移植物抗宿主病和移植物抗白血病效應(yīng)的發(fā)生機(jī)制及分離策略的研究進(jìn)展

羅 浩， 柯 丹

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院醫(yī)院，湖北 武漢 430030)

移植物抗宿主病和移植物抗白血病效應(yīng)的發(fā)生機(jī)制及分離策略的研究進(jìn)展

羅 浩， 柯 丹△

(華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院醫(yī)院，湖北 武漢 430030)

干細(xì)胞； 移植； 移植物抗宿主病； 移植物抗白血病效應(yīng)

異基因造血干細(xì)胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT)為惡性疾病提供了一種全新的治療策略并廣泛應(yīng)用于惡性疾病的治療。通過移植治療，其移植物抗白血病(graft-versus-leukemia，GVL)效應(yīng)對(duì)惡性疾病的治療及防止移植后疾病復(fù)發(fā)發(fā)揮著關(guān)鍵作用，但是隨之而發(fā)生的移植物抗宿主病(graft-versus-host disease，GVHD)又是影響移植后生存的重要因素之一。本文通過對(duì)GVHD和GVL發(fā)生機(jī)制的深入認(rèn)識(shí)，從而探索并制定GVHD和GVL的分離策略，使GVHD作用最小化和GVL效應(yīng)最大化，從而為臨床移植工作者提高移植的臨床應(yīng)用價(jià)值而提供更多更好的思路和方法。

1 發(fā)生機(jī)制

GVHD和GVL的病理生理機(jī)制十分復(fù)雜，目前了解還不是很清楚，供者和受者的細(xì)胞及細(xì)胞因子等許多因素參與其中，使得其機(jī)制更加撲朔迷離，目前認(rèn)為供者T細(xì)胞在其中發(fā)揮著巨大的作用。

1.1GVHD的發(fā)生機(jī)制 急性GVHD(acute graft-versus-host disease，aGVHD)病理生理有3個(gè)時(shí)期[1]：(1)宿主抗原遞呈細(xì)胞(antigen presenting cell，APC)的激活：預(yù)處理方案導(dǎo)致組織損傷并且產(chǎn)生大量的炎癥因子，這些細(xì)胞因子激活宿主APC；(2)供體T細(xì)胞激活：激活的宿主APC與組織受損時(shí)大量細(xì)胞因子激活的供體T細(xì)胞相互作用，激活的供體T細(xì)胞分泌Th1類細(xì)胞因子(IFN-γ、IL-2和TNF-α等)，從而啟動(dòng)GVHD的發(fā)生；(3)細(xì)胞及細(xì)胞因子效應(yīng)期：在細(xì)胞因子作用下，引導(dǎo)細(xì)胞毒T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞至GVHD位點(diǎn)，通過Fas、穿孔素-顆粒酶方式作用于靶器官，從而導(dǎo)致aGVHD的臨床表現(xiàn)。

在近30年里，關(guān)于慢性GVHD(chronic graft-versus-host disease，cGVHD)的發(fā)病率及病死率沒有明顯改善，主要的原因是對(duì)它的病理生理缺乏足夠認(rèn)識(shí)。aGVHD通常發(fā)生在移植后1～2月內(nèi)，而cGVHD總是在移植后4～6月[2]，兩者不僅在發(fā)生時(shí)間上不同，而且在如下方面存在明顯差異：(1)盡管cGVHD的靶器官與aGVHD重復(fù)，如皮膚、腸道、肝臟和肺臟，但是組織病理學(xué)卻有明顯差異：aGVHD表現(xiàn)供體淋巴細(xì)胞浸潤和宿主組織細(xì)胞凋亡和壞死，cGVHD卻以膠原沉積而缺乏T淋巴浸潤為特征[3]；(2)大約70%的cGVHD患者具有血清自身抗體(如抗ds-DNA、抗平滑肌抗體等)升高，并且消除B細(xì)胞后能改善難治性cGVHD，因此cGVHD具有類似自身免疫性膠原血管疾病的特點(diǎn)，如硬皮病和SLE，但是，關(guān)于自身免疫反應(yīng)如何在cGVHD中發(fā)生缺乏足夠了解[4]。

