鮮藥金龍膠囊抗病毒作用的研究進(jìn)展

中國(guó)癌癥基金會(huì)鮮藥學(xué)術(shù)委員會(huì)（100039） 李建生

病毒是一類不具有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，但具有遺傳、復(fù)制等生命特征的微生物。病毒具有嚴(yán)重的社會(huì)危害性，既可以導(dǎo)致流行病及艾滋病等疾病的發(fā)生，造成患者死亡，也可以成為某些腫瘤發(fā)生的誘因。因此在鮮藥抗腫瘤研究過(guò)程中，筆者等逐漸將目光轉(zhuǎn)向了病毒，通過(guò)對(duì)抗病毒的研究，探索現(xiàn)代鮮藥金龍膠囊在抗腫瘤過(guò)程中的深層次作用，為鮮藥的進(jìn)一步研究開(kāi)創(chuàng)新的里程。

1 金龍膠囊抗艾滋病毒（HIV）作用研究

HIV是一種變異性很強(qiáng)的病毒，各基因的變異程度不同，其中env基因變異率最高。HIV發(fā)生變異的主要原因包括逆轉(zhuǎn)錄酶無(wú)校正功能導(dǎo)致的隨機(jī)變異；宿主的免疫選擇壓力；不同病毒DNA之ARV、病毒DNA與宿主DNA之間的基因重組；以及藥物選擇壓力等，其中不規(guī)范的抗病毒治療是導(dǎo)致耐藥性產(chǎn)生的重要原因。根據(jù)2004年WHO“艾滋病臨床分期及抗病毒治療指征”提出，無(wú)癥狀HIV感染者不適合抗病毒療法，且臨床發(fā)現(xiàn)提前使用抗病毒療法會(huì)使HIV感染者出現(xiàn)以下情況：①生存質(zhì)量下降；②較早產(chǎn)生耐藥，使未來(lái)抗病毒治療的選擇受到限制；③經(jīng)濟(jì)上無(wú)法承受；④由于HAART的副作用，使感染者間斷用藥，從而誘發(fā)HIV病毒變異，對(duì)最終研制疫苗不利?；诖祟惉F(xiàn)象，針對(duì)于無(wú)癥狀期HIV感染者，目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)公認(rèn)的有效治療措施。對(duì)尚未達(dá)到HAART療法應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)的廣大HIV感染者，目前只能任其病情逐漸加重，致感染者CD4+細(xì)胞計(jì)數(shù)下降至可以使用HAART療法的指標(biāo)時(shí)，才能用藥治療。這種做法不利于疾病的早期控制，有悖于中醫(yī)學(xué)“治未病”的學(xué)術(shù)思想。

自80年代起，我國(guó)學(xué)者即開(kāi)始在坦桑尼亞、贊比亞，以及我國(guó)河南、云南等艾滋病高發(fā)區(qū)運(yùn)用中醫(yī)藥進(jìn)行探索性治療。20多年來(lái)中醫(yī)藥防治艾滋病的醫(yī)療實(shí)踐，特別是近3年來(lái)國(guó)家中醫(yī)藥管理局組織實(shí)施的“中醫(yī)藥治療艾滋病試點(diǎn)項(xiàng)目”表明，中醫(yī)藥可以改善艾滋病患者臨床癥狀和體征，提高患者生存質(zhì)量，穩(wěn)定提高患者免疫功能，減少機(jī)會(huì)性感染，不同程度地恢復(fù)勞動(dòng)能力，對(duì)無(wú)癥狀期HIV感染者有延緩進(jìn)入艾滋病期的趨勢(shì)。

