豬瘟與藍(lán)耳病混合感染的診斷與治療方法

陳桂香,銀梅,范國英

（河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng) 453003）

豬瘟（classicalswine fever,CSF）是由豬瘟病毒引起的一種以高熱稽留、出血和高死亡率為主要特征的高度接觸性傳染病,是嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)的病毒性疾病.近年來豬瘟的發(fā)病特點發(fā)生了很大變化,由過去的典型豬瘟轉(zhuǎn)變?yōu)椴±碜兓坏湫?、臨床癥狀輕微的非典型豬瘟[1].豬藍(lán)耳病又稱“豬繁殖與呼吸障礙綜合征”,是由豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒引起的一種高度接觸PRRSV性傳染病.高致病性豬藍(lán)耳病是由PRRSV變異毒株引起的一種急性高致死性傳染病,病毒致病力強,傳播速度快,豬群發(fā)病率和死亡率高[2].它不僅引起豬群發(fā)生嚴(yán)重的原發(fā)性病原感染,更為嚴(yán)重的是還可引起豬的免疫抑制,導(dǎo)致豬群混合或繼發(fā)感染其他傳染病,給養(yǎng)豬戶帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失.目前,全世界主要養(yǎng)豬國家均有該病存在,已嚴(yán)重威脅著全世界的養(yǎng)豬業(yè).本文旨在為確診為豬瘟和藍(lán)耳病混合感染的豬的防治提供依據(jù).

1 材料和方法

1.1 病料來源

所采用的病料來自于新鄉(xiāng)市長垣縣趙堤鎮(zhèn)某豬場的病豬,共選呼吸困難、喘氣、咳嗽、腹瀉、耳部發(fā)紺等癥狀典型的60～70日齡的病豬10頭,其中剖檢3頭.

1.2 藥品、試劑與器材

藥品：菌毒急救（由吉林省五星動物保健藥廠生產(chǎn),主要成分：三甲氧芐啶、環(huán)丙氟哌酸、α-吡咯烷酮等,批準(zhǔn)文號：吉獸藥字X013576[2002]）、雜癥一針（由商丘天一生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),主要成分：黃芪多糖,批準(zhǔn)文號：獸藥字160242714[2006]）、防藍(lán)靈（湖南廣安生產(chǎn),主要成分：泰樂菌素,批準(zhǔn)文號：獸藥字183651326[2005]號）、金方案Ⅱ型（商丘天一生物技術(shù)有限公司生產(chǎn),主要成分：板藍(lán)根、穿心蓮、葛根、生地、連翹、黃芪、甘草、氟苯尼考、美他環(huán)素、解熱因子、止咳因子及誘食劑,批準(zhǔn)文號：豫獸藥字Z501185[2002]）、豬瘟活疫苗（武漢中博生化有限公司,規(guī)格：50頭份,批準(zhǔn)文號：獸藥字170261004[2006]）、抗豬瘟血清（安徽生物藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn),批準(zhǔn)文號：皖生藥字117713[2003]）、電解多維（山東濰坊生產(chǎn),批準(zhǔn)文號：X341628[2004]）、ORS（河南科技學(xué)院動物醫(yī)院配制）.

試劑：革蘭氏染色液、美藍(lán)染液（為實驗室自己配制）、豬藍(lán)耳病ELISA診斷試劑盒一套（由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院動物病毒室購得,批號：20060921）、豬瘟正向間接血凝板一套（由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所綜防技術(shù)研究組購得,批號：20060910）、載玻片、蓋玻片、10mL無菌注射器、一次性移液器吸頭、潔凈吸水紙、蒸餾水.

器材：80-2型高速離心機（上海手術(shù)器械廠）、BH-2型高倍顯微鏡（上海普丹光學(xué)儀器廠）、BIO-550型酶標(biāo)儀（美國伯樂公司生產(chǎn)）、HG303-3型恒溫箱（南京電器三廠制造）.

1.3 方法

1.3.1 流行病學(xué)調(diào)查 根據(jù)傳染病的流行過程采取現(xiàn)場調(diào)查的方法調(diào)查該豬場不同階段的存欄情況、免疫接種情況、飼養(yǎng)環(huán)境、發(fā)病率、死亡數(shù)、用藥史.

