潘秀南 廖泰全
(海南省澄邁縣人民醫(yī)院檢驗科,海南 澄邁 571900)
尿干化學(xué)(dry chemistry)檢測具有檢測項目多、所需尿量少、結(jié)果檢測精密度高等優(yōu)點,擴(kuò)大了尿液檢查的內(nèi)涵,極大提高了工作效率。但是,由于尿液成分復(fù)雜,干化學(xué)項目繁多,其檢測原理各不相同,所以影響因素很多[1,2]?,F(xiàn)根據(jù)筆者多年來的工作實踐和相關(guān)文獻(xiàn)報道,將尿干化學(xué)檢測中的常見影響因素總結(jié)如下。
最好收集中段尿,女性患者尿液標(biāo)本中應(yīng)避免混入經(jīng)血和陰道分泌物,男性患者如同時進(jìn)行前列腺和精液檢查,必須先收集尿液標(biāo)本。干化學(xué)檢查不可應(yīng)用加入抑制劑(如氟化鈉)和防腐劑(如甲苯、甲醛)的尿液,這些化學(xué)試劑會對某些成分的測定形成直接的影響。
干化學(xué)檢查要求尿液應(yīng)新鮮,標(biāo)本留取后越早檢查越好,從尿液的排出到檢驗應(yīng)在2h內(nèi)完成。尿液放置時間過長,不僅可分解破壞尿液中的管型、紅細(xì)胞,白細(xì)胞等有形成分,造成這些有形成分干化學(xué)陽性而鏡檢陰性的所謂假陽性。還可因細(xì)菌等各種因素引起尿液化學(xué)成分的改變,如由于尿中細(xì)菌的大量繁殖使葡萄糖和蛋白質(zhì)的分解;細(xì)菌分解尿素,使尿液PH值增高;久置使尿中尿素分解和鹽類析出形成結(jié)晶,以致尿比重下降;膽紅素在陽光照射下成為膽綠素,使膽紅素含量減少或呈假陰性;尿膽原見光分解成尿膽素,以致尿膽原減少或呈假陰性;乙酰乙酸是酮體的主要形式,尿標(biāo)本的長時間放置,會降低酰乙酸含量逐漸,而逐漸升高β-羥丁酸和丙酮的含量,由于三種酮體物質(zhì)檢測的靈敏度差異甚大,可造成檢測結(jié)果很多大的差異。
由于同一項目不同廠家的試紙反應(yīng)原理也不盡相同,尿試紙帶各項目的反應(yīng)原理不同,所以應(yīng)選擇與尿液分析儀相配套的試紙條,同時各實驗室不可頻繁更換試紙廠家。尿液試紙開封后應(yīng)一周內(nèi)用完,且每次使用后必須塞緊筒蓋,避免放入冰箱保存,以導(dǎo)致其吸水變質(zhì)或空氣氧化。室溫保存在15 ℃~25 ℃的通風(fēng)干燥處為宜。一般試紙浸濕時間要求控制在1~2s的時間內(nèi),室內(nèi)溫度增高和浸濕時間的延長,會增強(qiáng)蛋白質(zhì)、葡萄糖、尿膽原和膽紅素的陽性,減弱酮體陽性,導(dǎo)致PH降低。浸濕后的試紙帶不宜甩動,以免互相污染影響結(jié)果,同時禁止用手觸摸試紙帶上任何一個測試模塊。
藥物具有生物活性,藥物本身及其代謝產(chǎn)物干擾尿液測定的現(xiàn)象并非少見。臨床治療中濫用抗生素的現(xiàn)象時有發(fā)生,許多新藥對臨床檢驗的干擾還尚未發(fā)現(xiàn)。藥物因素對檢驗結(jié)果的影響始終困擾著檢驗工作者,有時甚至是難以避免的。青霉素是臨床最常用的抗生素,滴注后76%于6 h內(nèi)以原形從尿中排出。青霉素結(jié)構(gòu)中含有的肽鍵與蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)類似,可增強(qiáng)磺柳酸法結(jié)果,減弱干化學(xué)法結(jié)果。干化學(xué)法的原理是試紙帶膜塊上pH值的變化。青霉素分子結(jié)構(gòu)中的-COOH可電離出H+,該離子可導(dǎo)致pH值的變化而減弱尿蛋白的陽性。因此,對于靜脈滴注青霉素治療的患者,尿液檢查最好選擇在5~6 h后,應(yīng)考慮到不同的測定方法應(yīng)的不同干擾作用,干化學(xué)法減弱結(jié)果甚至為假陰性。