下呼吸道感染的病原菌分布及耐藥分析

魏獻(xiàn)英

(河南省濮陽市南樂縣人民醫(yī)院檢驗科，河南 濮陽 457400)

下呼吸道感染是感染性疾病中最常見種類之一，臨床上多以細(xì)菌感染為主，隨著抗菌藥物的廣泛使用，細(xì)菌耐藥性日益嚴(yán)重。耐藥菌株不斷增多，特別是多重耐藥、交叉耐藥、全耐藥細(xì)菌株，給臨床醫(yī)生選用抗菌藥物治療感染性疾病帶來了非常大的困難。為了給臨床醫(yī)生提供可靠的參考依據(jù)，了解感染病原菌的種類及分布，分析其藥物敏感程度，是降低下呼吸道感染發(fā)病率和病死率的關(guān)鍵?，F(xiàn)對我院門診及住院患者痰標(biāo)本的病原菌分布及對抗菌藥物的耐藥情況分析如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2009年1月1日至2010年12月31日，我院門診及住院下呼吸道患者的痰標(biāo)本共1710份。采集標(biāo)本時，要求患者晨起漱口后，用力自肺部咳出晨痰，盛于無菌痰杯內(nèi)，1h內(nèi)送檢。

1.2 質(zhì)控菌株 質(zhì)控菌株為金黃色葡萄球菌ATCC 25923，大腸埃希菌ATCC 25922，銅綠假單胞菌ATCC-27853，購自衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.3 涂片檢查 對痰標(biāo)本進(jìn)行涂片檢查，符合要求的痰標(biāo)本應(yīng)在低倍鏡視野中≤10個磷狀上皮細(xì)胞，以及≥25個。否則為標(biāo)本不合格，要求重留標(biāo)本，直到合格方可做痰培養(yǎng)[1]。

1.4 試劑與儀器 藥敏紙片均為北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司產(chǎn)品，培養(yǎng)基為鄭州安圖綠科生物工程有限公司產(chǎn)品。細(xì)菌鑒定為珠海迪爾生物工程有限公司專用試劑板。儀器DL-96細(xì)菌測定系統(tǒng)。

1.5 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗 針對涂片染色對所見細(xì)菌形態(tài)和染色特點，選擇不同培養(yǎng)基，將純培養(yǎng)后的細(xì)菌按第3版《全國臨床檢驗操作規(guī)范》的要求進(jìn)行鑒定，分離培養(yǎng)和菌種、屬的鑒定。根據(jù)菌群的種類，接種到專用的細(xì)菌鑒定試劑板上，培養(yǎng)后，用DL-96自動鑒定儀系統(tǒng)對細(xì)菌種屬進(jìn)行鑒定。藥敏試驗，采用紙片擴(kuò)散法(K-B)測定。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)及耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的檢測，采用紙片確證試驗進(jìn)行檢測。具體操作和結(jié)果的判讀參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)研究所(CLSI)推薦的方法[2]。

2 結(jié)果

2.1 兩年間檢出病原菌分布情況。

兩年間痰標(biāo)本培養(yǎng)總計1710例，檢測出病原菌795例，陽性率46.5%，病原菌分布比例見表1。

從表中看出G-桿菌前三位是銅綠假單胞菌(24.7%)、肺炎克雷伯菌(20.7%)、不動桿菌(18.9%)。G+球菌主要是金黃色葡萄球菌 (24.1%)、肺炎鏈球菌(21.8%)及腸球菌(20%)。真菌是以白假絲酵母菌為主，占真菌的79.4%。

2.2 G-桿菌耐藥性分布 見表2。

從表中可以看出G-桿菌對亞胺培南有較高的抗菌活性，三代頭孢菌素、氨基糖苷類、喹諾酮類及復(fù)方β-內(nèi)酰胺類有較好的抗菌活性，對一、二代頭孢菌素、氨曲南等耐藥率較高，達(dá)到了50%以上。

2.3 G+球菌耐藥性分析 見表3。

表1 795株病原菌的分布比例

表2 主要G-桿菌對15種常用抗菌藥物耐藥率(%)

表3 主要G+球菌對14種常用抗菌藥物耐藥率(%)

從表中可以看出G+球菌萬古霉素、替考拉寧、左氧氟沙星有較高的抗菌活性，沒分離出對萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌和腸球菌。

3 討論

呼吸道感染是感染性疾病中最常見的種類之一，約占感染性疾病的30%～40%。所以及時掌握引起該類疾病的病原體種類及藥敏結(jié)果對疾病的臨床診斷、藥物選擇及預(yù)后均有重要意義。

本組資料顯示呼吸道感染的病原菌以G-為主，占65.2%，G+占21.4%，真菌占13.4%]。革蘭陰性菌以銅綠假單胞菌，肺炎克雷伯菌，不動桿菌為主[3]，與本報道一致。對青霉素類，一、二代頭孢菌素類，氨曲南等高度耐藥，均超過50%以上，普遍對亞胺培南、三代頭孢素類、氨基糖苷類、喹諾酮類等有較好敏感活性。亞胺培南依然是最優(yōu)，沒有出現(xiàn)耐藥菌株。但是隨著亞胺培南臨床治療應(yīng)用的增加，必然要出現(xiàn)耐碳青酶烯菌株，因此，臨床用藥注意亞胺培南的使用問題，嚴(yán)格掌握用藥指征，減少抗菌藥物選擇性壓力。

革蘭陽性菌中金黃色葡萄球菌對頭孢西丁的耐藥率為40.5%，表明醫(yī)院感染的金黃色葡萄球菌為耐甲氧西林(MRSA)菌株，并占有較高的比例，該菌株具有多重耐藥性，對現(xiàn)今所有的β-內(nèi)酰胺類藥物均耐藥。不論測試結(jié)果如何，臨床用藥均無效。

革蘭陽性菌以金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、腸球菌為主，未分離出耐萬古霉素及替考拉寧菌株。因此對多重耐藥的葡萄球菌可選用替考拉寧和萬古霉素治療，但不可濫用。另外，普遍對左氧氟沙星敏感性較高，可作為革蘭陽性球菌的首選藥。

本研究中真菌感染以白假絲酵母菌為主，真菌感染呈上升趨勢，抗生素的廣泛應(yīng)用是造成真菌感染的重要原因[6]，本次檢出的真菌感染患者所患疾病主要集中在長期臥床與肺氣腫患者，以及長期使用抗生素的患者，提示臨床醫(yī)生對免疫功能低下或長期使用抗生素的患者要特別注意預(yù)防真菌感染。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版,南京:東南大學(xué)出版社,2006:744-745.

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