安康野桑蠶種質(zhì)資源的研究與保存

彭云武

（安康學(xué)院，陜西 安康 725000）

種質(zhì)資源又稱為遺傳資源、基因資源，是遺傳育種領(lǐng)域把一切具有一定種質(zhì)或基因，可用于育種、栽培及其他生物學(xué)研究的各種生物類型總稱[1]。野桑蠶屬鱗翅目，與家蠶有共同的祖先[2]。蠶品種的資源有5個方面的來源：①各地長期遺留下來的地方品種；②通過系統(tǒng)選擇或雜交而育成的品種；③引進的蠶品種；④基因突變系；⑤近緣野生資源[3]。我國蠶品種保存主要是由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所負(fù)責(zé)進行的，保存了包括亞、歐、非主要蠶區(qū)的家蠶品種資源510份，育種素材100余份，家蠶基因突變及近等位基因系220份，蓖麻蠶品種20份[4]。日本保存蠶品種資源約800個系統(tǒng)[5-8]?，F(xiàn)代育種實踐表明，關(guān)鍵性基因資源的發(fā)現(xiàn)、研究和利用在育種成就中起著決定性作用，對育種工作有著極為重要的意義。

1 研究方法

1.1 收集調(diào)查

通過向各縣區(qū)鄉(xiāng)鎮(zhèn)林技站及當(dāng)?shù)卮褰M群眾了解野桑蠶的大致分布情況，實地調(diào)查該區(qū)域野桑蠶的分布，調(diào)查該種質(zhì)材料的各項數(shù)據(jù)指標(biāo)，記錄幼蟲體色、繭色、數(shù)量、病蟲害等描述性性狀信息，同時采集幼蟲、繭、卵等標(biāo)本，備后期工作使用。

1.2 野桑蠶飼養(yǎng)棚的建立

用￠18鋼筋焊接成6.0 m長×1.8 m寬×2.8 m高的長方體框架，留0.3m腳柱插入土壤。用￠16鋼筋彎成2.5 m長的圓弧焊接在長方體的上方，圓弧用0.67m長的￠16鋼筋兩根作支撐。在3個弧頂之間用￠16鋼筋連接，形成拱棚。把9個長方體框架并排焊接在一起，形成整體，外形看是一個大棚。用60目的尼龍紗網(wǎng)覆蓋整個大棚，在長方體寬的一方開寬1.0m，高2.0m的門。用60目的尼龍紗網(wǎng)在每個長方體長3 m處橫隔，形成3.0 m長×1.8 m寬×2.5 m高的小室，這樣9個長方體就隔離成18個小室。兩棚之間留2.5m作為觀察道路，路面鋪沙石，這樣每個小室就能隨時觀察。在每個小室中央栽兩株桑樹，株距2m，兩端各離尼龍紗網(wǎng)0.5 m。桑樹在株高1.6m時用垂桑枝條進行嫁接，每株在同一高度對稱嫁接2個芽，嫁接芽成活后長到4片葉時進行摘心，促使腋芽萌發(fā)，留3～5個芽生長，冬季進行剪稍，第二年春季就可以放養(yǎng)野桑蠶。野桑蠶飼養(yǎng)棚見圖1。

1.3 野桑蠶長蛹齡個體調(diào)查

野桑蠶中有蛹齡很長的現(xiàn)象，專門對此進行了調(diào)查。2009年5月26日，分飼養(yǎng)棚把第一代野桑蠶繭（5月1日至5月25日結(jié)繭）收集在尼龍網(wǎng)袋中并計數(shù)，把尼龍網(wǎng)袋掛在桑樹上，在自然溫濕度中保存。蛹期短的個體在袋內(nèi)羽化后任其交配、產(chǎn)卵、孵化。9月7日把尼龍網(wǎng)袋收回室內(nèi)調(diào)查第一代未羽化的繭蛹數(shù)，繼續(xù)保存，到第一個長蛹齡蛹羽化開始記載羽化日期和雌雄、個數(shù)。

1.4 野桑蠶的保存

將農(nóng)村調(diào)查收集到的野桑蠶材料放入野外飼養(yǎng)大棚內(nèi)保存飼養(yǎng)，結(jié)繭時單粒編號，結(jié)繭3 d后采集放入室內(nèi)保種室保種。同一收集地的野桑蠶繭放入尼龍網(wǎng)籠或帶蓋塑料籃內(nèi)進行種繭保護，羽化后將野蠶蛾放入打孔的信封內(nèi)交配制種，沒有羽化的繭繼續(xù)保護直到羽化。當(dāng)所制的野桑蠶種發(fā)育至卵色轉(zhuǎn)青時，把轉(zhuǎn)青卵信封放入飼養(yǎng)棚內(nèi)用回形針固定在垂桑枝條上孵化飼養(yǎng)。野桑蠶種質(zhì)資源保存見圖2。

2 結(jié)果與分析

2.1 安康野桑蠶的自然分布概況

從安康市所轄9縣1區(qū)進行野桑蠶資源調(diào)查的結(jié)果看，野桑蠶分布于安康市廣大蠶區(qū)，其中白河縣、石泉縣分布較多，漢濱區(qū)、漢陰縣、嵐皋縣、平利縣、紫陽縣、旬陽縣均有分布。這些縣區(qū)屬于安康的主蠶區(qū)，栽桑面積大，蠶農(nóng)管理桑園水平不一，有利于野桑蠶繁衍繼代。鎮(zhèn)平縣和寧陜縣屬于高山區(qū)域，農(nóng)戶沒有栽桑，僅在山坡、懸崖上有零星野生桑，不易收集。