氧哌嗪是青霉素的衍生物,其分子結(jié)構(gòu)中含有兩個牢固結(jié)合的肽鍵,與磺柳酸可發(fā)生明顯的結(jié)合,可產(chǎn)生類似尿蛋白的假陽性反應(yīng)。氧哌嗪青霉素不影響干化學(xué)法的檢測,而影響磺柳酸法尿蛋白的測定。因此,臨床檢驗時在遇到磺柳酸法尿蛋白強(qiáng)陽性,與顯微鏡檢查或儀器檢測結(jié)果明顯不符時,應(yīng)了解用藥史,詳細(xì)詢問病情,及時反饋給臨床。另外,尿中含大量慶大酶素和頭孢時,可降低白細(xì)胞的檢測結(jié)果,出現(xiàn)與鏡檢結(jié)果不符的現(xiàn)象。尿液中含有呋喃坦啶和大量膽紅素時,可對白細(xì)胞的顯示色反應(yīng)形成干擾,升高白細(xì)胞的測定結(jié)果。
維生素C是最常用的維生素類藥物。本藥口服或滴注后體內(nèi)代謝快,水溶性好,尿中濃度迅速升高。高濃度的維生素C可使尿中葡萄糖、隱血、膽紅素和亞硝酸鹽的結(jié)果減弱或出現(xiàn)假陰性。維生素C具有較強(qiáng)的還原性,對尿液成分測定的影響機(jī)制可理解為競爭性抑制反應(yīng)。維生素C通過還原過氧化氫,在一定程度上降低了過氧化氫的濃度,從而影響到葡萄糖的測定。維生素C對尿隱血的影響與葡萄糖類似,通過對試紙帶膜塊上過氧化物的還原,使亞鐵血紅素還原過氧化物釋放出的[O]減少,影響到色原(鄰連甲苯胺或四甲基聯(lián)苯胺)的氧化。高濃度的維生素C抑制偶氮反應(yīng)和重氮化反應(yīng),從而干擾膽紅素和亞硝酸鹽的測定。一般認(rèn)為,常規(guī)劑量口服維生素C不會影響實驗結(jié)果,但大劑量口服特別是靜脈滴注時,可在30min迅速升高尿中維生素C的濃度,并且隨著尿液的濃縮其濃度不斷上升。不同批號的試紙抗維生素C的干擾不同,不同濃度的維生素C對尿液檢查的影響不同,同樣濃度的維生素C對尿液中不同成分的影響也不相同。從事尿液分析的檢驗人員,應(yīng)參照本實驗室的試紙和儀器,建立健全維生素C在多大濃度范圍內(nèi)才對以上實驗影響程度及產(chǎn)生的影響如何,選擇維生素C滴注后的最短取尿時間。
尿液如被他氧化性污染物,如:84消毒液污染,試紙帶與污染物起氧化反應(yīng)可致潛血出現(xiàn)假陽性結(jié)果。尿液如受季胺類化合物污染,可導(dǎo)致蛋白出現(xiàn)弱陽性。
除了干化學(xué)試紙帶受諸多因素的影響外,不同尿液分析儀檢測的靈敏度也有所不同。目前,任何一臺尿液分析儀對顯微鏡檢查的起到過篩實驗的作用,即使可進(jìn)行胞分布直方圖及無玻片鏡檢細(xì)報告的電腦遙控顯像尿液分析儀,也不能完全取代顯微鏡。基于以上原因,實驗室需要常規(guī)鏡檢的情況至少應(yīng)包括:①標(biāo)本留取前使用了對尿液檢查有影響的藥物紅細(xì)胞、亞硝酸鹽、白細(xì)胞、尿蛋白有陽性者或四項均陰性而尿維生素C(++)以上;②泌尿系統(tǒng)或可疑泌尿系統(tǒng)疾病的患者;③近期內(nèi)尿檢異常正在治療觀察的患者。④尿液混濁或尿色異常者;⑤可疑尿中有腎上皮細(xì)胞、管型、病理性結(jié)晶、亞硝酸鹽還原酶陰性的細(xì)菌等異常成分。
以上所述各種影響因素都是在日常檢驗工作中經(jīng)常遇到的,所以我們要高度重視,必要時在報告中注明,為臨床提供客觀、準(zhǔn)確的檢驗依據(jù)。
[1]葉應(yīng)嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006.
[2]黃山,許健,鄧小林.醫(yī)學(xué)實驗室全面質(zhì)量管理理論與實踐[M].貴州:貴州科技出版社,2009.