• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    結(jié)直腸癌圍術(shù)期患者免疫功能狀態(tài)及黃芪注射液的調(diào)節(jié)作用

    2011-05-03 00:27:10季錫清杜峻峰盛新華
    實(shí)用癌癥雜志 2011年4期
    關(guān)鍵詞:圍術(shù)黃芪直腸癌

    季錫清 杜峻峰 陳 綱 盛新華 于 波

    為探討機(jī)體圍術(shù)期免疫狀態(tài)和結(jié)直腸癌調(diào)節(jié)免疫治療方法,我們應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)和生物化學(xué)方法,檢測128例結(jié)直腸癌患者圍術(shù)期T細(xì)胞亞群、NK、IgG、IL-2、sIL-2R水平,現(xiàn)報告如下。

    1 材料與方法

    1.1 研究對象

    2010年1月~12月,北京軍區(qū)總醫(yī)院普外科收治128例結(jié)直腸癌患者,均經(jīng)手術(shù)病理檢查確診。男性73例,女性47例(男女比1.6∶1)。年齡28~83歲,中位年齡54歲,≥65歲26例(21.6%)。所有患者按美國癌癥聯(lián)合會第六版TNM分期進(jìn)行分期:Ⅰ期6 例(4.6%),Ⅱ期 40 例(31.3%),Ⅲ 期 52 例(40.6%),Ⅳ期30 例(23.5%)。以同期 28 例門診健康體檢者作為對照,男性18例,女性10例,年齡24~52歲,中位年齡38.5歲。

    1.2 研究方法

    將患者分為健康對照組、圍術(shù)期常規(guī)組、圍術(shù)期治療組(圍術(shù)期患者均簽署知情同意書)。健康對照組:系體檢證明健康者。圍術(shù)期常規(guī)組:僅給予補(bǔ)充水分、電解質(zhì)及必要的營養(yǎng)支持。圍術(shù)期治療組:除給予補(bǔ)充水分、電解質(zhì)及必要的營養(yǎng)支持外,還給予50 ml黃芪注射液(成都地奧九泓制藥廠生產(chǎn)國藥準(zhǔn)字:Z51021776)加生理鹽水500 ml靜脈點(diǎn)滴,1次/d,連用4天。

    1.3 測定指標(biāo)及方法

    測定外周血免疫球蛋白IgG、自然殺傷細(xì)胞NK、T淋巴細(xì)胞及其亞群CD3、CD4、CD8、白細(xì)胞介素2(IL-2)活性及血清可溶性白細(xì)胞介素2受體(sIL-2R)的濃度。為避免凝血過程中血細(xì)胞分泌細(xì)胞因子影響結(jié)果,本研究采用血漿。分別于術(shù)前 1~3 d、術(shù)后8~15 d、輸液前和輸液后1~3 d清晨,抽取空腹靜脈血5.0 m l,均置肝素化試管內(nèi)離心保存。IgG、自然殺傷細(xì)胞NK均由本中心實(shí)驗(yàn)室測定,T淋巴細(xì)胞及其亞群均應(yīng)用流式細(xì)胞儀測定,外周血IL-2活性及血清sIL-2R含量的測定均按試劑盒說明進(jìn)行。

    1.4 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    數(shù)據(jù)分析采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件。采用t檢驗(yàn)比較組間差異。各指標(biāo)應(yīng)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用配對t檢驗(yàn),獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)及相關(guān)分析。

    2 結(jié)果

    2.1 圍術(shù)期結(jié)直腸癌患者免疫功能狀態(tài)

    圍術(shù)期結(jié)直腸癌Ⅲ、Ⅳ期患者與健康對照組比較,IL-2、NK、CD3、CD4水平及 CD4/CD8值 明顯低于健康對照組,其降低幅度與腫瘤臨床分期相關(guān)(P<0.05),而IgG、sIL-2R及CD8水平明顯高于健康對照組(P<0.01),其升高幅度與腫瘤臨床分期相關(guān)(P<0.05);Ⅰ/Ⅱ期患者上述各項(xiàng)指標(biāo)變化不明顯(P>0.05)。術(shù)后除Ⅰ/Ⅱ期患者外,余患者IgG、sIL-2R及CD8水平均有所降低,接近健康對照組(P>0.05),IL-2、NK、CD3、CD4水平 及CD4/CD8值均有所升高,接近健康對照組(P>0.05)(表1)。

