原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥治療機(jī)制研究

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(南京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210046)

原發(fā)性肝癌(Primary Hepatic Carcinoma，PHC)是常見的惡性腫瘤之一，其死亡率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中列第三位。其起病隱匿，發(fā)展迅速，生存期短，嚴(yán)重危害人類的健康，手術(shù)存活率很低，而中醫(yī)藥治療本病在控制病情發(fā)展，改善生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期方面有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。尤其治療機(jī)制更是倍受關(guān)注，現(xiàn)就中醫(yī)藥在抑制肝癌細(xì)胞增生、誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞分化和凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞活性、抑制腫瘤血管生成、逆轉(zhuǎn)多藥耐藥等方面的作用作一概述。

1 中醫(yī)藥在抑制肝癌細(xì)胞增生中的作用

因?yàn)槟[瘤細(xì)胞無限增殖是造成腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的主要原因，所以通過抑制肝癌細(xì)胞增殖或殺傷肝癌細(xì)胞可達(dá)到治療肝癌的目的。李好好等[1]研究發(fā)現(xiàn)蛇床子素能夠抑制人肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，可起到治療肝癌的效果。Auyeung等[2]發(fā)現(xiàn)黃連的抗癌作用，其主要成分小檗堿在肝癌細(xì)胞中激活基因酶(NAG-1),抑制細(xì)胞增殖。鄒滿意等[3]用0.25 mmol/L-8.00 mmol/L3-溴丙酮酸(3-BrPA)溶液處理SMMC-7721細(xì)胞，采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制情況,發(fā)現(xiàn)3-BrPA對(duì)SMMC-7721細(xì)胞的增殖有明顯抑制作用。魯玉輝等[4]研究顯示不同濃度的葉下珠復(fù)方藥物血清處理HePG2細(xì)胞后，Bcl-2、STAT3的rnRNA水平明顯下調(diào)，阻斷STAT3信號(hào)通路，抑制細(xì)胞增殖。另有研究[5-7]表明，化痰藥皂莢，蝎毒多肽(PESV)、Salirasib(S-戊烯半胱氨酸類似物)也能抑制細(xì)胞增殖,起到治療肝癌的作用。

2 中醫(yī)藥在誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞分化或凋亡中的作用

張豐華等[8]發(fā)現(xiàn)柴胡皂甙D(SSD)顯著誘導(dǎo)分化SMMC-7721細(xì)胞,且將其細(xì)胞周期明顯阻滯于G0/G1期，其機(jī)制與上調(diào)P38MAPK，下調(diào)NF-κB表達(dá)有關(guān)。郭霞等[9]研究人肝癌BEL-7402細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)隨著黃芩苷濃度增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)，BEL-7402細(xì)胞G1/G0期比例逐步增高，S期細(xì)胞減少，提示黃芩苷能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞分化。程向東等[10]將苦參堿作用人肝癌細(xì)胞HepG2后發(fā)現(xiàn)：苦參堿呈時(shí)間劑量依賴性誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡，同時(shí)降低Bcl-2基因表達(dá)，提高Bax基因表達(dá)，促進(jìn)Bax由胞質(zhì)向線粒體移位，降解Caspase-3、Caspase-9。Wang N等[11]研究表明黃連素同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞自噬和肝癌細(xì)胞凋亡，激活肝癌細(xì)胞凋亡的線粒體,提高M(jìn)HCC97-L細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)，細(xì)胞色素C釋放到細(xì)胞質(zhì)中，激活Caspase-3、Caspase-9。Yu YX等[12]發(fā)現(xiàn)熊果酸(UA)能抑制SMMC-7721細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞凋亡。DNA微陣列分析表明,64個(gè)基因表達(dá)明顯上調(diào)或下調(diào)，p53的凋亡蛋白和Bax表達(dá)上調(diào)，而抗凋亡蛋白Bcl-2下調(diào)。江遠(yuǎn)等[13]對(duì)比研究斯芬與扶正解毒抗癌復(fù)方的抑瘤作用,發(fā)現(xiàn)二者通過上調(diào)p53蛋白的表達(dá)來抑制腫瘤細(xì)胞DNA合成,使細(xì)胞周期停滯在G0/G1期,阻滯細(xì)胞進(jìn)入G2/M期,導(dǎo)致肝癌細(xì)胞凋亡。Auyeung KK等[14]研究發(fā)現(xiàn)黃芪總皂苷酶(AST)抗腫瘤特性，能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的表達(dá)，造成Caspases活性,下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2和bcl-xL表達(dá)。王偉章等[15]發(fā)現(xiàn)Chk1siRNA能有效提高姜黃素誘導(dǎo)Huh7細(xì)胞的凋亡率,提示Chk1可以作為姜黃素治療肝癌的有效增敏靶點(diǎn)。劉偉[16]研究發(fā)現(xiàn)中藥晚癌康2號(hào)能影響人肝癌細(xì)胞Bet27402凋亡相關(guān)基因，Bcl22(抗凋亡因子)表達(dá)減少，F(xiàn)as(死亡受體)表達(dá)增加,通過募集FADD和胱天蛋白酶原8，激活下游的胱天蛋白酶原3，導(dǎo)致病毒感染的細(xì)胞凋亡。另有研究[17-18]表明，馬尾松樹皮提取物(PMBE)和As2O3也能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡,達(dá)到治療肝癌的目的。