鮮中藥制劑金龍膠囊系國(guó)家正式批準(zhǔn)的中成藥（Z10980041），它由鮮守宮、鮮金錢白花蛇和鮮蘄蛇組成。鮮守宮味咸性寒，為君藥，具有通經(jīng)達(dá)絡(luò)、降痰解毒、破瘀散結(jié)、補(bǔ)肺腎益精血（陰）之功效。鮮金錢白花蛇味咸性溫，為臣藥，具有搜風(fēng)通絡(luò)、活血止痛的作用，輔助君藥可加強(qiáng)破瘀散結(jié)、解郁通絡(luò)。鮮蘄蛇味咸性溫，為佐使藥，其性善走竄、內(nèi)走臟腑、外切皮毛，具有搜風(fēng)定痛、通經(jīng)達(dá)絡(luò)的作用。全方配伍精當(dāng)、藥性平和，用二蛇之溫制守宮之寒而不滯，用守宮之寒制二蛇之溫而不燥，用于治療腫瘤實(shí)證。金龍膠囊上市十余年來(lái)，大量基礎(chǔ)和臨床研究揭示：①金龍膠囊能從整體水平、細(xì)胞水平和分子水平調(diào)節(jié)機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能；② 金龍膠囊具有解熱、鎮(zhèn)痛作用。此外，2003年與中國(guó)中醫(yī)研究院開(kāi)展的20例HIV感染者臨床觀察的結(jié)果顯示：①20 例HIV 感染者/ AIDS 患者治療后臨床癥狀有所改善，以乏力、腹瀉者為顯著；②患者的免疫功能具有一定程度的改善：小劑量組CD4+計(jì)數(shù)增加9例，減少6例；大劑量組CD4+計(jì)數(shù)增加1例，下降4 例。小劑量組：治療前186.40±110.92/mm3，治療后300.40±164.57/mm3,增加114.33±154.76/mm3。大劑量組：治療前257.17 ±127.57/mm3，治療后242.37±161.26/mm3，減少14.80 ±120.40/mm3。③金龍膠囊對(duì)病毒載量沒(méi)有明顯的抑制作用：小劑量組12 例增加，3 例下降；其中≥0.5log者，1例下降，7例增加。大劑量組：下降3例，增加2 例；其中≥0.5log者2 例下降，1例增加。小劑量組不如大劑量組，前者1/8下降，后者則為2/3下降，其余均為升降＜0.5log。④在治療3個(gè)月中，未發(fā)現(xiàn)藥物副作用，血常規(guī)及肝腎功能均正常，試驗(yàn)治療過(guò)程中也未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥。

抗AIDS 藥物大部分是根據(jù)AIDS 發(fā)病機(jī)制，尋找切斷某一環(huán)節(jié)制備而成；也有的是根據(jù)抗癌藥擴(kuò)大適應(yīng)癥而成，如疊氮胸苷（AZT）就是根據(jù)其屬于抗貓白血病藥發(fā)展起來(lái)的。金龍膠囊現(xiàn)為獲得批準(zhǔn)文號(hào)的抗癌有效中成藥，擴(kuò)大用于治療AIDS，初步觀察是有效的，且有一定量效關(guān)系，用小劑量能扶正，大劑量則祛邪；小劑量對(duì)提高免疫作用較好，大劑量對(duì)抑制病毒載量稍好于小劑量，但效果并不明顯。目前，AIDS治療的研究已取得很大成績(jī)，從過(guò)去著眼于HIV病毒方面，到最近把研究重點(diǎn)轉(zhuǎn)向免疫系統(tǒng)[1]。國(guó)內(nèi)不少研究工作者也認(rèn)為：中醫(yī)的優(yōu)勢(shì)在整體的免疫調(diào)節(jié)。因此，中醫(yī)抗AIDS/ HIV 藥固然可以尋找，但是研究重點(diǎn)應(yīng)該定位在免疫上[2]。