    2.2 黃芪注射液對圍術(shù)期結(jié)直腸癌患者免疫功能調(diào)節(jié)作用

    應(yīng)用黃芪注射液治療的結(jié)直腸癌患者(除Ⅰ/Ⅱ期患者外),治療前 IL-2、NK、CD3、CD4水平及 CD4/CD8值明顯低于健康對照組,其降低幅度與腫瘤臨床分期相關(guān)(P<0.05),而IgG、sIL-2R及CD8水平明顯高于健康對照組(P<0.01),其升高幅度與腫瘤臨床分期相關(guān)(P<0.05);圍術(shù)期相應(yīng)分期患者經(jīng)黃芪注射液治療后與治療前比較,IgG、sIL-2R及CD8水平均明顯降低(P <0.01),IL-2、NK、CD3、CD4 水平及CD4/CD8值均明顯升高(P<0.01)。相應(yīng)臨床分期結(jié)直腸癌患者圍術(shù)期黃芪注射液治療組與未治療組術(shù)后比較,IL-2、NK、CD3、CD4 及 CD4/CD8 水平明顯升高,IgG、sIL-2R及CD8水平明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P < 0.05)(表1)。

    3 討論

    機(jī)體免疫功能低下,尤其是細(xì)胞免疫功能低下與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān),T淋巴細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞作為細(xì)胞免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞,在抗腫瘤免疫方面抑制局部炎癥、殺傷或抑制腫瘤細(xì)胞有特殊重要作用。T淋巴細(xì)胞即CD3細(xì)胞又進(jìn)一步分為CD4和CD8亞群。

    CD4是輔助B細(xì)胞增殖分化產(chǎn)生抗體,在整個免疫調(diào)節(jié)中處于中心位置。CD8是真正的效應(yīng)細(xì)胞,調(diào)節(jié)抗體的合成、分泌及T細(xì)胞的增殖,是主要是殺傷細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞的活化、分化、增殖除本身起到免疫監(jiān)視及抗腫瘤作用之外,尚有促進(jìn)NK細(xì)胞活性,促進(jìn)B細(xì)胞分泌抗體等作用,是腫瘤免疫中的重要因素之一,T輔助細(xì)胞與T抑制細(xì)胞之間平衡通過CD4與CD8細(xì)胞的百分比表現(xiàn),CD4/CD8是衡量圍術(shù)期患者免疫抑制程度的重要指標(biāo),我們的研究中結(jié)直腸癌患者術(shù)前除Ⅰ/Ⅱ期外均出現(xiàn)CD3、CD4和CD4/CD8較健康對照組低,降低幅度與荷瘤分期相關(guān),與術(shù)前比較CD3、CD4和CD4/CD8比值明顯提高,提示隨病情發(fā)展,結(jié)直腸癌患者細(xì)胞免疫功能逐漸低下,手術(shù)切除腫瘤可不同程度提高患者的細(xì)胞免疫功能,這與其他研究者的結(jié)論是一致[1,2]。荷瘤狀態(tài)下可誘導(dǎo)多種具有負(fù)向免疫調(diào)節(jié)功能的抑制性免疫細(xì)胞亞群在腫瘤局部的擴(kuò)增和聚集,與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),表現(xiàn)為CD4減少、CD8增加、CD4/CD8比值下降,隨著荷瘤進(jìn)展,上變化更加明顯;而且,隨著活化的CD4細(xì)胞和T細(xì)胞表達(dá)的MHC分子、B7分子及活性因子減少,導(dǎo)致樹突狀細(xì)胞和T細(xì)胞抗原提呈功能減弱,CD8細(xì)胞的殺傷腫瘤細(xì)胞作用顯著下降。因此當(dāng)T細(xì)胞亞群的數(shù)量和功能發(fā)生異常時,殺傷腫瘤作用降低,并直接影響腫瘤發(fā)展和預(yù)后[3]。圍術(shù)期黃芪注射液治療后CD3、CD4比例和CD4/CD8比值明顯升高,與未輸注黃芪注射液組比較上述指標(biāo)明顯升高,其幅度高于單純手術(shù)組,說明黃芪注射液確能起到調(diào)節(jié)免疫功能的作用。

    表1 結(jié)直腸癌圍術(shù)期患者治療前后T細(xì)胞亞群、NK、IgG、IL-2和sIL-2R變化±s)

    表1 結(jié)直腸癌圍術(shù)期患者治療前后T細(xì)胞亞群、NK、IgG、IL-2和sIL-2R變化±s)

    與對照組比較:a為P>0.05,b為P<0.05,其他 P <0.01;與圍術(shù)前常規(guī)組對應(yīng)的腫瘤臨床分期比較,c為 P >0.05,d為 P <0.05,其他 P <0.01;與圍術(shù)前治療組對應(yīng)的腫瘤臨床分期比較,e為 P >0.05,f為 P <0.05,其他 P <0.01

