不同植物油脂對(duì)體外培養(yǎng)條件下培養(yǎng)液酶活及微生物活力的影響

王 曙 王夢(mèng)芝* 盧占軍 董淑紅 張 鑫 王洪榮

(1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州 225009;2.贛南師范學(xué)院，贛州 341000)

不同植物油脂對(duì)體外培養(yǎng)條件下培養(yǎng)液酶活及微生物活力的影響

王 曙1王夢(mèng)芝1*盧占軍2董淑紅1張 鑫1王洪榮1

(1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州 225009;2.贛南師范學(xué)院，贛州 341000)

本文旨在研究不同飽和程度的植物油脂對(duì)體外培養(yǎng)條件下培養(yǎng)液酶活及微生物活力的影響。試驗(yàn)以3頭裝有瘤胃瘺管的山羊提供瘤胃液，采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，對(duì)照組不加油脂，試驗(yàn)組分別添加花生油、菜籽油、玉米油和豆油進(jìn)行體外培養(yǎng)。結(jié)果表明:乳酸脫氫酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶3種酶的活性都以菜籽油組最高，豆油組、玉米油組、花生油組依次降低，除花生油組外，其他試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，且試驗(yàn)組間存在顯著差異(P＜0.05)?？偯摎涿敢远褂徒M最高，顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，并依次顯著高于玉米油組、花生油組和菜籽油組(P＜0.05)。此外，油脂組原蟲(chóng)DNA、細(xì)菌DNA、微生物DNA、原蟲(chóng)/細(xì)菌區(qū)系比例的均值與對(duì)照組，以及試驗(yàn)組間差異均不顯著(P＞0.05)，但隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)其動(dòng)態(tài)變化模式不盡相同。微生物DNA在各時(shí)間點(diǎn)都以豆油組與玉米油組的較高;而原蟲(chóng)/細(xì)菌比例則以豆油組和玉米油組較低。綜上所述，飽和程度不同的油脂對(duì)體外培養(yǎng)瘤胃微生物區(qū)系及其微生物細(xì)胞活力影響不同，其中以豆油促進(jìn)微生物活力的效應(yīng)最佳，玉米油較好。

油脂;瘤胃微生物;轉(zhuǎn)氨酶;脫氫酶;體外

油脂作為能量飼料，對(duì)畜禽生產(chǎn)至關(guān)重要。但有報(bào)道認(rèn)為，不飽和的油脂使用超過(guò)一定的量時(shí)，其降解產(chǎn)生的游離脂肪酸的不飽和鍵將會(huì)毒害瘤胃原蟲(chóng)和部分細(xì)菌，減少微生物的群體量并可能改變其群體結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響正常的微生物代謝與瘤胃發(fā)酵［1-2］。若能夠借助油脂的這種負(fù)面效應(yīng)，科學(xué)使用油脂，則可能達(dá)到在一定程度上抑制原蟲(chóng)群體量和其對(duì)細(xì)菌的吞噬力，進(jìn)而增加細(xì)菌量、降低原蟲(chóng)與細(xì)菌區(qū)系比例、提高微生物生物總量，促進(jìn)瘤胃發(fā)酵的效果。研究表明，各區(qū)系微生物(細(xì)菌、原蟲(chóng)、真菌和甲烷菌)因各自特點(diǎn)而對(duì)不飽和油脂的響應(yīng)也不盡一致，如沒(méi)有體壁的原蟲(chóng)對(duì)油脂較其他微生物為敏感［1］，本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)微生物微循環(huán)的研究也發(fā)現(xiàn)適量比例、且適當(dāng)結(jié)構(gòu)的油脂能夠抑制原蟲(chóng)吞噬細(xì)菌的微生物再循環(huán)、增加了細(xì)菌生物量，對(duì)原蟲(chóng)和細(xì)菌區(qū)系有一定的控調(diào)效應(yīng)［3］。因此，利用廣泛易得、經(jīng)濟(jì)實(shí)用的油脂能量飼料作為瘤胃調(diào)控劑，增強(qiáng)瘤胃內(nèi)酶和微生物活性、促進(jìn)發(fā)酵，而最終實(shí)現(xiàn)飼料碳素、氮素的利用效率和宿主動(dòng)物的生產(chǎn)力是可行而又實(shí)踐意義的。關(guān)于油脂的研究多以影響瘤胃的微生物、發(fā)酵、甲烷產(chǎn)量等為主［4-6］，迄今尚未見(jiàn)關(guān)于影響微生物轉(zhuǎn)氨酶、脫氫酶等細(xì)胞活力方面的研究報(bào)道。鑒于此，本試驗(yàn)擬選用4種植物油脂分別進(jìn)行體外培養(yǎng)，測(cè)定體系中轉(zhuǎn)氨酶、脫氫酶等的活性，以研究飽和程度不同的油脂對(duì)微生物細(xì)胞活力影響的規(guī)律和機(jī)制，為反芻動(dòng)物瘤胃微生態(tài)調(diào)控技術(shù)的研究和實(shí)際生產(chǎn)中油脂的使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理

在揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)牧場(chǎng)選擇3只1.5歲并裝有瘤胃瘺管的徐淮白山羊，平均體重為(29.7±0.14)kg，用于采集瘤胃液。試驗(yàn)山羊分隔單舍，以玉米、豆粕和羊草為常規(guī)飼糧，于07:00和19:00分2次飼喂，自由飲水。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與培養(yǎng)底物

試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，共分5組，每組3重復(fù)。對(duì)照組不加油脂、試驗(yàn)組分別為花生油組、菜籽油組、玉米油組和豆油組。底物組成與油脂碘價(jià)見(jiàn)表1，棕櫚酸鈣為本實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)。

表1 底物組成與油脂碘價(jià)Table 1 Composition of substrates and iodine values of oil %

1.3 體外培養(yǎng)與取樣設(shè)計(jì)

參考Menke等［7］的方法。配制好培養(yǎng)液(人工唾液鹽∶瘤胃液 =2∶1)，通入 CO2，39℃水浴預(yù)熱。按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)準(zhǔn)確稱取2.0 g底物置于培養(yǎng)瓶中，分別加入150 m L培養(yǎng)液。通入CO2，39℃恒溫水浴震蕩培養(yǎng)。

分別在培養(yǎng)后 0、4、8、12、16、24 h 取樣，每次取約15 m L培養(yǎng)液，分裝于3支離心管，其中1支立即離心并取上清液用于測(cè)定谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶的酶活;1支立即離心并用于測(cè)定總脫氫酶酶活;1只立即于-20℃冷凍保存，待分離微生物與微生物DNA的測(cè)定。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶及乳酸脫氫酶測(cè)定

各個(gè)時(shí)點(diǎn)取樣后立即7 000 r/mim離心15 min離心，并取上清液送江蘇省蘇北人民醫(yī)院，采用全生化分析儀測(cè)定。

1.4.2 總脫氫酶活性測(cè)定

參考Humeyan等［8］的方法，并略有改進(jìn)。取100目尼龍布過(guò)濾的新鮮培養(yǎng)液2 m L于試管中，加入0.2 m L 1.5%的氯化三苯四氮唑(TTC)反應(yīng)，而對(duì)照管先加入5 m L異丙醇抑制酶反應(yīng)。在厭氧條件下恒溫水浴(38～39℃)10 m in。試驗(yàn)組加入5 m L異丙醇終止反應(yīng)后，以4 000 r/m im離心10 min。上清液稀釋15倍，于分光光度計(jì)在485 nm處比色。酶活單位定義為在38.5℃、pH 6.8條件下，每分鐘引起測(cè)定液吸光度上升0.1的酶量為1個(gè)酶活單位。