國(guó)內(nèi)中藥和免疫功能關(guān)系的研究已有相當(dāng)深度，例如黃芪能誘生內(nèi)生性干擾素，黃芪多糖已被證明能促進(jìn)白細(xì)胞介素-2的分泌。甘草多糖可促進(jìn)B細(xì)胞合成，提高血清IgM含量，誘生干擾素。甘草甜素能抑制HIV，增強(qiáng)免疫功能等。動(dòng)物藥如地龍可增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，提高T4、T8等淋巴細(xì)胞亞群；斑蟊素能抑制癌細(xì)胞蛋白質(zhì)合成[3]。金龍膠囊既能提高癌癥病人的免疫功能，也能提高艾滋病病人的免疫功能，且均有雙向調(diào)節(jié)作用。金龍膠囊是動(dòng)物性成分，無(wú)任何副作用，可能是事先經(jīng)低溫及現(xiàn)代生化技術(shù)處理之故，其治療艾滋病的作用機(jī)理尚不明確，且例數(shù)過(guò)少，有待繼續(xù)探索和積累數(shù)據(jù)。

2 抗乙肝病毒（HBV）作用研究

乙型肝炎病毒簡(jiǎn)稱乙肝病毒。是一種DNA病毒，屬于嗜肝DNA病毒科（hepadnavividae）。根據(jù)目前所知，HBV就只對(duì)人和猩猩有易感性，引發(fā)乙型病毒性肝炎疾病。

我國(guó)的乙肝病毒感染率約60%～70%；乙肝表面抗原攜帶率約占總?cè)丝诘?.18%，以此計(jì)算，全國(guó)約有9300萬(wàn)人攜帶乙肝病毒，其中乙肝患者大約有3000萬(wàn)。乙肝病毒的活動(dòng)受到機(jī)體免疫系統(tǒng)的控制，是一個(gè)此消彼長(zhǎng)的過(guò)程。但病毒變異的過(guò)程是非常復(fù)雜的，總的來(lái)說(shuō)，免疫系統(tǒng)漠視病毒的存在，保持免疫耐受狀態(tài)維持免疫平衡；但免疫系統(tǒng)與病毒反復(fù)搏斗的過(guò)程會(huì)造成肝臟損傷。原發(fā)性肝癌是死亡率極高的惡性腫瘤之一，其病因迄今尚未完全明了。據(jù)近年研究結(jié)果顯示，該病與乙肝病毒、丙肝病毒、黃曲霉素等化學(xué)及物理因素有關(guān)，HBV感染是我國(guó)原發(fā)性肝癌的重要病因[4]。我國(guó)約有1.2億HBV攜帶者，其中部分發(fā)展為肝細(xì)胞癌，流行病學(xué)資料顯示我國(guó)的原發(fā)性肝癌患者中89.6%～95%有HBV感染背景。中醫(yī)認(rèn)為HBV為濕熱疫毒之邪，感受HBV之邪為本病的外在病因，據(jù)HBV的致病特點(diǎn)當(dāng)屬中醫(yī)學(xué)所稱“天地之雜氣”，為一種疫毒之邪，具有傳染性，隱伏血分，喜留于肝。研究發(fā)現(xiàn)，絕大部分肝癌和癌旁組織中存在HBV-DNA整合現(xiàn)象，其中HBV-X基因及其編碼產(chǎn)物具有廣泛的反式激活作用，促進(jìn)原癌基因表達(dá)，使抑癌基因突變失活，還有上調(diào)端粒酶活性等作用，使肝細(xì)胞不能正常凋亡而癌細(xì)胞增殖[5]。我國(guó)肝細(xì)胞癌中肝硬化合并率為84.6%，HBV造成肝細(xì)胞損傷、肝臟慢性炎癥，并影響多種細(xì)胞因子分泌，通過(guò)一定機(jī)制啟動(dòng)肝纖維化進(jìn)程或促進(jìn)肝細(xì)胞癌變，其病變機(jī)理與中醫(yī)學(xué)之濕、毒、痰、瘀一致。