    組別 例數(shù) IL-2(U/ml)sIL-2R(U/ml) NK(%) IgG(g/L) CD3(%) CD4(%) CD8(%)對照組 28 25.87 ±3.72 257.23 ±76.28 24.26 ±8.86 11.14±4.01 66.34 ±3.33 39.88 ±6.49 28.69 ±3.84±4.73 69.72 ±11.81 44.32 ±6.67 26.02 ±7.38圍術(shù)前常規(guī)組Ⅰ/Ⅱ 23 24.12 ±4.24a 276.65 ±65.23a 22.51 ±6.89a 11.43 ±3.55a 70.21 ±7.84a 43.14 ±5.82a 28.78 ±4.54aⅢ26 19.31 ±3.33b 512.34 ±118.6b 18.44 ±5.36b 16.35 ±4.52b 60.27 ±4.56b 35.34 ±4.67b 31.15 ±3.65bⅣ15 17.18 ±2.67 643.59 ±105.65 16.10 ±4.71 17.44 ±3.19 53.92 ±5.21 30.69 ±3.41 34.73 ±2.89圍術(shù)后常規(guī)組Ⅰ/Ⅱ 23 24.54 ±3.45c 261.99 ±72.23c 24.56 ±7.37c 12.12 ±3.71c 71.56 ±8.14c 44.62 ±7.59c 29.29 ±3.49cⅢ26 22.26 ±4.22d 280.38 ±89.85d 20.95 ±4.62d 13.15 ±3.64d 64.34 ±3.69d 38.82 ±4.65d 28.89 ±3.66dⅣ15 19.67 ±3.67 391.65 ±112.27 18.56 ±3.78 14.75 ±3.71 59.29 ±4.22 35.32 ±4.29 30.15 ±4.51圍術(shù)前治療組Ⅰ/Ⅱ 23 25.37 ±4.15a 273.31 ±65.35a 25.62 ±6.84a 12.75 ±4.62a 68.38 ±7.89a 42.76 ±6.54a 28.32 ±4.15aⅢ26 21.11 ±4.24b 566.57 ±123.2b 18.72 ±4.30b 16.42 ±3.51b 63.32 ±4.89b 33.54 ±4.76b 32.34 ±4.15bⅣ15 19.32 ±3.54 651.51 ±125.25 16.14 ±4.23 18.17 ±4.29 57.45 ±5.91 29.34 ±5.60 35.75 ±3.69圍術(shù)后治療組Ⅰ/Ⅱ 23 25.78 ±3.59e 266.73 ±79.10e 25.36 ±6.93e 11.48 ±4.20e 69.22 ±8.62e 43.15 ±8.46e 27.81 ±3.53eⅢ26 24.80 ±3.81f 289.79 ±65.69f 22.57 ±3.41f 12.98 ±3.57f 68.56 ±4.72f 42.36 ±4.76f 27.20 ±4.25fⅣ15 22.35 ±4.39 321.65 ±81.92 21.71 ±4.31 13.62

    sIL-2R來自活化的T、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞的IL-2受體(m IL-2R)α 鏈成分[4],在肺癌、肝癌、乳腺癌等惡性實(shí)體瘤中sIL-2R顯著升高是由于癌細(xì)胞的刺激,免疫細(xì)胞IL-2膜受體p55(Tac抗原)過度表達(dá)脫落形成,而且有轉(zhuǎn)移時增高更為明顯[5]。惡性腫瘤患者血清sIL-2R水平增高目前被認(rèn)為是體內(nèi)淋巴細(xì)胞活化的表現(xiàn),sIL-2R作為低親和力受體對T細(xì)胞生長產(chǎn)生負(fù)調(diào)節(jié)作用,它通過與細(xì)胞膜IL-2R(m IL-2R)競爭性結(jié)合IL-2,能調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的增殖和功能,發(fā)揮重要的抗腫瘤作用,同時能中和活化T淋巴細(xì)胞周圍的IL-2,以減弱機(jī)體的自分泌效應(yīng),抑制已活化的T細(xì)胞克隆性擴(kuò)增,從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)和免疫抑制作用。因此,血清sIL-2R水平反映了T細(xì)胞活化的狀態(tài)和細(xì)胞免疫功能情況,水平愈高,則提示免疫抑制愈嚴(yán)重,患者愈合亦愈差[6]。

    白細(xì)胞介素-2(IL-2)是CD4(Th1)細(xì)胞分泌的1種具有廣泛生物學(xué)活性的主要細(xì)胞因子,在腫瘤免疫治療中受到廣泛重視。主要受體CD25a、CD25b,它主要起活化T細(xì)胞,促進(jìn)T細(xì)胞增殖的作用,具有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用[7]。本組資料結(jié)果提示,結(jié)直腸癌患者在腫瘤切除后,IL-2的水平逐漸升高,與術(shù)前相比有顯著性差異。推測IL-2是機(jī)體免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)中起著重要作用的細(xì)胞因子,它能誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,可增強(qiáng)T細(xì)胞、B細(xì)胞、自然殺傷(natural killer,NK)細(xì)胞和單核細(xì)胞免疫應(yīng)答能力。