2.2 長蛹齡個體的調(diào)查

對野桑蠶長蛹齡個體的調(diào)查結(jié)果如表1所示。從表1中可知，各收集點第一代結(jié)繭數(shù)量不同，長蛹齡蛹數(shù)也不同，其中3號棚長蛹齡蛹比例最低，占結(jié)繭數(shù)的2.5%；最高的是37號棚，占結(jié)繭數(shù)的11.6%。調(diào)查結(jié)果顯示，蛹齡最長者，直到10月21日才羽化，蛹期達到5個月之久。這一結(jié)果說明，安康野桑蠶長蛹期普遍存在。

表1 野桑蠶長蛹齡調(diào)查

2.3 野桑蠶的形態(tài)特征

2.3.1 幼 蟲 野桑蠶長期生活在自然環(huán)境中，為了避免天敵危害，形成特有的幼蟲體色。幼蟲體色共同的特點是：有野桑蠶暗色斑，4齡前兩側(cè)有大型白色紋帶，胸部明顯，胸腹交接處幾乎成環(huán)帶。但不同地點收集的野桑蠶體色深淺有各種差異，見圖3。幼蟲在3齡時，圖3 a幼蟲比圖3 b幼蟲體色淺，圖3 b幼蟲體色濃黑。4齡時幼蟲蠶體整體為暗黑色（圖3 g）。個別在5齡起蠶（圖3 c）的半月紋斑和星狀紋斑上有兩對明顯的突起，似家蠶中的龍角蠶；5齡盛食期，幼蟲體色有的為干樹枝狀（圖3 e）。幼蟲老熟時，身體明顯縮短變小，體色偏紅（圖3 h）。

2.3.2 蛹/繭 野桑蠶蛹體型明顯比家蠶蛹瘦小。在調(diào)查野桑蠶繭質(zhì)成績時發(fā)現(xiàn)，有的野桑蠶蛹頭胸部為黑色，象家蠶中的黑頭蛹，前翅部分為黑色。野外野桑蠶繭多為褐黃色，因為表面常被污染，結(jié)在卷葉內(nèi)的繭子因未被污染，即呈金黃色。繭型常為一端尖的長型繭或長橢圓形繭。繭小，雌、雄性差異明顯。

2.3.3 蛾 野桑蠶成蟲體色全身為灰黑色，翅有深黑色帶紋，翅頂有半月形黑色斑紋?；y均為雄深雌淺。圖4中20﹟野桑蠶蛾，雌蛾前翅沒有半月紋斑，而雄蛾的半月紋斑比較明顯；37﹟野桑蠶蛾，雌蛾翅有半月紋斑，但不濃黑，雄蛾體色顯著比雌蛾深。不同來源的野桑蠶蛾體色有差異，如圖4所示。

2.3.4 卵 野桑蠶卵形與家蠶的相似，為短橢圓形，卵面扁平，卵色多為灰褐色，卵孵化后卵殼黃色。

2.4 人工野桑蠶資源庫的構(gòu)建

收集了秦巴山區(qū)安康境內(nèi)8個縣區(qū)原生態(tài)的野桑蠶材料23份，并收集了北京地區(qū)野桑蠶1份、山東地區(qū)的野桑蠶2份，建有占地400 m2的野桑蠶室外飼育大棚。目前，共保存了26個野桑蠶資源材料。同時，通過導(dǎo)入家蠶，分離發(fā)現(xiàn)各種特殊性狀，建立彩色繭遺傳材料系統(tǒng)34個。

3 結(jié)論與討論

3.1 發(fā)現(xiàn)特長蛹期資源

調(diào)查結(jié)果表明，安康野桑蠶中存在長蛹期個體，主要發(fā)生在第一代，自然環(huán)境下蛹期長達4～5個月之久。之前，只有日本報道發(fā)現(xiàn)第一代野桑蠶有蛹期長達3個月的個體。這進一步說明，中國安康野桑蠶的特殊性和珍貴性。但安康野桑蠶一代蛹期長的原因尚待進一步研究。

3.2 安康野桑蠶有豐富的遺傳多樣性

根據(jù)野桑蠶幼蟲體色和斑紋、蛹頭胸著色、成蟲體色等表觀特點，印證了魯成[9]、李競[10]的研究結(jié)果，說明安康野桑蠶有豐富的遺傳多樣性，這為種質(zhì)資源利用提供了廣泛的選擇基礎(chǔ)。

3.3 建立了安康野桑蠶人工保存種質(zhì)資源庫

在系統(tǒng)調(diào)查安康野桑蠶資源的基礎(chǔ)上，收集了分布于安康各地的野桑蠶資源材料23份，其他地區(qū)野桑蠶材料3份，探索建立了室外大棚飼養(yǎng)保存野桑蠶的方法，構(gòu)建了人工保存的野桑蠶種質(zhì)資源庫。同時，建立并保存了具有安康野桑蠶血統(tǒng)的家蠶特殊遺傳材料34份。這一資源庫的構(gòu)建，為安康野桑蠶資源的保護、研究和利用打下了堅實基礎(chǔ)，也可為其他地區(qū)野桑蠶資源的保護提供可借鑒的經(jīng)驗，具有重要的理論和實際意義。

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