HBV相關(guān)性肝癌的形成過(guò)程中，HBV與一些誘發(fā)因素共同作用促進(jìn)了病情的進(jìn)展，如飲酒、情志抑郁、治療不當(dāng)?shù)?。脾為后天之本，既受濕毒所困，又為肝木所乘，不能行其運(yùn)化之職，氣血生化乏源，先天之精氣不得水谷之精氣充養(yǎng)，漸成脾腎精氣虧虛；肝腎乙癸同源，腎中精氣不足，則水不涵木，肝失柔養(yǎng)，以至肝、脾、腎俱傷，臟腑功能失調(diào)。熱毒傷津耗液，且痰瘀亦為正常津血凝聚而成，故正傷中每從脾氣虧虛，發(fā)展為氣陰兩虛，終見(jiàn)肝腎陰精虛損。肝體陰而用陽(yáng)，陰傷則虛火內(nèi)旺，血脈枯燥，津血不行，癌塊增大，氣機(jī)阻滯，形成惡性循環(huán)，正愈傷，邪愈盛。正常肝細(xì)胞的減少、機(jī)體免疫功能的紊亂是癌細(xì)胞異常增殖造成的結(jié)果，也是進(jìn)一步導(dǎo)致病情進(jìn)展的重要原因。中醫(yī)治療原則有養(yǎng)肝化瘀解毒防治HBV相關(guān)性肝癌、化瘀散結(jié)以防癌塊形成、養(yǎng)肝健脾以扶正。

已有的基礎(chǔ)研究成果明確了HBV與肝癌的形成與發(fā)展密切相關(guān)，并揭示了部分病變機(jī)制，為制定有效的防治HBV相關(guān)性肝癌療法奠定了基礎(chǔ)。中醫(yī)藥以其多靶點(diǎn)、多途徑作用的特點(diǎn)在防治HBV相關(guān)性肝癌的臨床實(shí)踐中顯示出較大的優(yōu)勢(shì)，即可以改善肝功能，穩(wěn)定病情，降低癌變發(fā)生率，提高生存質(zhì)量與生存率。近期即將開(kāi)展“金龍膠囊聯(lián)合TACE治療原發(fā)性肝癌對(duì)乙肝病毒活動(dòng)狀態(tài)及肝功能的影響的研究”，相信金龍膠囊會(huì)取得預(yù)期的良好效果。

3 抗人乳頭瘤病毒（HPV）作用研究

HPV（The human papilloma viruses) 是一種伴隨人類很久的雙鏈DNA小病毒，到目前為止已發(fā)現(xiàn)約130余種不同基因類型。HPV感染主要通過(guò)“皮膚-皮膚”、“黏膜-黏膜”接觸傳染，性傳播是其主要的傳播方式。男女均可受到感染，同時(shí)成為病毒攜帶者、傳播者、感染者，人們發(fā)現(xiàn)初次性生活早、性伴侶多、與高危人群性接觸等感染HPV的風(fēng)險(xiǎn)大，男性使用避孕套雖不能完全避免，但可明顯降低感染風(fēng)險(xiǎn)。大多數(shù)HPV感染范圍比較廣，可在女性的宮頸、陰道、外陰及男性的陰囊、包皮、陰莖的皮膚中檢測(cè)HPV病毒。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，最高有40%的有性生活的女性存在亞臨床的HPV感染，年齡超過(guò)30歲者感染率在5%～10%。估計(jì)約50%的婦女在初次性生活后4年內(nèi)發(fā)生HPV感染。母嬰垂直傳播不常見(jiàn)，但也有嬰兒通過(guò)母嬰傳播發(fā)生呼吸道乳頭狀瘤病的情況。高危型HPV感染的半數(shù)生存期為8～10個(gè)月，低危型HPV感染的半數(shù)生存期約為高危性的一半，感染后對(duì)同型HPV病毒有一定的免疫力，少部分對(duì)其他類型有一定程度的免疫保護(hù)。

