抗腫瘤新星蟾蜍毒素的臨床應(yīng)用及其機(jī)制的研究進(jìn)展

吳紀(jì)霞

（安徽省蚌埠市第一人民醫(yī)院，安徽 蚌埠 233000）

腫瘤一直被譽(yù)為不治之癥，長期以來，人們談瘤色變，惡性腫瘤嚴(yán)重威脅人類健康，除傳統(tǒng)的化、放療、手術(shù)治療方法。目前，中藥抗腫瘤越來越受到人們的關(guān)注。蟾蜍毒素就是其中之一。很多研究發(fā)現(xiàn)其具有抗腫瘤功效，早已被廣泛應(yīng)用于臨床。近來隨著藥理作用和臨床應(yīng)用的深入研究，發(fā)現(xiàn)蟾蜍毒素抗腫瘤作用顯著，并且對抗腫瘤的機(jī)制也有了初步的了解，現(xiàn)已有多種蟾蜍毒素抗腫瘤制劑如華蟾素、蟾蜍靈，現(xiàn)對蟾蜍毒素抗腫瘤的作用和最新研究進(jìn)展作一綜述。

1 蟾蜍毒素的抗腫瘤作用的臨床研究

近幾年來，很多關(guān)于蟾蜍毒素治療中晚期患者出現(xiàn)奇效的報道，隨之臨床研究也越來越多。臨床觀察，含有蟾蜍毒素成分的中藥復(fù)合制劑可以治療肝癌、肺癌、食管癌、直腸癌及白血病等。大量臨床和實(shí)驗研究證明，蟾蜍毒素具有臨床抗腫瘤作用，不良反應(yīng)少，效果明顯，可改變患者一般狀況，提高生活質(zhì)量；與化療合用，可減輕患者癥狀，并且可減輕化療后不良反應(yīng)；與放療合用可增加放療敏感性，減輕放療的副作用。陳靜[1]等最新研究報道華蟾素治療老年性惡性腫瘤觀察可明顯提高患者生活質(zhì)量，延長生存期。蘇勁[2]等報道華蟾素有抗膀胱腫瘤的作用。肖家全[3]等也報道了華蟾素抗膀胱腫瘤的作用。朱琳[4]等研究華蟾素治療中晚期肺癌肺癌與化療比較可提高患者生活質(zhì)量，延長生存期，副作用小等優(yōu)點(diǎn)。周道安[5]等研究發(fā)現(xiàn)放射治療聯(lián)合華蟾素治療食道癌效果優(yōu)于純放療組，減少副作用。孫中杰[6]等報道華蟾素配合TACE治療肝癌能提高療效，改善機(jī)體免疫力。盧香蘭[7]等研究蟾蜍毒素混合物對白血病K5 62敏感株和耐柔紅霉素株細(xì)胞的殺傷作用。趙明芳等[8]研究高、中劑量的蟾蜍毒素可以明顯延長艾氏腹水癌小鼠的生存時間。此外，還有華蟾素治療老年性皮膚原位癌、喉癌、乳腺癌、子宮癌等報道。華蟾素的研究越來越深入，應(yīng)用越來越廣泛。

2 蟾蜍毒素抗腫瘤作用的機(jī)制

蟾蜍毒素多種途徑抑制腫瘤細(xì)胞的增值和生長，主要包括以下幾個方面：

2.1 直接作用于腫瘤細(xì)胞的DNA和RNA的合成

DNA是主要的遺傳物質(zhì)，RNA是遺傳物質(zhì)的載體，在RNA病毒中，RNA是遺傳物質(zhì)，正常機(jī)體含量穩(wěn)定，當(dāng)二者含量增多，異常表達(dá)時，導(dǎo)致細(xì)胞惡化。很多腫瘤化療藥物的作用靶點(diǎn)是作用于DNA化學(xué)結(jié)構(gòu)、影響DNA轉(zhuǎn)錄或抑制DNA依賴RNA聚合酶而抑制RNA合成、或影響核酸合成。蟾蜍毒素的研究過程中，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)蟾蜍毒素可抑制腫瘤細(xì)胞DNA 和RNA的合成而抑制腫瘤。陳華等[9]研究發(fā)現(xiàn)華蟾素注射液可下調(diào)TOPOⅠmRNA表達(dá)，表現(xiàn)濃度依賴效應(yīng)。關(guān)均等[10]用華蟾素注射液給H22腹水型肝癌細(xì)胞小鼠注射研究發(fā)現(xiàn)華蟾素能明顯抑制其DNA和RNA的生物合成。田普訓(xùn)等[11]研究發(fā)現(xiàn)，隨蟾酥脂質(zhì)體治療劑量的增高，使DNA 合成減少。