1.2GVL效應(yīng)發(fā)生機(jī)制 Allo-HSCT后植入的免疫細(xì)胞針對(duì)宿主的3 種靶細(xì)胞，即造血細(xì)胞、非造血細(xì)胞以及異常細(xì)胞( 包括白血病細(xì)胞與其它腫瘤細(xì)胞)。如果植入的異基因免疫細(xì)胞對(duì)宿主的3 種細(xì)胞都發(fā)揮作用即導(dǎo)致 GVHD；若只對(duì)異常腫瘤細(xì)胞發(fā)揮作用就構(gòu)成 GVL 效應(yīng)；若對(duì)造血細(xì)胞和異常細(xì)胞同時(shí)發(fā)揮作用，則除 GVL 效應(yīng)之外，還能進(jìn)一步抑制宿主的血液系統(tǒng)。因此，GVL同屬于移植物抗宿主作用，同樣經(jīng)歷T細(xì)胞活化擴(kuò)增及效應(yīng)這些過程。盡管目前對(duì)GVL的發(fā)生機(jī)制認(rèn)識(shí)還不是很清楚，但是GVL與供者T淋巴細(xì)胞識(shí)別宿主的白血病特異性抗原有關(guān)。

1.3GVHD和GVL的關(guān)系 GVHD同GVL密切相關(guān)，它們之間存在一些共同的生物學(xué)機(jī)制，但又有明顯差別，兩者存在部分重疊，因此它們之間既相互依存又相互獨(dú)立。不具有aGVHD的移植患者其存活率較高，但是同時(shí)伴有aGVHD和cGVHD患者生存率最高。雖然去T淋巴細(xì)胞的異基因干細(xì)胞移植患者的GVHD發(fā)生率及嚴(yán)重性降低，但是白血病復(fù)發(fā)率及移植物排斥率顯著增加，因此GVL效應(yīng)和GVHD緊密相連并依賴于T淋巴細(xì)胞。但是，這兩者又是可以相互獨(dú)立的，GVHD反應(yīng)強(qiáng)度與GVL效應(yīng)大小并不呈正相關(guān)，allo-HSCT后復(fù)發(fā)的患者在接受供者淋巴細(xì)胞輸入(donor lymphocyte infusion，DLI)后可以獲得緩解而不伴有GVHD發(fā)生，證明GVL效應(yīng)也可分離于GVHD之外而獨(dú)立出現(xiàn)。

2 分離策略

為了增加移植治療的有效性和安全性，近年來在許多方面進(jìn)行了嘗試，以便進(jìn)一步分離GVHD和GVL，包括GVHD風(fēng)險(xiǎn)的早期預(yù)測和判斷、供者移植物細(xì)胞的修飾及藥物干預(yù)。

2.1GVHD風(fēng)險(xiǎn)的早期預(yù)測和判斷

① 預(yù)測GVHD的生物學(xué)標(biāo)志物 對(duì)GVHD的生物學(xué)標(biāo)志物已經(jīng)廣泛研究，GVHD的生物學(xué)標(biāo)志物是提供GVHD預(yù)后判斷的方法，同時(shí)也是對(duì)GVHD發(fā)生的早期判斷線索，并可以監(jiān)控GVHD的進(jìn)程。Paczesny等[5]描述了4種生物學(xué)標(biāo)志物(IL-2Rα、TNF-R1、IL-8和HGF)，它們與aGVHD的判斷有關(guān)。在GVHD病人中，這些標(biāo)志物在血中的水平與沒有GVHD的病人比較，它們明顯升高，這為aGVHD的診斷提供了敏感而特異的指標(biāo)，同時(shí)也為早期使用抗GVHD藥物(如TNF拮抗劑)提供依據(jù)。這些生物學(xué)標(biāo)志對(duì)GVHD究竟發(fā)揮抑制或者促進(jìn)作用目前不是很清楚，因此，對(duì)它們作用的判斷將有利于確定是否抑制GVHD而保留GVL作用。