3 中醫(yī)藥在抑制腫瘤細(xì)胞活性中的作用

端粒酶在癌細(xì)胞中表達(dá)率高達(dá)80%～90%，對(duì)維持癌細(xì)胞增殖有著重要作用。將源于端粒酶hTERT的抗原表位導(dǎo)入肝癌細(xì)胞中,能誘導(dǎo)hTERT特異性CTL免疫反應(yīng)，有效殺死肝癌細(xì)胞[19-20]，因而端粒酶被認(rèn)為是癌治療的新靶標(biāo)。張振宇等[21]實(shí)驗(yàn)研究表明皂莢提取物顯著抑制人肝癌細(xì)胞bel-7402的增殖,抑制細(xì)胞端粒酶活性，調(diào)控癌基因活化與抑癌基因失活，阻止腫瘤細(xì)胞的無限繁殖。高濃度組對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用更顯著。其作用機(jī)制可能是：抑制活化的端粒酶，阻止細(xì)胞DNA的無限繁殖，提升抑癌基因活性,促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡。Moon DO等[22]研究表明蘿卜硫素(SFN)具有防癌作用，通過SFN抑制端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)表達(dá)，下調(diào)細(xì)胞活性和端粒酶活性,同時(shí)也抑制Akt磷酸化(絲氨酸-473),從而抑制端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶的磷酸化。張曉春等[23]建立小鼠肝癌H22移植瘤模型,發(fā)現(xiàn)咖啡酸鍺能顯著抑制H22細(xì)胞端粒酶的活性,抑制其細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡。謝長(zhǎng)生等[24]發(fā)現(xiàn)養(yǎng)陰清熱方安體優(yōu)Ⅰ號(hào)也能抑制615小鼠HCa-F肝癌的端粒酶活性。另有報(bào)道[25]，瘦素(leptin)能通過端粒酶調(diào)控肝癌基因，發(fā)揮抗肝癌作用。GRN163及其類似物GRN163L是極其成功的寡核苷酸類模版抑制劑,其對(duì)腫瘤顯示出很好的抑制作用，尤其對(duì)人體肝癌細(xì)胞[26]。此外研究表明一些以毒攻毒藥物的有效成分如三氧化二砷、蝎毒亦發(fā)現(xiàn)對(duì)肝癌細(xì)胞端粒酶有較強(qiáng)的抑制作用[27]。