酶活單位(U/m L)=(樣品A485 nm/m in-對(duì)照A485 nm/m in)×15。

1.4.3 微生物分離與其DNA的測(cè)定

依據(jù)差速離心原理分離微生物，具體步驟為:1)原蟲(chóng):取瘤胃液加等體積生理鹽水置于恒溫(39℃)水浴鍋中震蕩(125 r/m in)水浴孵育60 m in，并輔以攪拌，再經(jīng)4層紗布過(guò)濾，濾液離心(400 r/m im離心10 m in)，收集沉淀為原蟲(chóng)，用生理鹽水洗滌2次后用生理鹽水懸浮，-20℃貯存待測(cè)。2)細(xì)菌:收集上述1)中離心后的上清液，再高速離心(15 000 r/m im離心15 m in)，收集沉淀為細(xì)菌，其余處理同1)中所述。

微生物DNA測(cè)定原理:微生物體內(nèi)DNA所占比例比RNA或蛋白質(zhì)等成分更為恒定，利用微生物的DNA量來(lái)代表微生物的總量更加科學(xué)。DNA二苯胺顯色后其595 nm處的吸光度與樣品中含量成線性關(guān)系，線性范圍為40～400μg/m L，據(jù)此將待測(cè)樣品釋至線性范圍內(nèi)測(cè)定其光密度值、再據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可查得樣品濃度。微生物DNA測(cè)定采用二苯胺顯色法并參照趙亞華［9］的步驟。制備小牛胸腺DNA鈉鹽(上海生工公司)標(biāo)準(zhǔn)溶液，制作以DNA量為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。以樣品的吸光度值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相對(duì)應(yīng)DNA含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

Excel整理數(shù)據(jù)和作圖，用SPSS v16.0軟件中comparemean的One-way-ANOVA過(guò)程進(jìn)行方差分析和Tukey多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 轉(zhuǎn)氨酶及脫氫酶隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化

由表2和表3可見(jiàn)，培養(yǎng)液谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶等隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)大體上都不斷提高，其中以菜籽油組變化幅度最大、豆油組次之，并且該2組持續(xù)在遠(yuǎn)高于對(duì)照組和其他油脂組的水平上變化;而玉米油組與花生油組與對(duì)照組接近，變化幅度不大。各個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較，其中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶隨時(shí)間變化的幅度較大，同一組的隨時(shí)間變化有顯著變化(P＜0.05);而乳酸脫氫酶隨時(shí)間變化的幅度不大，同一組的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)間沒(méi)有顯著差異(P＞0.05)。

由表3可見(jiàn)，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，各組培養(yǎng)液總脫氫酶的活性有顯著增長(zhǎng)的趨勢(shì)(P＜0.05)，除玉米組外，都以16 h的該酶活性最高，而后又略有下降。各組間變化不盡一致，其中以豆油組增長(zhǎng)幅度最大，其次依次為玉米油組、花生油組、對(duì)照組和菜籽油組，總體看來(lái)僅菜籽油組的總脫氫酶活性在培養(yǎng)過(guò)程中持續(xù)低于對(duì)照組。

表2 培養(yǎng)液中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性變化Table 2 The activities of GOT and GPT in culture solution IU/L

表3 培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶和總脫氫酶的活性變化Table 3 The activities of LDH and total dehydrogenase in culture solution

2.2 油脂對(duì)轉(zhuǎn)氨酶、脫氫酶均值的影響

由表4可見(jiàn)，各組間培養(yǎng)液乳酸脫氫酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶在各組間有顯著差異(P＜0.05)。3種酶都以菜籽油組最高、其次依次為豆油組、玉米油組、花生油組，除花生油組與對(duì)照組差異不顯著外(P＞0.05)，其他油脂組都顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

總脫氫酶組間差異顯著(P＜0.05)。其中總脫氫酶以豆油組最高，顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)、玉米油組次之、花生油組再次之，菜籽油組最低，在數(shù)值上低于對(duì)照組，但差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 油脂對(duì)培養(yǎng)液原蟲(chóng)、細(xì)菌區(qū)系的影響