HPV與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，國(guó)外流行病學(xué)及臨床研究發(fā)現(xiàn)：某些宮頸浸潤(rùn)癌100%可檢出HPV的DNA，以HPV16、18、31、45型最常見(jiàn)；在高級(jí)別的癌前病變（CINⅡ-CINⅢ）HPV的DNA的檢出率在70%～90%，CINⅠ中檢出率在20%～50%，在非典型細(xì)胞ASCUS、AGUS的檢出率接近50%。一般認(rèn)為，從HPV感染到癌前病變數(shù)年甚至10年以上，但最近的研究發(fā)現(xiàn)，這個(gè)時(shí)間可能很短，在5年以內(nèi)，通過(guò)HPV檢測(cè)的篩查可能早期發(fā)現(xiàn)癌前病變。HPV16型危險(xiǎn)最高，在感染后3～5年有40%的女性發(fā)現(xiàn)癌前病變。合并多種類型的HPV較單一類型HPV感染發(fā)生癌前病變的風(fēng)險(xiǎn)更高。

研究發(fā)現(xiàn)高危型HPV感染與宮頸癌前病變、宮頸浸潤(rùn)癌有密切關(guān)系，故預(yù)防HPV感染可能預(yù)防或減少宮頸癌的發(fā)生。采用不含病毒DNA的HPV L1的病毒樣顆粒（僅有可產(chǎn)生抗原作用的蛋白質(zhì)而沒(méi)有可引起基因改變的DNA）作為疫苗，注射后人體可產(chǎn)生抗體，對(duì)同型的HPV病毒有免疫保護(hù)作用。但它只對(duì)未感染者有保護(hù)作用，對(duì)已感染者無(wú)明顯的治療作用。

目前國(guó)外有兩種HPV疫苗，一種為默克公司的“Gardasil”，它是對(duì)HPV16、18、6、11型有效的四價(jià)疫苗；另一種為葛蘭素史克公司的“Cervarix”，它是HPV16、18型二價(jià)疫苗。免疫對(duì)象在國(guó)外一般選擇9～14歲尚未有初次性生活的女孩。國(guó)內(nèi)正在進(jìn)行相關(guān)的研究，還未正式進(jìn)入臨床。另外，對(duì)已感染HPV的患者，使用干擾素、白介素進(jìn)行抗病毒治療，部分人HPV檢測(cè)可轉(zhuǎn)為陰性，但目前關(guān)于中藥干預(yù)治療HPV感染宮頸癌的研究報(bào)道較少。

為了探討金龍膠囊與HPV相關(guān)宮頸癌之間的關(guān)系，筆者進(jìn)行了中藥金龍膠囊對(duì)HPV相關(guān)宮頸癌的治療作用及機(jī)理的初步探討，以轉(zhuǎn)染HPV16E6/E7基因形成的腫瘤細(xì)胞為模型，探討了金龍膠囊對(duì)HPV相關(guān)宮頸癌的治療作用，以提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。結(jié)果顯示，金龍膠囊對(duì)表達(dá)HPV16E6/E7的癌細(xì)胞體內(nèi)生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用，并可上調(diào)腫瘤組織中浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞表達(dá)r-IFN，下調(diào)腫瘤組織中VEGF表達(dá)水平。

4 抗急性呼吸窘迫綜合征（SARS）作用研究

SARS的臨床治療主要是依照衛(wèi)生部頒布的《傳染性非典型肺炎治療方案》，即抗病毒、激素、抗生素、免疫調(diào)節(jié)或支持治療為主的標(biāo)準(zhǔn)救治方案。金龍膠囊由鮮活動(dòng)物經(jīng)特殊方法提取制成，是北京建生藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的我國(guó)第一個(gè)正式批準(zhǔn)使用的鮮活動(dòng)物制劑(國(guó)藥準(zhǔn)字Z10980041)，具有中醫(yī)整體調(diào)節(jié)、扶正蕩邪及中藥“生者尤良”的優(yōu)點(diǎn)[6]。金龍膠囊以守宮、白花蛇等為原料，經(jīng)超低溫破碎及凍融處理，使細(xì)胞內(nèi)各種有效成分充分釋放，并在低溫下迅速進(jìn)行生化技術(shù)處理而制成。其功效為補(bǔ)益氣血，破瘀散結(jié)，解毒通絡(luò)。