② 影響GVHD結(jié)果的基因多態(tài)性 促炎因子與細(xì)胞因子(IL-1、IL-6和TNF-α)的高表達(dá)有關(guān)，這些細(xì)胞因子導(dǎo)致嚴(yán)重的GVHD。有關(guān)促炎因子的基因多態(tài)性已經(jīng)被鑒定出來。針對(duì)IL-1受體拮抗劑的基因，其多態(tài)性將通過下調(diào)IL-1而使受者免遭aGVHD；在IFN-γ基因有2種多態(tài)性，一種加強(qiáng)IFN-γ生成，而另一種減少IFN-γ生成，奇怪的是，具有任何一種多態(tài)性的病人都存在GVHD發(fā)生率增高的情況[6]。在Th2細(xì)胞中，分泌的IL-10具有不同的基因多態(tài)性，其生成增多將減少aGVHD發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)；生成減少將增加aGVHD和cGVHD發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)[7]。對(duì)這些基因的研究將有助于判斷嚴(yán)重GVHD高風(fēng)險(xiǎn)病人。

2.2供者移植物細(xì)胞的修飾

① 供者T細(xì)胞去除 最初分離GVHD和GVL的方法是采用抗T細(xì)胞血清去除供者T細(xì)胞功能，但是這種方法與T細(xì)胞存在的情況下比較,沒有發(fā)現(xiàn)明顯的治療優(yōu)勢；新的生物學(xué)方法采用單克隆抗體減少T細(xì)胞數(shù)目，但是，雖然減少了GVHD，卻具有高風(fēng)險(xiǎn)的感染和復(fù)發(fā)率；另一個(gè)方法是供者CD34細(xì)胞陽性選擇，但是這種方法增加了復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于采用這種方法的病人并沒有獲得生存率增高的利益[8]。因此，T細(xì)胞去除及CD34細(xì)胞陽性選擇都不是分離GVHD和GVL的成功方法。

② 異基因T細(xì)胞的延遲治療 接受T細(xì)胞去除供者的受體如果接受一個(gè)移植后的供者T淋巴細(xì)胞輸注(DLI)，具有更好的免疫重建效果。延遲DLI的機(jī)理是避免了預(yù)處理所導(dǎo)致的廣泛炎癥時(shí)期，在延遲DLI時(shí)，已經(jīng)有很少的炎癥細(xì)胞因子和宿主樹突狀細(xì)胞反應(yīng)。來自次級(jí)組織相容性抗原不合的allo-HSCT動(dòng)物模型數(shù)據(jù)表明，延遲DLI保留了GVL效應(yīng)，但沒有增加GVHD風(fēng)險(xiǎn)。但是，這種作用在MHC不合的造血干細(xì)胞移植的小鼠模型中沒有觀察到，并且在移植后1～2月行DLI的病人中也沒有觀察到這種作用。在小鼠移植模型中，受者在移植后3周行延遲DLI，與移植后12周行延遲DLI比較，前者具有更高的GVL效應(yīng)。因此，使用DLI后對(duì)GVHD和GVL的效應(yīng)是復(fù)雜的，預(yù)防性使用DLI沒有產(chǎn)生一致的GVHD和GVL分離效果，但是對(duì)于許多低增長的造血系統(tǒng)惡性腫瘤(如CML和非霍杰金淋巴瘤)在移植后復(fù)發(fā)，采用DLI卻是一種有效的方法[9]。

③ 消除自身反應(yīng)性T細(xì)胞 數(shù)據(jù)表明[10]，使用光力學(xué)方法消除自身反應(yīng)性T細(xì)胞，加強(qiáng)了受體細(xì)胞免疫重建，沒有增加aGVHD發(fā)生，但出現(xiàn)了cGVHD，并且長期的GVL效應(yīng)也沒有完全確定。

④ 選擇記憶T細(xì)胞 在老鼠移植模型的研究表明，供者幼稚T細(xì)胞，聯(lián)合表達(dá)CD62L和CD45RA或者CD62L和CCR2，它們與記憶T細(xì)胞比較，具有更多的GVHD活性。幼稚CD4 T細(xì)胞在次級(jí)組織相容性抗原不合的移植鼠中導(dǎo)致GVHD發(fā)生，但是用FACS純化的CD4+CD44+CD62L-的記憶T細(xì)胞沒有發(fā)生GVHD。用FACS純化的T細(xì)胞亞群顯示，CD4+CD44low幼稚T細(xì)胞造成GVHD，但是CD4+CD44high記憶T細(xì)胞沒有發(fā)生GVHD[11]。采用間接體內(nèi)方法清除自身反應(yīng)性T細(xì)胞及具有強(qiáng)烈炎癥潛能的T細(xì)胞，分離GVHD和GVL也許是可行的。