    NK細(xì)胞是淋巴細(xì)胞分化譜中的1個特殊亞群,先于淋巴細(xì)胞發(fā)揮作用,在非特異性免疫中發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)作用,其外周血表面標(biāo)志主要是CD16和CD56。NK細(xì)胞被激活后可發(fā)生顆粒胞吐,發(fā)揮類似殺傷性T細(xì)胞作用,并釋放可溶性介質(zhì)和細(xì)胞因子,發(fā)揮細(xì)胞毒作用,從而對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生非特異性殺傷作用[8]。本研究發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者術(shù)前外周血NK細(xì)胞的活性顯著低于健康對照組,根治術(shù)后NK細(xì)胞活性增強(qiáng),術(shù)后1周,外周血NK細(xì)胞數(shù)明顯升高,并且NK細(xì)胞活性隨著腫瘤分期的增加及腫瘤負(fù)荷加大而逐級降低。因此,晚期結(jié)直腸癌患者免疫水平低于早期患者,其免疫功能隨腫瘤進(jìn)展而降低。NK細(xì)胞有可能作為1種重要的免疫指標(biāo),用于腫瘤監(jiān)測,有助于結(jié)直腸癌患者的病情判斷。

    我們對128例結(jié)直腸癌患者血清sIL-2R水平進(jìn)行同步動態(tài)觀測。結(jié)果表明,結(jié)直腸癌患者術(shù)前血清sIL-2R水平顯著高于健康對照組,且與結(jié)直腸癌臨床TNM分期顯著相關(guān)。術(shù)后2周患者血清sIL-2R檢測結(jié)果表明,根治術(shù)后隨著荷瘤降低,阻斷或減少了由腫瘤引起的體內(nèi)激活的淋巴細(xì)胞數(shù)目,血清sI-2R水平顯著降低,由此可見,血清sIL-2R、NK細(xì)胞活性和IL-2水平檢測有助于對結(jié)直腸癌圍術(shù)期患者免疫狀態(tài)和病情的判斷。

    圍術(shù)期結(jié)直腸癌患者機(jī)體細(xì)胞免疫功能處于抑制狀態(tài),并受多種因素影響,如術(shù)前禁食營養(yǎng)要素缺乏會降低機(jī)體免疫力,增加感染的風(fēng)險;內(nèi)毒素的作用,巨噬細(xì)胞功能受損,血漿中存在細(xì)胞免疫抑制因子,細(xì)胞介導(dǎo)的免疫缺陷等,減輕腫瘤負(fù)荷治療,雖然去除了免疫抑制因子,細(xì)胞免疫功能得到恢復(fù)可部分改善其免疫功能[9]。但由于手術(shù)創(chuàng)傷、麻醉和輸血的影響。在術(shù)后一段時間內(nèi)患者的免疫功能依然處于抑制狀態(tài),形成術(shù)后免疫抑制加重期,為腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)提供了機(jī)會,現(xiàn)代基礎(chǔ)和臨床研究表明黃芪對機(jī)體免疫功能有增強(qiáng)和調(diào)節(jié)作用[10]。我們研究了黃芪注射液對結(jié)直腸癌圍術(shù)期患者的免疫調(diào)節(jié)作用,取得了滿意的療效。黃芪是1種扶正培本中藥,含有三萜皂苷、黃芪多糖、黃酮,多種氨基酸和微量元素,具有健脾補(bǔ)氣、益胃固表等多種功效。其有效成分為黃芪多糖,我們在結(jié)直腸癌圍術(shù)期應(yīng)用黃芪后似乎免疫功能改善更加明顯,可能是由于手術(shù)創(chuàng)傷和腫瘤本身對宿主免疫功能均存在抑制作用,而黃芪對腫瘤患者亦能調(diào)節(jié)免疫功能,其機(jī)理可能是由于黃芪能促進(jìn)蛋白質(zhì)合成及能量代謝,恢復(fù)機(jī)體抗病能力,并能誘導(dǎo)體內(nèi)抗癌因子白細(xì)胞介素的產(chǎn)生,增強(qiáng)LAK細(xì)胞的抗腫瘤活性,從而有助于抑制腫瘤生長。黃芪本身還有保護(hù)機(jī)體免疫功能,有研究表明黃芪可抑制T細(xì)胞,導(dǎo)致其它T細(xì)胞亞群如輔助性T細(xì)胞功能增強(qiáng),從而保護(hù)T細(xì)胞功能,增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。本研究結(jié)果顯示,黃芪組治療后CD8明顯下降,CD4/CD8比值上升,表明患者荷瘤狀態(tài)下,機(jī)體常常處于免疫抑制狀態(tài),而圍術(shù)期用黃芪注射液治療可促進(jìn)機(jī)體細(xì)胞免疫功能的增強(qiáng)。同時,黃芪組治療后血清IgG含量明顯較對照組升高,說明黃芪對機(jī)體體液免疫也有促進(jìn)作用,IgG是機(jī)體免疫應(yīng)答產(chǎn)生的主要抗體,是機(jī)體抗感染的主力軍。IgG與結(jié)直腸癌細(xì)胞結(jié)合后,在補(bǔ)體參與下能溶解腫瘤細(xì)胞并協(xié)助多種免疫細(xì)胞發(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用,抵抗腫瘤產(chǎn)生,另外它還可以介導(dǎo)吞噬細(xì)胞等發(fā)揮抗體調(diào)理作用,可能由于黃芪對抗體形成細(xì)胞有刺激作用,能使機(jī)體分泌量增加。黃芪有效改善患者的免疫功能包括促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖,血清IL-2和NK細(xì)胞活性水平的升高,降低血清sIL-2R水平。結(jié)直腸癌患者圍術(shù)期使用安全可靠,可提高機(jī)體免疫力,因此具有臨床推廣價值。