1.3.2 臨床表現(xiàn) 采用常規(guī)臨床檢查方法,觀察被毛、精神、皮膚、食欲、體溫、糞便、呼吸、眼瞼等.

1.3.3 病理剖檢 挑選3頭具有典型癥狀的病豬按常規(guī)方法解剖病豬,觀察胸腔及腹腔變化,并著重檢查心、肺、肝、脾、腎等組織器官的病變.

1.3.4 實驗室檢驗

1.3.4.1 細(xì)菌學(xué)檢查 無菌采取3頭病豬的心、肝、脾、肺、腎,按實驗室常規(guī)方法進(jìn)行組織抹片,分別采取革蘭氏、美藍(lán)染色后在400倍鏡下鏡檢.

1.3.4.2 正向間接血凝試驗 血清制備：10mL無菌注射器前腔靜脈采血,高速離心機2 500 r/min,離心20 min,要求血清清亮,無溶血.

按照中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所綜防技術(shù)研究組提供的豬瘟正向間接血凝抗原使用說明書嚴(yán)格操作.

判定標(biāo)準(zhǔn)：以呈現(xiàn)“++”凝集的最大稀釋倍數(shù)為該份血清的抗體效價.接種豬瘟疫苗的豬群免疫抗體效價達(dá)到1：16（即第4孔,呈現(xiàn)“++”凝集）為免疫合格.

1.3.4.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） 試劑盒檢測PRRS血清制備方法同1.3.4.2,按照華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院動物病毒室提供的豬藍(lán)耳病抗體檢測試劑盒使用說明書嚴(yán)格操作.

判定標(biāo)準(zhǔn)：以空白孔調(diào)零,在酶標(biāo)儀上測各孔OD630值.樣品OD630值大于0.42,判為陽性；樣品OD630值在0.38到0.42之間,判為可疑；樣品OD630值小于0.38,判為陰性.

1.4 治療方法

對于發(fā)病的豬,挑取30頭體重相近的病豬隨機分成3組,每組10頭,分別按照3種不同的治療方法作比較,第1組采用自家苗療法,5mL/頭,肌肉注射.第2組采用抗豬瘟高免血清療法,按1mL/kg,肌肉注射,連用3 d.第3組采用大劑量接種豬瘟疫苗療法,20頭份/頭,肌肉注射.以上3種療法同時配合菌毒急救按0.1mL/kg,雜癥一針按0.2mL/kg,分別上、下午肌肉注射,連用3～5 d,飼料中添加防藍(lán)靈按治療量0.8%連續(xù)拌料飼喂2周,金方案Ⅱ型按每袋100 g拌料50 kg,連用1周,飲水中添加ORS及電解多維[1-2].

對于未發(fā)病的豬采用藥物預(yù)防：在飼料中按上述治療量添加防藍(lán)靈,金方案Ⅱ,飲水中添加Vc或多維,以提高豬體的免疫力和抵抗力,同時可防止細(xì)菌繼發(fā)感染.

加強飼養(yǎng)管理,嚴(yán)格消毒,做好欄圈清潔衛(wèi)生,保持圈內(nèi)通風(fēng)、干燥,調(diào)整飼養(yǎng)密度,減少各種應(yīng)激,保持圈欄良好的飼養(yǎng)環(huán)境.嚴(yán)格實施消毒制度,采用各種有效的消毒劑或3%的燒堿溶液對門衛(wèi)消毒池、豬欄走道、運輸用具定期徹底消毒.

2 結(jié)果與分析

2.1 流行病學(xué)調(diào)查

經(jīng)調(diào)查該場已建場多年,現(xiàn)有存欄母豬120頭,種公豬8頭,斷奶仔豬150頭,育肥豬230頭,一直實施公豬春秋兩防,母豬配種前10天免疫,仔豬25～30日齡,免疫一次細(xì)胞苗（2頭份/頭）的豬瘟免疫程序,母豬定期免疫藍(lán)耳病、細(xì)小病毒、偽狂犬病、乙腦等多種疫苗.同時經(jīng)調(diào)查得知周圍有數(shù)家用泔水養(yǎng)豬的小規(guī)模豬場,相距不遠(yuǎn).2006年9月初60～70日齡的斷奶仔豬開始出現(xiàn)體溫升高,食欲下降,呼吸困難,喘氣,腹部皮下出現(xiàn)大量藍(lán)紫色出血點,腹瀉,耳發(fā)紺等不良癥狀,發(fā)病率約占斷奶仔豬的20%,曾使用復(fù)方增效磺胺、環(huán)丙沙星、恩諾沙星治療,均無顯著療效,已死亡2頭.