⑤ 加強(qiáng)活化的γδT細(xì)胞 γδT細(xì)胞是一種與常見αβT細(xì)胞不同的少見的獨(dú)特的T細(xì)胞，它們除產(chǎn)生IFN-γ和TNF-α細(xì)胞因子外，也表達(dá)免疫球蛋白受體(KIR)CD94/NKG2，類似于自然殺傷細(xì)胞，通過細(xì)胞間連接作用直接殺死靶細(xì)胞。γδT細(xì)胞在上皮組織(如胃腸道、皮膚)含量豐富，這有助于病原菌特異性免疫反應(yīng)。γδT細(xì)胞缺乏將導(dǎo)致器官特異性免疫病理損傷或者增加感染風(fēng)險(xiǎn)。γδT細(xì)胞通過細(xì)胞間連接作用和促進(jìn)TNF-α合成從而引起樹突狀細(xì)胞成熟。缺少γδT細(xì)胞的供者異基因移植導(dǎo)致GVHD減少，并減低MHC不合移植小鼠模型中的T細(xì)胞活性，接受供者高數(shù)量γδT細(xì)胞的受者具有更高的Ⅱ～Ⅳ級(jí)aGVHD的發(fā)生率。臨床中，aGVHD的發(fā)生率與供者γδT細(xì)胞的數(shù)目明顯相關(guān)[12]。但是，通過間接體內(nèi)法激活γδT細(xì)胞將促進(jìn)供者干細(xì)胞植入，同時(shí)不造成GVHD。沒有被活化的供者γδT細(xì)胞在減少移植物排斥上沒有作用，并且表明γδT細(xì)胞在體內(nèi)的持續(xù)存在對(duì)促進(jìn)異體移植具有重要作用。

⑥ 選擇調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs) 在人體和動(dòng)物模型中，一種特殊的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞亞群已被確定，它以聯(lián)合表達(dá)CD4、CD25和Foxp3為特征，占鼠外周血CD4+細(xì)胞的5%～10%，占人類的1%～2%，其功能是控制自身免疫的發(fā)生和移植排斥。人類CD4+CD25+Tregs在外周血中抑制混合白細(xì)胞反應(yīng)。供鼠CD4+CD25+Tregs預(yù)防aGVHD。CD4+CD25+Tregs的供者能夠抑制自身反應(yīng)性供者CD4+CD25-T細(xì)胞，并且供者Tregs含量與aGVHD的發(fā)生密切相關(guān)。在小鼠模型中，當(dāng)供者CD4+CD25+Tregs抑制導(dǎo)致GVHD的自身反應(yīng)性T細(xì)胞時(shí)，并沒有發(fā)現(xiàn)GVL作用被抑制。并且，在具有aGVHD和cGVHD的病人中，發(fā)現(xiàn)Treg特異性轉(zhuǎn)錄因子Foxp3是減少的。但是，血中CD4+CD25+Tregs數(shù)目與cGVHD發(fā)生之間的關(guān)系存在很大的爭議，有些報(bào)道表明CD4+CD25+Tregs數(shù)目減少與cGVHD發(fā)生有關(guān)[13]，也有報(bào)道認(rèn)為，具有cGVHD的病人其循環(huán)血中有更高比例的CD4+CD25+Tregs細(xì)胞[14]。

⑦ 選擇其它的移植物細(xì)胞

(a)供者來源 異基因供者來源有骨髓、動(dòng)員的外周血和臍血?？傮w上來說，在成人3種來源的干細(xì)胞移植其GVL活性是類似的；在兒童中，骨髓和動(dòng)員外周血來源的干細(xì)胞，其移植后的aGVHD風(fēng)險(xiǎn)也類似，但是骨髓來源干細(xì)胞移植后具有更低的cGVHD、死亡率和腫瘤復(fù)發(fā)率。通過meta分析認(rèn)為，兒童中臍血造血干細(xì)胞移植和無關(guān)供者相合骨髓移植在Ⅲ～Ⅳ級(jí)aGVHD發(fā)生率和2年無病生存率上沒有明顯差異，但是，臍血造血干細(xì)胞移植患兒具有更低的cGVHD發(fā)生率[15]。所以，對(duì)于成人而言，選擇何種造血干細(xì)胞對(duì)GVL和GVHD的平衡可能沒有重要影響。