由表4還可知，培養(yǎng)液原蟲(chóng)、細(xì)菌、微生物DNA，以及原蟲(chóng)/細(xì)菌區(qū)系比例的均值與對(duì)照組差異不顯著(P＞0.05)，添加油脂的試驗(yàn)組間也沒(méi)有顯著差異(P＞0.05);但本試驗(yàn)中脫氫酶、轉(zhuǎn)氨酶等動(dòng)態(tài)指標(biāo)在時(shí)間點(diǎn)間基本均有顯著變化趨勢(shì)(表2、3)，而且同時(shí)進(jìn)行的各時(shí)間點(diǎn)微生物DNA及原蟲(chóng)/細(xì)菌區(qū)系比例測(cè)定也表明，各組的微生物DNA、原蟲(chóng)/細(xì)菌比例(圖1、2)隨時(shí)間都有顯著或極顯著的變化(P＜0.05、P＜0.01)。這說(shuō)明了微生物在培養(yǎng)過(guò)程中其區(qū)系、活力等都發(fā)生了變化，而要考察體系中微生物的客觀情況不僅要考察其均值或終點(diǎn)值，還要考察其動(dòng)態(tài)指標(biāo);同時(shí)也表明，在本試驗(yàn)的各組培養(yǎng)過(guò)程中微生物的量與活力雖然有較大的動(dòng)態(tài)變化，但微生物的均產(chǎn)量受到的影響不大?？赏ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)微生物的活力改變其發(fā)酵狀態(tài)，而不影響微生物蛋白產(chǎn)量。

3 討論

3.1 油脂對(duì)轉(zhuǎn)氨酶和乳酸脫氫酶活性的影響

谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和乳酸脫氫酶等一般在胞內(nèi)的濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于胞外，但若細(xì)胞受損、胞膜破壞將導(dǎo)致胞外的濃度上升。在本研究中，各組培養(yǎng)液乳酸脫氫酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶等隨時(shí)間培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)皆不斷提高，其原因可能即是在培養(yǎng)過(guò)程中隨時(shí)間的延長(zhǎng)微生物與代謝物的積累而微生物細(xì)胞自溶導(dǎo)致細(xì)胞壁、細(xì)胞膜的破壞而釋放上述的酶所致［10-11］。其中以菜籽油組的變化幅度最大、豆油組次之，玉米油組與花生油組與對(duì)照組接近，變化幅度不大。可能是由于植物油脂的不飽和脂肪酸對(duì)原蟲(chóng)或細(xì)菌具有一定的負(fù)效應(yīng)，而且不飽和程度越高其負(fù)效應(yīng)越大所致［2］。本試驗(yàn)也表明碘價(jià)最高的豆油組其培養(yǎng)液轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶的活性較碘價(jià)較低的玉米油組、花生油組高，其微生物細(xì)胞的破損更為嚴(yán)重。

表4 4種油脂對(duì)培養(yǎng)液酶活及微生物區(qū)系的影響Table 4 Effects of the 4 kinds of oils on enzyme activity and m icroflora in culture solution

圖1 油脂對(duì)培養(yǎng)液微生物DNA的影響Fig.1 Effects of oils on m icrobial DNA in culture solution

圖2 油脂對(duì)培養(yǎng)液原蟲(chóng)/細(xì)菌區(qū)系比例的影響Fig.2 Effects of oils on protozoa to bacteria ratio in calture solution