2.2 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制

細(xì)胞調(diào)亡是由體內(nèi)外某些因素觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)預(yù)存的死亡程序而導(dǎo)致的細(xì)胞主動性死亡過程。該過程的正常與紊亂與機(jī)體進(jìn)行新陳代謝、保持自身相對穩(wěn)定以及腫瘤發(fā)生等密切相關(guān)，而很多腫瘤細(xì)胞正是因為凋亡機(jī)制被抑制才是腫瘤細(xì)胞生長旺盛，失去控制，很多腫瘤藥物是通過促細(xì)胞凋亡達(dá)到抑制腫瘤的作用。近年來很多的研究結(jié)果表明誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡是蟾蜍毒素抗腫瘤的主要機(jī)制，而且是目前研究蟾蜍制劑抗腫瘤的熱點(diǎn)課題。據(jù)研究，蟾蜍毒素能誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡。王鍇[12]等最新研究表明蟾蜍毒素可通過依賴caspasc-3誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡。蘇勁等[2]研究華蟾素對原位膀胱癌和肖家全等[3]研究華蟾素對膀胱癌治療的機(jī)制是一致的，都是誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡而發(fā)揮抗腫瘤的作用。丁海玲等[13]研究發(fā)現(xiàn)蟾蜍混合物可以誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞SMMC7721細(xì)胞凋亡。。周曉紅等[14]研究顯示華蟾素能通過誘導(dǎo)HEC-1-B細(xì)胞凋亡，從而抑制HEC-1-B細(xì)胞生長，并且降低細(xì)胞的侵襲能力。王玲玲[15]等研究也得出相同的結(jié)論。韓鴻彬[16]等研究顯示華蟾素對胃癌細(xì)胞具有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用，細(xì)胞凋亡發(fā)生率呈劑量和時間依賴性。王焰等[17]研究華蟾素能抑制NB4生長并誘導(dǎo)凋亡。趙明芳等[8]也研究蟾酥可以誘導(dǎo)HL60、K562、NB4、OVCAR3細(xì)胞的凋亡。除此之外，還有很多關(guān)于蟾蜍毒素誘導(dǎo)不同腫瘤細(xì)胞凋亡的報道，可見誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是蟾蜍毒素抗腫瘤最主要的機(jī)制。

2.3 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的分化

腫瘤組織在形態(tài)和功能上可以表現(xiàn)出與某種正常組織相似之處，這種相似性稱為腫瘤的分化，分化程度的高低直接影響腫瘤的惡性程度。有些抗腫瘤藥就是通過誘導(dǎo)細(xì)胞分化發(fā)揮抗腫瘤的作用。很多研究發(fā)現(xiàn)蟾蜍毒素?fù)?jù)有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化的作用。趙明芳等[8]研究顯示蟾蜍毒素可增強(qiáng)ATRA對NB4及APL原代培養(yǎng)細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用。韓仲明等[18]研究華蟾素對喉癌細(xì)胞Hep-2細(xì)胞具有誘導(dǎo)分化作用。Yamada等[19]發(fā)現(xiàn)蟾毒靈在功能上和形態(tài)上均能誘導(dǎo)白血病細(xì)胞的分化，并與全反式維甲酸有協(xié)調(diào)作用。Zhang等[20]報道，蟾蛛靈誘導(dǎo)黑素瘤 B16-F10細(xì)胞分化刺激其黑色素的合成和釋放。