(b)選擇NK細(xì)胞 在動(dòng)物模型和臨床中，供者NK細(xì)胞可以殺傷異基因腫瘤細(xì)胞和宿主APC而減少腫瘤復(fù)發(fā)和aGVHD的發(fā)生。NK細(xì)胞的免疫學(xué)活性受到細(xì)胞表面多態(tài)性蛋白KIRs的調(diào)控。KIRs由抑制性受體及活性受體組成，抑制性KIRs識(shí)別并與其配體結(jié)合，從而啟動(dòng)阻止NK細(xì)胞活性和細(xì)胞毒性的抑制信號(hào)。相反，活性受體與配體結(jié)合并啟動(dòng)NK細(xì)胞活性，造成靶細(xì)胞的溶解。臨床上，NK細(xì)胞的自身反應(yīng)性與供者T細(xì)胞成反比，T細(xì)胞的大量減少與高的GVHD發(fā)生率相關(guān)，同時(shí)也減少了自身反應(yīng)性NK細(xì)胞的潛在價(jià)值。因此，在去除T細(xì)胞的環(huán)境下，供者NK細(xì)胞防止腫瘤復(fù)發(fā)而減少GVHD發(fā)生，這將有助于增加GVL并減少GVHD[16]。

(c)選擇樹突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)及其亞群 宿主APC在GVHD的啟動(dòng)中具有重要作用。宿主APC對(duì)CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)和CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的GVHD都是必需的。供者DC的作用存在爭議，有人認(rèn)為，在快速增長腫瘤及P210細(xì)胞系轉(zhuǎn)染而成的腫瘤中，供者DC沒有GVL作用，但有人認(rèn)為，在采用相同移植模型但非P210細(xì)胞系腫瘤中，供者DC增加GVL作用。并且，選擇性去除CD11b-供者DC亞群，可以增加GVL活性，但沒有增加GVHD的發(fā)生[17]。

(d)供者間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs) 在異基因HSCT同時(shí)或者aGVHD發(fā)生后使用MSC分別減少GVHD的發(fā)生及其嚴(yán)重程度，其機(jī)制可能是通過IL-10和IFN-γ的局部釋放作用來實(shí)現(xiàn)的。來自正常自愿者的MSC通過體外擴(kuò)增后用于發(fā)生aGVHD的受者以及具有Ⅲ～Ⅳ級(jí)的激素難治性的GVHD受者，發(fā)現(xiàn)MSC與減少aGVHD風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，但是也增加了疾病復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)，這表明MSCs的免疫抑制作用可能不是選擇性作用于GVHD和GVL[18]。

2.3藥物治療

① HDAC抑制劑 HDAC抑制劑SAHA具有潛在分離GVL和GVHD的功能。SAHA與HDAC催化結(jié)合，從而引起酶的可逆性抑制。納摩爾濃度的SAHA減少TNF-α、IFN-β、IL-1β和IL-12在非惡性細(xì)胞中的數(shù)量，從而減少GVHD發(fā)生，但沒有抑制供者CTL的GVL活性；微摩爾濃度的SAHA在腫瘤細(xì)胞中具有直接抗腫瘤活性，誘導(dǎo)細(xì)胞周期停止和細(xì)胞凋亡，這是通過選擇性抑制cyclin A和增加caspase-9在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的[19]。

② 細(xì)胞因子 Th1細(xì)胞因子包括TNF-α、IL-1、IL-6，它們通過單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生；IFN-γ和IL-2通過CD4Th1/CD8Tc1細(xì)胞產(chǎn)生，它們都參與aGVHD的發(fā)生。但是，Th2細(xì)胞因子包括IL-4、IL-5和IL-10，它們在CD4Th2/CD8Tc2細(xì)胞產(chǎn)生，它們對(duì)于cGVHD的進(jìn)程更為重要[20]。管理和控制這些因子能夠抑制aGVHD和cGVHD的發(fā)展或減少其嚴(yán)重程度，但是抑制特異性細(xì)胞因子對(duì)GVL的作用目前還不清楚，同時(shí)，采用細(xì)胞因子增加GVL效應(yīng)的臨床應(yīng)用興趣也因?yàn)橥庠葱约?xì)胞因子產(chǎn)生和加重aGVHD的原因而有所減少。