其中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶隨時(shí)間變化的幅度較大，同一組的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)間有顯著變化;而乳酸脫氫酶隨時(shí)間變化的幅度不大，同一組的各個(gè)時(shí)間點(diǎn)間沒(méi)有顯著差異。其原因可能是谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶2種酶為微生物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖中代謝過(guò)程中必不可少的“催化劑”，參與氨基酸的分解和合成［12］，在正常代謝時(shí)的細(xì)胞中含量較高。當(dāng)微生物細(xì)胞有少量的破損時(shí)則培養(yǎng)液轉(zhuǎn)氨酶活性急速上升，臨床研究發(fā)現(xiàn)，有1%的肝細(xì)胞破損可使血清中轉(zhuǎn)氨酶增加1倍以上。而本試驗(yàn)中該酶的酶活菜籽油組、豆油組、玉米油組等在24 h時(shí)已分別為對(duì)照組的10、6、3倍左右，說(shuō)明添加油脂對(duì)微生物細(xì)胞的損傷程度增加，但具體的劑效關(guān)系有待進(jìn)一步研究。相比之下，乳酸脫氫酶在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)、或組間沒(méi)有顯著的變化，豆油組僅為對(duì)照組的1.2倍，遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于2種轉(zhuǎn)氨酶的變化幅度，其原因可能是乳酸的代謝并非瘤胃微生物正常發(fā)酵的途徑，只有在大量淀粉或可溶性糖底物存在時(shí)才誘發(fā)牛鏈球菌的乳酸脫氫酶活性，以乳酸代謝為主［13-15］，因此，本體系中并未導(dǎo)致該酶類似轉(zhuǎn)氨酶的急劇升高。

3.2 油脂對(duì)總脫氫酶及其動(dòng)態(tài)變化的影響

在瘤胃微生物中發(fā)現(xiàn)的總脫氫酶主要以煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinam ide adenine dinucleotide，NAD+)和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinam ide adenine dinucleotide phosphate，NADP+)為輔基的谷氨酸脫氫酶(GDH)和乳酸脫氫酶，其中NAD+-GDH很可能是微生物利用氨合成蛋白質(zhì)最重要的酶。因此，總脫氫酶的活性能夠直接反映微生物發(fā)酵時(shí)脫氫酶?jìng)鬟f氫的能力，即整體微生物的活力水平［16］。本研究發(fā)現(xiàn)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，各組總脫氫酶的活性有顯著增長(zhǎng)的趨勢(shì)，基本在16 h達(dá)到最高，之后又有所下降，這與微生物的生長(zhǎng)繁殖規(guī)律相一致，即微生物的培養(yǎng)過(guò)程中指數(shù)生長(zhǎng)期后會(huì)進(jìn)入穩(wěn)定期、衰亡期而使微生物活力下降所致［17-18］。

本試驗(yàn)中豆油組和玉米油組總脫氫酶極顯著或顯著高于對(duì)照組，2個(gè)油脂試驗(yàn)組間也有顯著差異，以豆油組顯著高于玉米油組。表明一定比例的不飽和油脂有一定的提高培養(yǎng)液微生物活性的效應(yīng)。這可能是由于不飽和的油脂降解后其游離脂肪酸的不飽和鍵會(huì)抑制了原蟲(chóng)［6］，使其群體生物量減少，進(jìn)而減少其對(duì)細(xì)菌的吞噬，而增加細(xì)菌的數(shù)量，通過(guò)區(qū)系生物量的交替消長(zhǎng)，而最終可能改變了微生物的生物總量及微生物總的活力所致［19-20］。

在本試驗(yàn)添加4%水平油脂的基礎(chǔ)上，豆油組和玉米油組顯著高于對(duì)照組，表明不飽和程度更高的玉米油和豆油對(duì)通過(guò)限制原蟲(chóng)而提高細(xì)菌具有積極的意義;但花生油組與對(duì)照組不顯著，表明其不飽和程度不高在4%的水平添加并未起到統(tǒng)計(jì)上的積極意義。而菜籽油組的總脫氫酶活性在培養(yǎng)過(guò)程中持續(xù)低于對(duì)照組，即該組對(duì)原蟲(chóng)、細(xì)菌的負(fù)作用大于通過(guò)抑制原蟲(chóng)提高細(xì)菌的正向作用，表明該添加水平致使微生物細(xì)胞的損害程度較大，其中可能也包括較大量的細(xì)菌細(xì)胞，而對(duì)瘤胃微生物的發(fā)酵起到了負(fù)面的抑制作用。由于本試驗(yàn)實(shí)測(cè)了所使用的各油脂的碘價(jià)，表明菜籽油并非不飽和程度最高，但其負(fù)面效應(yīng)最大的原因是否與菜籽油的芥酸［21］與培養(yǎng)液中氨的持續(xù)共存，再經(jīng)由微生物復(fù)雜的作用，而形成有毒性的三聚氰酸、芥酸酰胺等物質(zhì)有關(guān)，其具體原因有待進(jìn)一步的研究。