2.2 臨床癥狀

本次挑選3頭癥狀典型的病豬,其共同特征大致如下：被毛粗亂,精神沉郁,全身潮紅,食欲下降,擠堆,體溫升高至40～42℃,頑固性腹瀉,腹瀉物惡臭,呈黃色或褐色,呼吸加快,咳嗽,肌肉震顫,共濟(jì)失調(diào),后軀麻痹,眼瞼水腫,兩耳、鼻盤發(fā)紺,腹下、后軀內(nèi)側(cè)、四肢見針頭大小的出血斑點.

2.3 病理剖檢

剖檢的3頭病豬,其共同病變大體如下：肺呈灰白色至棕色,花斑狀,質(zhì)地堅實呈“肝樣”,肺小葉間質(zhì)增寬,心臟松弛,心肌充血,全身淋巴結(jié)特別是頜下、肺門、腸系膜、腹股溝淋巴結(jié)出血腫大,切面呈大理石樣,胃內(nèi)充氣、空虛,內(nèi)有少量黃色帶泡沫狀粘液,胃底出血,胃黏膜脫落；腸系膜充血,腸漿膜斑狀出血點,肝臟發(fā)黃有出血點,腎發(fā)黃,有麻雀蛋樣出血點,有溝會回,脾臟邊緣有數(shù)量不等的紫黑色出血性梗死灶,膀胱黏膜有出血點.

2.4 實驗室檢驗結(jié)果

2.4.1 細(xì)菌學(xué)檢驗結(jié)果 將無菌采取的心、肝、脾、肺、腎經(jīng)革蘭氏染色、美藍(lán)染色后置顯微鏡400X下鏡檢,結(jié)果未見細(xì)菌.

2.4.2 正向間接血凝試驗 CSF正向間接血凝抗原試驗檢驗結(jié)果顯示,檢測的10份血清中有8份抗體效價均在1：16以下,沒有達(dá)到有效的免疫保護(hù)水平,為免疫不合格,有2份在1：16以上,為免疫合格,即豬瘟感染陽性率為80%.

2.4.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗 使用華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物病理實驗室提供的ELISA試劑盒檢測PRRS,結(jié)果表明,檢測的10份血清中有2份為陰性,2份可疑,6份陽性,即藍(lán)耳病的感染陽性率至少為60%,該場藍(lán)耳病的存在非常嚴(yán)重.

2.5 治療效果

5d以后病情得到了穩(wěn)定,整個豬群疫情得到了控制,所采取的3種不同治療措施其結(jié)果如表1所示.

表1 CSF和PRRS混合感染3種不同治療方法的治療結(jié)果

從表1可以看出,3種治療方法中,自家苗治療效果要明顯好于抗豬瘟血清和大劑量免疫接種疫苗這2種方法,統(tǒng)計分析結(jié)果表明,自家苗與其它2種方法相比治療效果差異顯著（P＜0.05）,而其中死亡原因有可能是藥物本身的因素,也有可能是豬體抵抗力或應(yīng)激因素存在,故有條件的情況下最好還是采用自家苗療法.

3 討論

通過以上流行病學(xué)調(diào)查,臨床表現(xiàn),病理剖檢作出初步診斷,然后經(jīng)實驗室檢查最后確診為CSF與PRRS混合感染.因目前豬病病情嚴(yán)重,且基本上都是混合感染,癥狀非典型化,只通過流行病學(xué)和臨床觀察不能確診,必須借助實驗室快速、準(zhǔn)確的檢測手段才能確定病因,為臨床用藥提供正確的指導(dǎo)方向.