4 中醫(yī)藥在抑制腫瘤血管生成中的作用

任蕊等[28]研究發(fā)現(xiàn)膈下逐瘀湯聯(lián)合環(huán)磷酰胺作用于Hca-f肝癌小鼠后，提高小鼠免疫功能，抑制腫瘤血管生成，具有抗腫瘤作用。有報(bào)道[29]復(fù)方苦參注射液通過抑制腫瘤血管形成，發(fā)揮抑癌作用。孫中杰等[30]發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇(Resveratrol,Res)可以抑制腫瘤組織中的新生血管的形成,降低腫瘤組織MVD,遏制腫瘤生長(zhǎng)。樊訊等[31]研究發(fā)現(xiàn)麝黃消瘤方能抑制肝癌H22細(xì)胞的局部侵襲和淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移,通過增強(qiáng)機(jī)體免疫力，減少腫瘤血管生成，抑制腫瘤的微血管密度(MVD)發(fā)揮作用。Song CC等[32]發(fā)現(xiàn)蜂毒素能夠抑制裸鼠肝癌BEL-7402細(xì)胞移植瘤的生長(zhǎng)，下調(diào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子,通過FGF和NF-κB的表達(dá)，抑制肝癌腫瘤血管的生成，達(dá)到治療肝癌的目的。李松濤等[33]發(fā)現(xiàn)姜黃中3種姜黃色素單體能夠抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng),抑制腫瘤血管生成。

5 中醫(yī)藥在逆轉(zhuǎn)多藥耐藥中的作用

內(nèi)在性腫瘤細(xì)胞對(duì)抗腫瘤藥物的多藥耐藥(MDR)是腫瘤化療失敗的主要原因之一，因此,研究引起MDR的相關(guān)因素、作用機(jī)制及逆轉(zhuǎn)MDR，提高肝癌化療效果成為目前肝癌研究的熱點(diǎn)[34]。孟曉燕等[35]觀察蟾毒靈對(duì)人肝癌多藥耐藥BEL27402/52FU細(xì)胞增殖活性的影響，發(fā)現(xiàn)蟾毒靈對(duì)肝癌多藥耐藥BEL27402/52FU細(xì)胞無交叉耐藥性,有增殖抑制作用，且有時(shí)間依賴性，其作用可能通過阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的。尹蓓等[36]研究耐5-氟尿嘧啶的人肝癌MDR細(xì)胞株BEL-7402/5-Fu使用0.23 mg/mL肝力注射液，結(jié)果提示肝力注射液可發(fā)揮逆轉(zhuǎn)MDR的作用,主要是通過抑制細(xì)胞膜載體蛋白的藥物外排機(jī)制。另有報(bào)道，血紅素加氧酶(HO)能影響肝癌耐藥細(xì)胞化療敏感性，對(duì)治療起到很好的作用[37]。魏莉等[38]也發(fā)現(xiàn)五味子可改變P-gp構(gòu)象，從而逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞株HepG2對(duì)長(zhǎng)春花堿和阿霉素的耐藥，達(dá)到治療肝癌的效果。此外,目前已發(fā)現(xiàn)補(bǔ)骨脂、防己、橄香烯、丹參、貝母、川芎嗪等中藥都具有逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥的作用[39-40]。

6 結(jié)語

綜上所述，中醫(yī)藥治療原發(fā)性肝癌的機(jī)制是多方面的。如何發(fā)揮中醫(yī)藥在肝癌治療中的優(yōu)勢(shì)，尋找更有效的抗肝癌藥物，并深入探討其作用機(jī)制，將是今后研究的重點(diǎn)內(nèi)容。相信隨著更多的中醫(yī)藥抗肝癌機(jī)制被發(fā)現(xiàn)，必將在中醫(yī)傳統(tǒng)辨證論治的基礎(chǔ)上提高中醫(yī)藥治療肝癌的療效。

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