由臨床研究可知，谷草轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶≥1時(shí)，常說(shuō)明肝等組織細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷。本研究該比值上小于1，而且表征微生物總活力的總脫氫酶活性除菜籽油組都高于對(duì)照組，因此推測(cè)認(rèn)為，本研究添加4%的油脂的油脂除菜籽油外，尚未使微生物細(xì)胞有嚴(yán)重的損傷。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，油脂對(duì)體外培養(yǎng)瘤胃微生物細(xì)胞活力有顯著的影響，其效應(yīng)有隨著油脂不飽和程度的加大而加大的趨勢(shì)，其中以豆油的促進(jìn)微生物活力效應(yīng)最好，玉米油次之。

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*Corresponding author，lecturer，E-mail:mengzhiwang@yahoo.cn

(編輯 武海龍)

Effects of Different Plant Oils on the Enzyme Activity and Microbial Activityin vitro

WANG Shu1WANG Mengzhi1*LU Zhanjun2DONG Shuhong1ZHANG Xin1WANG Hongrong1
(1.College of Animal Science and Technology，Yangzhou University，Yangzhou225009，China;2.Gannan Normal College，Ganzhou341000，China)

The objectives of this paperwere to determ ine the effects of different plantoils on the enzyme activity and m icrobial activityin vitro.Three goats with permanent cannulas were used in a simple factor design.The control group was supplemented with no oil and the experimental groups were supplemented with peanut oil，rapeseed oil，corn oil，and soybean oil，respectively.The results showed that the activity of lactate dehydrogenase(LDH)，glutam ic oxaloacetic transam inase(GOT)，and glutam ic-pyruvic transam inase(GPT)were highest in rapeseed oil group and that in soybean oil group，corn oil group and peanut oil group fell in turn，the activity of LDH，GOT and GPT in the experimental groups were significant higher than that in the control group except for peanutoil group(P＜0.05)and therewere significantly differences among the experimental groups(P＜0.05).The activity of total dehydrogenase in soybean oil group was the highest and significantly higher than that of the control group(P＜0.05)and that in corn oil group，peanut oil group and rapeseed oil group fell in turn.Additionally，no significant difference was observed in the protozoal DNA，bacterial DNA，m icrobial DNA，and protozoa to bacteria ratio among groups(P＞0.05).However，m icrobial DNA was generally higher in soybean oil group and corn oil group at all sampling time points，and the changing trend along with time differed from each other.It was further observed that，protozoa to bacteria ratios weremuch lower in soybean and corn oil.In conclusion，different oils had different effects on m icroflora and activity of rum inalm icroorganismsin vitro，while soybean oil and corn oil showed much better effects on promoting m icrobial activity than the others.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2011，23(8):1309-1316］

oil;rumen m icrobe;transam inase;dehydrogenase;in vitro

S816.43

A

1006-267X(2011)08-1309-08

10.3969/j.issn.1006-267x.2011.08.009

2011-02-25

國(guó)家自然科學(xué)基金(31072051);揚(yáng)州大學(xué)創(chuàng)新培育基金(2010CXJ054)

王 曙(1987—)，男，江蘇宿遷人，碩士研究生，從事反芻動(dòng)物瘤胃微生態(tài)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控的研究。E-mail:yzuwangshu@163.com

*通訊作者:王夢(mèng)芝，博士，講師，E-mail:mengzhiwang@yahoo.cn