    [1] Beverley P,Brostoff J,Male D,et al.Immunology〔M〕.6th ed.Toronto:Harcourt Publishers Limited,2001:289 ~302.

    [2] Qiu H,Xiao-Jun W,Zhi-Wei Z,et al.The prognostic significance of peripheral T-lymphocyte subsets and natural killer cells in patientswith colorectal cancer〔J〕.Hepatogastroenterology,2009,56(94 ~95):1310.

    [3] Diederichsen AC,Hjelmborg JB,Christensen PB,etal.Prognostic value of the CD4+/CD8+ratio of tumour infiltrating lymphocytes in colorectal cancer and HLA-DR expression on tumour cells〔J〕.Cancer Immunol Immunother,2003,52(7):423.

    [4] Rubin LA,Kurman CC,F(xiàn)ritz ME,et al.Soluble interleukin-2 receptor are released from activated human lymphoid cells in vitro〔J〕.J Immunol,1985,54(18):3172.

    [5] Lissoni P,Barni S,Rovelli F,et al.The biological significance of soluble interleukin-2 receptor in solid tumour〔J〕.Eur JCancer,1990,26(1):33.

    [6] Rubin LA,Nelson DL.The soluble inter leukin-2 receptors:biology,function,and clinical application〔J〕.Ann Inter Med,1990,113:619.

    [7] Berghella AM,Contasta I,Pellegrini P,et al.Are immunologicalmechanisms involved in colon cancer and are they possiblemarkers for biotherapy improvement?〔J〕.Cancer Biother Radiopharm,2006,21(5):468.

    [8] Brandtzaeg P.Induction of secretory immunity and memory atmucosal surfaces〔J〕.Vaccine,2007,25(30):5467.

    [9] 劉全達(dá),蔡志民,余佩武,等.大腸癌患者圍手術(shù)期免疫狀態(tài)變化的臨床意義〔J〕.免疫學(xué)雜志,2000,16(1):58.

    [10] 趙蓮華,李 清,林 莧,等.黃芪多糖協(xié)同順鉑對BEL7404人肝癌細(xì)胞的殺傷作用〔J〕.實(shí)用癌癥雜志,2005,20(1):34.