在非清髓移植小鼠模型中，IFN-γ的應(yīng)用加速GVHD，來自IFN-γ敲除小鼠的供體T細(xì)胞的應(yīng)用導(dǎo)致GVHD的減少[21]。但I(xiàn)FN-γ的類似作用并沒有在清髓性移植小鼠中發(fā)現(xiàn)。在放射性清髓劑量照射的模型中，外源性IFN-γ導(dǎo)致供者T細(xì)胞對(duì)宿主異源性抗體的耐受，從而減少aGVHD發(fā)生。通過異基因特異性Treg細(xì)胞產(chǎn)生的IFN-γ通過抑制Th17和誘導(dǎo)異源性反應(yīng)T細(xì)胞凋亡而減少GVHD的嚴(yán)重性。

與GVL相關(guān)的Th1/Tc1細(xì)胞因子比較，Th2/ Tc2細(xì)胞因子參與cGVHD病理生理機(jī)制，也抑制aGVHD的發(fā)展。Th2細(xì)胞因子(IL-4、5、10等)在cGVHD的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ秃筒∪酥芯磉_(dá)上調(diào)。IL-10通過對(duì)IL-12的抑制以及樹突狀細(xì)胞共刺激分子的表達(dá)調(diào)控對(duì)GVHD起作用。IL-10誘導(dǎo)新鮮分離的和培養(yǎng)的類漿細(xì)胞樹突狀細(xì)胞的凋亡，通過激活單核/巨噬細(xì)胞抑制炎癥細(xì)胞因子(TNF-α，IL-1,IL-6)的產(chǎn)生，同時(shí)通過激活單核細(xì)胞抑制促炎趨化因子(MIP-1α、-1β、-3α、-3β，IL-8，IP-10，MIP-2)的產(chǎn)生。但是，在鼠模型中應(yīng)用IL-10，并沒有造成GVHD的減少；在人類，IL-10在血中的水平與GVHD嚴(yán)重程度密切相關(guān)。雖然血清中IL-10與GVHD相關(guān)，但I(xiàn)L-10對(duì)GVHD的預(yù)防性使用既無效，也無明顯毒性[22]。因此，Th2細(xì)胞因子在減少GVHD的同時(shí)，它們不是保留GVL活性的有效策略。

③ 優(yōu)化IL-11和角化細(xì)胞生長因子(keratinocyte growth factor，KGF) IL-11和KGF可以保護(hù)預(yù)處理所導(dǎo)致的組織損傷，并促進(jìn)損傷修復(fù)，已經(jīng)用于減少預(yù)處理相關(guān)毒性的治療中。IL-11減少GVHD嚴(yán)重程度是通過減輕預(yù)處理所致的腸道損傷和阻止LPS釋放入血的方式來實(shí)現(xiàn)的，并同時(shí)保留了穿孔素依賴的GVL活性。移植后，IL-11也極化供者T細(xì)胞轉(zhuǎn)變成Th2/ Tc2，進(jìn)而通過T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞分泌的IL-12來減少Th1/ Tc1細(xì)胞因子的生成，同時(shí)減少TNF-α水平和GVHD嚴(yán)重程度[23]。KGF減少移植小鼠GVHD，防止小鼠體重丟失和皮炎。在異基因HSCT受體的Ⅰ期臨床試驗(yàn)中，KGF減少患者黏膜炎的發(fā)生及其嚴(yán)重程度，但對(duì)植入、GVHD和存活率沒有明顯的作用[24]。