金龍膠囊臨床上廣泛用于肺癌、乳腺癌、肝癌、宮頸癌等的治療，具有調(diào)節(jié)免疫力、改善患者生存質(zhì)量、延長(zhǎng)生存期的作用。林顯敢等[7]通過(guò)觀察金龍膠囊輔助化療對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌患者的CD4+/CD8+細(xì)胞活性的影響，證明金龍膠囊能增強(qiáng)晚期非小細(xì)胞肺癌患者的CD4+細(xì)胞免疫水平。上海中醫(yī)藥大學(xué)曙光醫(yī)院、中日友好醫(yī)院、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院、中國(guó)中醫(yī)研究院廣安門醫(yī)院聯(lián)合對(duì)300 例原發(fā)性肝癌患者進(jìn)行了雙盲、隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，結(jié)果證實(shí)金龍膠囊能升高患者CD4+T細(xì)胞數(shù)量，并降低CD8+T細(xì)胞數(shù)量。而SARS的免疫學(xué)特點(diǎn)主要是CD8+T細(xì)胞水平下降，重癥SARS患者的T淋巴細(xì)胞中，CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞都明顯降低[8]。治愈的SARS患者與死亡患者的CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞計(jì)數(shù)也有顯著差異。

本研究將金龍膠囊用于32例SARS患者的輔助治療取得了較好的療效。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，金龍膠囊能明顯提高SARS患者的CD8+T細(xì)胞水平，且與對(duì)照組比較顯示出較好的臨床療效，提示金龍膠囊對(duì)SARS患者的免疫系統(tǒng)有調(diào)節(jié)作用，能夠保護(hù)或重建SARS患者的免疫系統(tǒng)。結(jié)果還提示，金龍膠囊可使Ts細(xì)胞上調(diào)，抑制過(guò)激免疫變態(tài)反應(yīng)，促進(jìn)病變恢復(fù)。從惡性腫瘤及艾滋病的臨床研究中可以觀察到，金龍膠囊使Th細(xì)胞上調(diào)，Ts細(xì)胞下調(diào)，提高患者抗癌免疫力。由此可見(jiàn)，金龍膠囊具有雙向免疫調(diào)節(jié)作用，其調(diào)節(jié)作用在不同免疫病理狀態(tài)下發(fā)生相應(yīng)的調(diào)節(jié)效應(yīng)，而決定性因素取決于機(jī)體內(nèi)在因素，從而最終使機(jī)體恢復(fù)Th/Ts系統(tǒng)平衡。

5 展望

綜上所述，金龍膠囊不僅具有良好的抗癌作用，而且通過(guò)相應(yīng)機(jī)理和臨床觀察的初步探索，發(fā)現(xiàn)其對(duì)病毒也具有一定的抑制作用。金龍膠囊的抗病毒作用可能機(jī)制是金龍膠囊的整體免疫調(diào)節(jié)作用。金龍膠囊抗病毒作用為從免疫角度研究和尋找抗病毒中藥，中藥抗病毒及由病毒引發(fā)的癌癥研究開(kāi)拓了思路。中藥毒副作用小，不易引起耐藥性，且具有多靶點(diǎn)、整體調(diào)節(jié)的作用，是抗病毒制劑研發(fā)的巨大優(yōu)勢(shì)。目前病毒種類越來(lái)越多，變異越來(lái)越快，抗病毒中藥的研究具有廣闊的前景，而金龍膠囊的抗病毒研究將會(huì)為該類探索奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。