    猜你喜歡
    圍術(shù)黃芪直腸癌
    Huangqi decoction (黃芪湯) attenuates renal interstitial fibrosis via transforming growth factor-β1/mitogen-activated protein kinase signaling pathways in 5/6 nephrectomy mice
    “補(bǔ)氣之王”黃芪,你吃對了嗎?
    圍術(shù)期舒適干預(yù)應(yīng)用于口腔頜外科的效果
    內(nèi)鏡下食管靜脈曲張?zhí)自g(shù)的圍術(shù)期處理
    黃芪是個寶
    海峽姐妹(2019年3期)2019-06-18 10:37:30
    腹腔鏡下直腸癌前側(cè)切除術(shù)治療直腸癌的效果觀察
    圍術(shù)期血液管理新進(jìn)展
    直腸癌術(shù)前放療的研究進(jìn)展
    COXⅠ和COX Ⅲ在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)及其臨床意義
    β受體阻滯劑在圍術(shù)期高血壓中的應(yīng)用
    免费看美女性在线毛片视频| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 久久久色成人| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美区成人在线视频| 午夜精品一区二区三区免费看| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产成人aa在线观看| 91久久精品国产一区二区成人 | 久久久久久大精品| 久久中文看片网| 99精品欧美一区二区三区四区| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 嫩草影院入口| 给我免费播放毛片高清在线观看| 51国产日韩欧美| 国产精品精品国产色婷婷| 搡老妇女老女人老熟妇| 日本 欧美在线| 久9热在线精品视频| 久久6这里有精品| 一边摸一边抽搐一进一小说| 欧美日韩福利视频一区二区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 免费av毛片视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 久久久国产成人精品二区| 亚洲不卡免费看| 国产成人av激情在线播放| 欧美日本视频| 一级黄色大片毛片| 日本 av在线| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 欧美丝袜亚洲另类 | 99久久成人亚洲精品观看| 此物有八面人人有两片| 国产精品精品国产色婷婷| aaaaa片日本免费| 啦啦啦韩国在线观看视频| 色哟哟哟哟哟哟| 日本精品一区二区三区蜜桃| 无人区码免费观看不卡| 香蕉久久夜色| 亚洲自拍偷在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 美女 人体艺术 gogo| 一级毛片高清免费大全| ponron亚洲| 99在线人妻在线中文字幕| 真人一进一出gif抽搐免费| 欧美一级a爱片免费观看看| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 在线观看日韩欧美| 久久精品国产综合久久久| 日韩欧美国产一区二区入口| 一夜夜www| 欧美中文日本在线观看视频| 国产黄片美女视频| 国产精品电影一区二区三区| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美成人性av电影在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 在线观看66精品国产| 亚洲美女视频黄频| 亚洲成av人片免费观看| 99热这里只有是精品50| 一进一出抽搐gif免费好疼| 国产成人福利小说| 欧美3d第一页| 国内精品一区二区在线观看| 午夜a级毛片| 欧美黑人巨大hd| 色尼玛亚洲综合影院| 国产精品98久久久久久宅男小说| 18禁国产床啪视频网站| 一级作爱视频免费观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 国产野战对白在线观看| 欧美黑人巨大hd| 天堂影院成人在线观看| 精品不卡国产一区二区三区| 丰满乱子伦码专区| 中出人妻视频一区二区| 亚洲av二区三区四区| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 午夜老司机福利剧场| 中文在线观看免费www的网站| 久久香蕉精品热| 99热只有精品国产| 99在线视频只有这里精品首页| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲五月婷婷丁香| 日韩欧美在线乱码| 精品国产三级普通话版| 国产欧美日韩一区二区精品| 一本综合久久免费| 国产主播在线观看一区二区| 一级作爱视频免费观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 最新中文字幕久久久久| 最近在线观看免费完整版| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 色噜噜av男人的天堂激情| 免费搜索国产男女视频| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 久久亚洲真实| 两个人看的免费小视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 两个人视频免费观看高清| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产黄片美女视频| 99精品欧美一区二区三区四区| 久久久国产成人免费| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 人人妻人人澡欧美一区二区| 18禁在线播放成人免费| 九色国产91popny在线| 亚洲电影在线观看av| 亚洲内射少妇av| 桃色一区二区三区在线观看| 小说图片视频综合网站| 露出奶头的视频| 首页视频小说图片口味搜索| 国产视频一区二区在线看| 男女床上黄色一级片免费看| 最新在线观看一区二区三区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲avbb在线观看| ponron亚洲| 超碰av人人做人人爽久久 | 亚洲精品在线观看二区| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲人成网站高清观看| 大型黄色视频在线免费观看| 久久久久久久精品吃奶| 国产成人av激情在线播放| 日韩欧美国产一区二区入口| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产精品电影一区二区三区| 精品国产三级普通话版| bbb黄色大片| 观看免费一级毛片| 亚洲电影在线观看av| 亚洲无线在线观看| 高清在线国产一区| 精品一区二区三区人妻视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日本与韩国留学比较| 亚洲黑人精品在线| a级一级毛片免费在线观看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 看片在线看免费视频| 村上凉子中文字幕在线| 午夜精品在线福利| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久精品国产清高在天天线| aaaaa片日本免费| 国产黄片美女视频| 最近视频中文字幕2019在线8| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 精品电影一区二区在线| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 岛国在线免费视频观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久香蕉精品热| 久久久久久大精品| 久久国产精品人妻蜜桃| 日韩成人在线观看一区二区三区| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产午夜精品论理片| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 