④ 減輕IL-17對(duì)GVHD的作用 IL-17是促炎細(xì)胞因子，它加強(qiáng)趨化因子、基質(zhì)金屬蛋白酶和其它細(xì)胞因子(如IL-6)的合成。盡管許多類型細(xì)胞合成IL-17，包括CD8、γδT細(xì)胞和NK細(xì)胞，但是Th17 CD4+T細(xì)胞代表唯一一種由Th0細(xì)胞產(chǎn)生的調(diào)節(jié)亞群。Th17 CD4+T細(xì)胞極化后合成IL-17、IL-21、IL-22和TNF-α。在小鼠模型中表明Th17 CD4+T細(xì)胞參與多種自身免疫性疾病。Th17 CD4+T細(xì)胞在GVHD發(fā)生中的作用沒有完全闡明。IL-17通過促進(jìn)促炎因子而有助于CD4+T細(xì)胞介導(dǎo)的GVHD的早期發(fā)展[25]。相反，最近表明，供者Th17 CD4+T細(xì)胞缺失將導(dǎo)致Th1免疫功能加強(qiáng)和GVHD加重，這些不一致的現(xiàn)象可能與Th17誘導(dǎo)的促炎環(huán)境不同有關(guān)[26]。

⑤ 靶向次級(jí)組織相容性抗原(minor histocompatibility antigen，MiHA) HA-1、HA-2在造血細(xì)胞表達(dá)，在一些實(shí)體瘤(如腎癌)也表達(dá)，但不在上皮組織表達(dá)。在臨床前模型和臨床試驗(yàn)中，MiHA被作為抗腫瘤作用靶點(diǎn)。來自HA-1和HA-2陰性供者T細(xì)胞將靶向HA-1或HA-2陽性的腫瘤細(xì)胞。HA-1和HA-2特異性CTL能根除人類實(shí)體瘤，同時(shí)伴有IFN-γ釋放。HA-1特異性CTL廣泛分布并在免疫缺陷鼠中能阻止人類乳腺癌的擴(kuò)散[27]。當(dāng)供者T細(xì)胞對(duì)MiHA起作用，將可能引起GVL作用而沒有GVHD。

⑥ 腫瘤疫苗 為了加強(qiáng)腫瘤特異性免疫溶解活性而不誘導(dǎo)產(chǎn)生GVHD，建立在腫瘤相關(guān)抗原基礎(chǔ)之上的疫苗已被廣泛關(guān)注。一些腫瘤特異性抗原(蛋白酶-3、WT-1和BCR-ABL)能夠誘導(dǎo)腫瘤特異性異源反應(yīng)。針對(duì)組織特異性MiHA(HA-1、HA-2)和白血病特異性抗原(蛋白酶-3、WT-1和BCR-ABL)的疫苗可能加強(qiáng)GVL而不會(huì)增加GVHD[28]。并且，由樹突狀細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞通過融合而組成的疫苗可以誘導(dǎo)T細(xì)胞靶向腫瘤相關(guān)性抗原，從而保留GVL但無GVHD作用[29]。

3 結(jié)語

綜上所述，雖然GVHD 和GVL 在某些方面有關(guān)聯(lián) ，但現(xiàn)今的研究揭示，如果我們合理利用一些分離策略，能夠在降低 GVHD 的同時(shí)保留GVL，這也為異基因骨髓移植提供了更為光明的前途。

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Advanceinmechanismsandstrategiesofseparationbetween
graft-versus-hostdiseaseandgraft-versus-leukemiaeffect

LUO Hao, KE Dan
(TongjiMedicalCollegeHospital,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430030,China.E-mail:kedan@mail.hust.edu.cn)

Graft-versus-host disease (GVHD) is an important factor and has significant influence on survival after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT). Graft-versus-leukemia (GVL) effect is a key factor that affects the treatment and recurrence after allo-HSCT. In order to increase the validity and safety on allo-HSCT in clinical application, the detailed mechanisms of GVHD and GVL are investigated, and the separation of GVL from GVHD in allo-HSCT, including early prediction and diagnosis of GVHD, modification of donor graft cells and drug intervention, is extensively studied.

Stem cells; Transplantation; Graftvshost disease; Graftvsleukemia effect

1000-4718(2011)12-2423-06

R363

A

10.3969/j.issn.1000-4718.2011.12.037

2011-05-13

2011-09-22

△通訊作者 Tel: 027-83692625; E-mail: kedan@mail.hust.edu.cn