較好的固體白玉菇菌株采取自主創(chuàng)新的 “兩棲雙向培養(yǎng)技術(shù)”,以期進(jìn)一步改良并篩選出適合工廠化生產(chǎn)的液體菌種高產(chǎn)菌株。

[1]張引芳.食用菌液體菌種生產(chǎn)與應(yīng)用[J].食用菌,2004(6):11～12.

[2]閆長(zhǎng)偉,陳 合,陳宜鼎.金針菇液體菌種篩選及培養(yǎng)條件的研究 [J]中國(guó)食用菌,2002,22(1):35～37.