欧美色视频一区免费| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲国产精品999在线| 久久精品国产自在天天线| 小说图片视频综合网站| av欧美777| 亚洲黑人精品在线| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 中亚洲国语对白在线视频| 日本三级黄在线观看| h日本视频在线播放| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 观看美女的网站| 精品久久久久久久末码| 美女高潮的动态| 国内精品一区二区在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产精品电影一区二区三区| av中文乱码字幕在线| 51午夜福利影视在线观看| 欧美中文综合在线视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲成av人片免费观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日韩免费av在线播放| 国产精品三级大全| 亚洲成a人片在线一区二区| 又黄又爽又免费观看的视频| av欧美777| tocl精华| 黑人欧美特级aaaaaa片| 亚洲专区中文字幕在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 级片在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 在线免费观看的www视频| av女优亚洲男人天堂| 免费观看精品视频网站| 一区二区三区高清视频在线| 乱人视频在线观看| 日本三级黄在线观看| 身体一侧抽搐| 免费大片18禁| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲电影在线观看av| 国产一区二区激情短视频| 无人区码免费观看不卡| 欧美不卡视频在线免费观看| 他把我摸到了高潮在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 在线观看日韩欧美| av在线天堂中文字幕| 欧美色视频一区免费| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久国产精品影院| 香蕉av资源在线| 欧美色视频一区免费| 内射极品少妇av片p| 国产一区二区激情短视频| 亚洲人成电影免费在线| 成人无遮挡网站| 欧美成人性av电影在线观看| 久久亚洲真实| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产午夜福利久久久久久| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲人成电影免费在线| 免费一级毛片在线播放高清视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产麻豆成人av免费视频| 看黄色毛片网站| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 97人妻精品一区二区三区麻豆| а√天堂www在线а√下载| 精品日产1卡2卡| 亚洲色图av天堂| 国产精品久久久久久精品电影| 好男人在线观看高清免费视频| 色综合婷婷激情| 亚洲精品成人久久久久久| 国产美女午夜福利| 国产高潮美女av| 中国美女看黄片| 一本综合久久免费| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 一区二区三区国产精品乱码| 免费高清视频大片| 两个人看的免费小视频| 国产91精品成人一区二区三区| 女人被狂操c到高潮| 大型黄色视频在线免费观看| 麻豆成人午夜福利视频| 欧美最新免费一区二区三区 | 欧美一级毛片孕妇| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 免费观看的影片在线观看| 757午夜福利合集在线观看| or卡值多少钱| 一区二区三区国产精品乱码| 久久久久久国产a免费观看| 男女那种视频在线观看| 在线免费观看的www视频| 99热这里只有精品一区| 国产野战对白在线观看| e午夜精品久久久久久久| 欧美一区二区精品小视频在线| 18美女黄网站色大片免费观看| 国产精品99久久久久久久久| 香蕉丝袜av| 中文字幕av在线有码专区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 99精品久久久久人妻精品| 久久久久精品国产欧美久久久| 免费在线观看亚洲国产| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 久久精品91无色码中文字幕| 99热这里只有是精品50| 亚洲av二区三区四区| 亚洲无线观看免费| 村上凉子中文字幕在线| 18美女黄网站色大片免费观看| 99热这里只有精品一区| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产久久久一区二区三区| 一区二区三区激情视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 最近最新中文字幕大全电影3| 日韩人妻高清精品专区| 69av精品久久久久久| 黑人欧美特级aaaaaa片| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 欧美zozozo另类| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 国语自产精品视频在线第100页| 丰满的人妻完整版| 欧美乱妇无乱码| 成人永久免费在线观看视频| 国产不卡一卡二| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产真实伦视频高清在线观看 | 又紧又爽又黄一区二区| 色精品久久人妻99蜜桃| 免费av不卡在线播放| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美精品啪啪一区二区三区| 狠狠狠狠99中文字幕| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 精品免费久久久久久久清纯| 757午夜福利合集在线观看| 香蕉丝袜av| 欧美乱码精品一区二区三区| 超碰av人人做人人爽久久 | 亚洲精品国产精品久久久不卡| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产精品av视频在线免费观看| 国产淫片久久久久久久久 | 蜜桃久久精品国产亚洲av| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 极品教师在线免费播放| 亚洲第一电影网av| 免费在线观看影片大全网站| 嫩草影院精品99| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 大型黄色视频在线免费观看| 偷拍熟女少妇极品色| 国产综合懂色| 亚洲精品在线观看二区| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 热99re8久久精品国产| 欧美不卡视频在线免费观看| 有码 亚洲区| 成年女人毛片免费观看观看9| 久久国产精品影院| 国产精品日韩av在线免费观看| 老司机午夜十八禁免费视频| 国产午夜精品论理片| 久久久成人免费电影| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 久久久久久久久大av| 亚洲欧美激情综合另类| 手机成人av网站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产乱人伦免费视频| 少妇的逼好多水| 亚洲精品456在线播放app | 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 少妇的逼好多水| 国产精品野战在线观看| av在线天堂中文字幕| 国产午夜精品论理片| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美日韩精品网址| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲电影在线观看av| 成年人黄色毛片网站| 国产99白浆流出| 精品一区二区三区视频在线 | 特大巨黑吊av在线直播| 日韩欧美国产一区二区入口| 一本一本综合久久| 悠悠久久av| 亚洲成av人片免费观看| 黄色成人免费大全| 国产伦人伦偷精品视频| 手机成人av网站| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 制服人妻中文乱码| 精品久久久久久,| 国产精华一区二区三区| 午夜视频国产福利| 免费av毛片视频| 美女高潮的动态| 91字幕亚洲| 高清毛片免费观看视频网站| 亚洲国产精品合色在线| 免费高清视频大片| 色尼玛亚洲综合影院| 精华霜和精华液先用哪个| 一区二区三区免费毛片| 免费一级毛片在线播放高清视频| 午夜福利18| 啪啪无遮挡十八禁网站| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲精品在线美女| 久久中文看片网| 99久国产av精品| 日韩欧美国产一区二区入口| 一级作爱视频免费观看| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 日本精品一区二区三区蜜桃| www.