淋巴細胞主動免疫治療原因不明復發(fā)性流產(chǎn)的效果觀察

邢志艷 譚 欣 王金旺 賈永強 高立廷

內(nèi)蒙古自治區(qū)計劃生育科學技術(shù)研究所(赤峰，024000)

近年來國內(nèi)各大醫(yī)療及科研單位采用丈夫或男性第三者淋巴細胞皮內(nèi)注射主動免疫方法治療原因不明復發(fā)性流產(chǎn)(URSA)，本所采用此方法進行了治療，并觀察其臨床效果。

1 對象與方法

1.1 對象與標準

1.1.1 主動免疫組 選擇2006年6月 ～2011年1月來本所診治的URSA患者62例，均經(jīng)過詳細詢問病史及系統(tǒng)檢查。對象平均年齡29.98(21～43)歲。2次流產(chǎn)31例，3次流產(chǎn)21例，4次流產(chǎn)10例。妊娠＜12周自然流產(chǎn)56例，妊娠≥12周流產(chǎn)6例。無死胎、死產(chǎn)及活產(chǎn)史。夫妻染色體正常，女性生殖道無畸型，抗人白細胞抗原I類(HLA－I)抗體檢測陰性，內(nèi)分泌激素指標正常，抗精子抗體、抗子宮內(nèi)膜抗體、抗心磷脂酶抗體均陰性，TORCH檢測均陰性，女方血型為O型查抗體效價。男女雙方均無生殖道感染，男性精液正常，男方無抗精子抗體。

1.1.2 對照組 同期選擇22例URSA患者作為對照組，選擇標準同主動免疫組。平均年齡29.10(22～41)歲。2次流產(chǎn)12例，3次流產(chǎn)7例，4次流產(chǎn)3例。妊娠＜12周自然流產(chǎn)18例，妊娠≥12周流產(chǎn)4例。再次妊娠后采用傳統(tǒng)保胎方法(肌注黃體酮+hCG)。

1.2 方法

1.2.1 淋巴細胞來源 淋巴細胞來自URSA患者丈夫或者第三者(男性)，檢查人免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒螺旋體、肝炎病毒為陰性。

1.2.2 主動免疫治療 無菌條件下，抽取丈夫/第三者男性外周血20ml，加入肝素10ml，生理鹽水10ml混勻，靜置30min，經(jīng)淋巴細胞分離液分離淋巴細胞(離心條件:1 800r/min)，然后吸取富含淋巴細胞的白膜層，洗滌兩次(700r/min)，每次洗滌前將管內(nèi)細胞輕輕搖勻以防結(jié)塊，加入適量生理鹽水，將淋巴細胞濃度調(diào)整為(20～40)×106/ml，混勻備用。在計劃妊娠前2～3個月開始注射，即吸取淋巴細胞懸液，在患者前臂內(nèi)側(cè)注射6個點，每個點0.2ml，間隔3周1次，3次為1療程，治療過程中避孕。療程結(jié)束后復查HLA－I，陰性者繼續(xù)進行下一療程，直至HLA－I陽性后，鼓勵患者3個月內(nèi)受孕。如獲妊娠則按上述療法追加治療1次;如未妊娠則排除其他因素引起的不育癥后，重新治療。

1.2.3 傳統(tǒng)保胎治療方法 確定宮內(nèi)妊娠后，自妊娠5周起，肌注黃體酮 20～60mg/d·次 +hCG 1 000U 2日1次，連用1～2周。

1.3 妊娠成功指標

妊娠超過28周，B超未見異常或分娩活嬰。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

兩組對象年齡、流產(chǎn)次數(shù)、流產(chǎn)時妊娠時間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

2.2 治療效果

主動免疫治療組62例中有48例妊娠成功(包括足月分娩39例，早產(chǎn)9例)，14例失敗，妊娠成功率為77.42%;而未經(jīng)主動免疫治療的對照組22例中5例妊娠成功(足月分娩)，17例失敗，妊娠成功率為22.73%。兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=20.854，P ＜0.05)。

3 討論

復發(fā)性自然流產(chǎn)(RSA)發(fā)病原因復雜，包括遺傳、內(nèi)分泌、解剖、感染、自身免疫因素，但仍有50%～60%以上的患者原因不明，稱為URSA［1］。1981年Taylar對4例抗丈夫淋巴細胞抗體(APLA)陰性的URSA患者進行免疫治療，有3例成功分娩，從而引起圍生學界的廣泛關(guān)注［2］。妊娠是一種同種異體移植，正常妊娠時，因受丈夫HLA受體致敏，妻子T、B淋巴細胞產(chǎn)生抗HLA受體的自身抗體，它存在于妊娠期婦女血清中，可抑制針對丈夫HLA特異性抗體的淋巴細胞毒活性，抑制異體移植的排斥，使孕婦免于流產(chǎn)。從近代生殖免疫學觀點看來，URSA可能是由于患者對胚胎父系HLA抗原的免疫低反應性所致，即患者由于對胚胎同種異體抗原無法產(chǎn)生足夠的封閉抗體，而使胚胎得不到免疫防護而流產(chǎn)［3］。采用皮內(nèi)注射丈夫/第三者男性的淋巴細胞免疫治療后，封閉抗體陽性率明顯增高，再次妊娠的患者中，封閉抗體陽性者妊娠成功率明顯高于陰性者，說明免疫治療后，封閉抗體產(chǎn)生增加母體免疫耐受，胎兒易于存活，妊娠成功率提高。另外，免疫治療后，部分封閉抗體陰性者妊娠也獲得成功。可能是因為主動免疫治療使這些患者誘發(fā)了由細胞免疫參與的免疫抑制，使封閉效應增強所致［4］。關(guān)于主動免疫的作用機制現(xiàn)在尚未研究清楚，隨著生殖醫(yī)學的發(fā)展，URSA的發(fā)病機制及主動免疫治療的機制將會得到進一步闡明。

本組62例經(jīng)淋巴細胞主動免疫治療的URSA患者妊娠成功率(77.42%)，高于對照組的妊娠成功率(22.73%)，證實主動免疫方法是有效的。該方法技術(shù)簡單，成功率高。應讓患者了解主動免疫的意義、注意事項及方法等，取得患者的信任感，使患者以樂觀的態(tài)度配合主動免疫治療。

1 劉艷秋，倉娟，周萍.原因不明反復自然流產(chǎn)患者的主動免疫治療［J］.江西醫(yī)藥，2009，44(2):299.

2 李帶莉.30例原因不明性反復自然流產(chǎn)患者免疫治療的臨床分析［J］.國際醫(yī)療衛(wèi)生導報，2005，11(24):39.

3 Chaichian S，Shoaes S，Sanm iA，et al.Factors influencing success Rate of leukocyte inmunization and anti－paternal antibodies in spontaneous recurrent miscarriage［J］.Am J Reprod lmmnnol，2007，57(3):169－176.

4 Komolos L，Vardimon D，Notmann J，et al.Mixed maternal－paternal lymphocyte cultures before and after immunotherapy for recurrent spontaneous abortions［J］.Am J Reprod lmmnnol，1996，35(1):30－33.