從實驗檢測結(jié)果看,部分豬瘟抗體水平仍能達(dá)到合格,這可能是由于機體處在病毒感染初期或者末期,機體的免疫系統(tǒng)和功能沒有受到損害或者已恢復(fù).盡管這時PRRS抗體大部分為陽性,但是體內(nèi)的病毒含量較少,可能已經(jīng)不會對機體的免疫系統(tǒng)和功能造成損害,因而不會對豬瘟的免疫應(yīng)答產(chǎn)生明顯的影響,這樣豬瘟的抗體水平就有可能達(dá)到1：16及以上,豬群在感染PRRSV嚴(yán)重時,免疫豬瘟的效果很不理想,因此,在臨床上處理豬瘟和PRRSV混合感染時,緊急預(yù)防需要加大免疫劑量,加強免疫才能夠產(chǎn)生1：16以上水平的抗體[3],對于藍(lán)耳病尚無有效的治療措施,主要靠綜合防制來控制該病的發(fā)生和傳播,在PRRS顯示陽性的豬場,使用弱毒苗時,盡量接種同源疫苗,病情嚴(yán)重時制備自家滅活苗,效果較好[4],故我們在采取的3種治療方法中以自家苗治療效果顯示最好.

對于目前全國豬病嚴(yán)重的情況,尤其是由于PRRS的存在,使機體抵抗力下降,引起免疫抑制,易繼發(fā)感染豬瘟和細(xì)菌性疾病,因此,應(yīng)杜絕濫用抗生素,避免長期使用有免疫抑制性的藥物（如地塞米松等糖皮質(zhì)激素類藥物）[5],同時,提高豬群的營養(yǎng)水平,避免飼喂霉敗玉米,增強豬群的免疫功能.針對本豬場還應(yīng)改進(jìn)免疫程序,使得免疫更科學(xué),更合理.對于種公豬和母豬按照相同的免疫日齡加大免疫劑量至8頭份/頭,仔豬在65日齡左右再加強1次免疫,2次免疫劑量均加大至4頭份/頭（以上所用均為細(xì)胞苗）,其他疫苗正常免疫,所用疫苗質(zhì)量必須穩(wěn)定可靠.藍(lán)耳病弱毒苗應(yīng)在豬瘟免疫2周后進(jìn)行,否則會影響豬瘟疫苗的使用效果,為了提高PRRS和CSF抗體水平,在注苗前幾天可使用免疫增強劑如黃芪多糖等,防豬瘟苗也可同時使用低劑量（1/4～1/3驅(qū)蟲量）左旋咪唑驅(qū)蟲[6].

由于PRRSV在肺巨噬細(xì)胞中大量復(fù)制,它攻擊豬體的免疫系統(tǒng),導(dǎo)致機體免疫功能降低,引起豬體免疫抑制,使免疫豬抗體水平得不到應(yīng)有的上升.故該場雖免疫豬瘟但仍抵抗不了外界CSF強毒的侵襲.因此采取加強飼養(yǎng)管理,嚴(yán)格消毒,同時做好CSF和PRRS的抗體檢測工作,以提高豬群免疫時機的準(zhǔn)確性和群體的高度及整齊度.

4 小結(jié)

對該豬場的發(fā)病情況通過常規(guī)流行病學(xué)調(diào)查、臨床表現(xiàn)、病理剖檢與實驗室相結(jié)合的辦法作出了快速準(zhǔn)確的診斷,又采取了相應(yīng)的綜合治療措施,從而使該場的病情很快得到了控制,并取得較好的治療效果.但作為獸醫(yī)工作者或豬場的管理工作人員,最重要的就是做好平時的飼養(yǎng)管理、環(huán)境衛(wèi)生、免疫接種、預(yù)防保健等工作，不能在豬發(fā)病時再以治病、治好病為工作重心,否則將會給養(yǎng)殖戶帶來很大的經(jīng)濟(jì)損失.

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[2]陳志明,周艷平,汪有益.豬無名高熱綜合征的防治[J].中獸醫(yī)學(xué)雜志,2007（2）：31-33.

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[5]陳杖榴.獸醫(yī)藥理學(xué)[M].第二版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社,2001.

[6]孫寶全.哺乳與保育仔豬豬藍(lán)耳病豬瘟混合感染的診治[J].豬場獸醫(yī),2006,1（1）：48.