熟女人妻精品国产| av国产免费在线观看| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲av二区三区四区| 亚洲av成人av| 两人在一起打扑克的视频| 99久久九九国产精品国产免费| 国产91精品成人一区二区三区| 可以在线观看的亚洲视频| 搞女人的毛片| 国产精品女同一区二区软件 | 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美乱妇无乱码| 最近最新中文字幕大全电影3| h日本视频在线播放| 3wmmmm亚洲av在线观看| 香蕉丝袜av| 免费在线观看亚洲国产| 国产激情欧美一区二区| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 午夜a级毛片| 69人妻影院| 性欧美人与动物交配| 亚洲中文日韩欧美视频| 12—13女人毛片做爰片一| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲精品在线观看二区| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产在视频线在精品| 成年版毛片免费区| 美女免费视频网站| 一夜夜www| 亚洲精品456在线播放app | 精华霜和精华液先用哪个| 香蕉丝袜av| 国产精品亚洲av一区麻豆| 久久精品国产综合久久久| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 久久久色成人| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 日本黄大片高清| 深夜精品福利| 午夜福利视频1000在线观看| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产精品1区2区在线观看.| 少妇丰满av| 欧美在线一区亚洲| 欧美另类亚洲清纯唯美| 手机成人av网站| 草草在线视频免费看| 免费搜索国产男女视频| 日韩欧美在线二视频| 欧美最新免费一区二区三区 | 脱女人内裤的视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产麻豆成人av免费视频| 人人妻人人看人人澡| 2021天堂中文幕一二区在线观| av在线天堂中文字幕| 亚洲精品456在线播放app | 久久久成人免费电影| 国产成人影院久久av| 淫妇啪啪啪对白视频| 免费在线观看影片大全网站| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 熟女人妻精品中文字幕| 色综合婷婷激情| 无遮挡黄片免费观看| 成人午夜高清在线视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 小说图片视频综合网站| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 久久久国产成人免费| 午夜视频国产福利| 色在线成人网| 91久久精品国产一区二区成人 | 波多野结衣巨乳人妻| av中文乱码字幕在线| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产精品 欧美亚洲| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 免费高清视频大片| 免费在线观看亚洲国产| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲五月婷婷丁香| 一区二区三区国产精品乱码| 美女大奶头视频| 免费看十八禁软件| 精品国内亚洲2022精品成人| 精品人妻1区二区| 免费人成视频x8x8入口观看| xxx96com| 午夜福利在线在线| 两个人视频免费观看高清| 一本精品99久久精品77| 在线观看av片永久免费下载| 天美传媒精品一区二区| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 丰满人妻一区二区三区视频av | 午夜福利成人在线免费观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 99在线人妻在线中文字幕| 天堂网av新在线| 久久久久久国产a免费观看| 国产亚洲精品av在线| 69人妻影院| 老司机在亚洲福利影院| 午夜福利在线观看吧| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 午夜老司机福利剧场| 午夜视频国产福利| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲欧美日韩高清专用| 欧美乱色亚洲激情| 丰满人妻一区二区三区视频av | 亚洲男人的天堂狠狠| 成人av一区二区三区在线看| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 亚洲内射少妇av| 亚洲av电影不卡..在线观看| 成人av一区二区三区在线看| а√天堂www在线а√下载| 国产成人av激情在线播放| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲最大成人手机在线| 欧美乱色亚洲激情| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产精品亚洲av一区麻豆| 精品国产亚洲在线| 日日干狠狠操夜夜爽| 免费在线观看日本一区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国产淫片久久久久久久久 | 亚洲第一电影网av| 天堂动漫精品| 两个人看的免费小视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产精品永久免费网站| avwww免费| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲乱码一区二区免费版| 国产视频内射| 午夜免费成人在线视频| 国产日本99.免费观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 欧美日韩一级在线毛片| 女同久久另类99精品国产91| 亚洲av第一区精品v没综合| 真人做人爱边吃奶动态| 国产精品,欧美在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精华一区二区三区| 免费无遮挡裸体视频| 日韩欧美免费精品| 国产伦精品一区二区三区四那| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产v大片淫在线免费观看| 亚洲精品亚洲一区二区| 亚洲五月婷婷丁香| 白带黄色成豆腐渣| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 国产激情欧美一区二区| 18禁国产床啪视频网站| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲精品在线观看二区| 麻豆国产av国片精品| 在线观看免费视频日本深夜| 老鸭窝网址在线观看| 999久久久精品免费观看国产| 女警被强在线播放| 亚洲美女黄片视频| 成熟少妇高潮喷水视频| 久久这里只有精品中国| 级片在线观看| 岛国视频午夜一区免费看| 国产成人av激情在线播放| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 脱女人内裤的视频| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 欧美日本视频| 日日干狠狠操夜夜爽| 婷婷精品国产亚洲av| 欧美乱妇无乱码| 久久精品91蜜桃|