2.4 抑制腫瘤血管的生成

腫瘤有誘導(dǎo)血管生成的能力。腫瘤血管的形成對腫瘤的生長、浸潤、轉(zhuǎn)移至關(guān)重要。抑制腫瘤血管生成已經(jīng)成為治療腫瘤新途徑。Lee等[21]用蟾蜍靈處理牛主動脈內(nèi)皮細(xì)胞（BAE），發(fā)現(xiàn)可通過抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖使血管生成受到抑制。王南瑤等[22]研究發(fā)現(xiàn)，華蟾素對雞胚尿囊膜新生血管有抑制作用，用藥后新生血管完全抑制或明顯減少。劉浩等[23]研究發(fā)現(xiàn)華蟾素能減少瘤內(nèi)血管密度、降低瘤內(nèi)VEGF表達(dá)及血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上VEGFR-2蛋白表達(dá)，從而抑制腫瘤血管的發(fā)生。由此可見，蟾蜍毒素也可以通過抑制腫瘤血管抗腫瘤作用。

2.5 影響癌基因的表達(dá)

癌基因能引起動物腫瘤或在體外實(shí)驗中能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。張莉等[24]報道華蟾素能使白血病U937細(xì)胞bcl-2表達(dá)及Fas-1 mRNA水平下降，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。王鍇等[12]發(fā)現(xiàn)蟾蜍毒素可以下調(diào)凋亡蛋白抑制因子livin表達(dá)從而抑制胃癌細(xì)胞MGC803細(xì)胞的生長起到治療胃癌的作用。王焰等[17]研究報道華蟾素能抑制人早幼粒白血病細(xì)胞株NB4生長并誘導(dǎo)凋亡.可能是通過下調(diào)Bcl-2的表達(dá).增加Fas的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)。段佩浩等[25]研究發(fā)現(xiàn)蟾毒靈通過下調(diào)Bcl-2基因的表達(dá)抑制人胰腺癌BxPC-3細(xì)胞的生長.誘導(dǎo)其凋亡。顧偉等[26]研究報道，蟾毒靈對裸鼠人肝癌原位移植模型有明顯的抗腫瘤作用，其作用機(jī)制可能與上調(diào)Bax表達(dá)、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)。除此之外，還有很多更早的研究也都證明了蟾蜍毒素的此作用。

2.6 影響腫瘤細(xì)胞周期調(diào)控

細(xì)胞從一次分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為止的一個過程稱為細(xì)胞周期細(xì)胞周期的進(jìn)行受許多基因蛋白的調(diào)控，當(dāng)這種調(diào)控異常時，就會出現(xiàn)細(xì)胞無限制增長，形成腫瘤。很多抗腫瘤藥是細(xì)胞周期抑制劑，或通過抑制腫瘤細(xì)胞的某個時期起到殺傷腫瘤的作用。很多研究報道，蟾蜍毒素通過抑制腫瘤細(xì)胞的不同時期起到治療腫瘤的作用。殷文瑾等[27]最新報到華蟾素通過調(diào)控cyclin A1、cyclin D1、cyclin E1和p21的表達(dá)而抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖和侵襲。殷佩浩等[25]研究發(fā)現(xiàn)毒靈顯著抑制人胰腺癌BxPC-3細(xì)胞的生長.誘導(dǎo)其凋亡，阻滯細(xì)胞于G2/M期。呂靜等[28]研究顯示華蟾素可使膀胱癌細(xì)胞株T24阻滯在G0/G1期，抑制細(xì)胞生長。王玲玲等[15]研究顯示華蟾素能有效地抑制Ishikawa細(xì)胞的增殖，降低侵襲能力，誘導(dǎo)細(xì)胞調(diào)亡，并使細(xì)胞周期阻滯于G1期，減少S和G2期的細(xì)胞。

2.7 逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的多藥耐藥

腫瘤化療是腫瘤三大治療方法之一，但不幸的是腫瘤常常發(fā)生耐藥性，特別是復(fù)發(fā)的腫瘤?？赏瑫r對多種腫瘤藥發(fā)生耐藥性，從而限制了腫瘤化療的作用，逆轉(zhuǎn)耐藥性或防止耐藥現(xiàn)象發(fā)生有重要理論及實(shí)際意義。孟曉燕等[29]研究發(fā)現(xiàn)蟾毒靈對人肝癌多藥耐藥BEL-7402/5-FU細(xì)胞無交叉耐藥性，有增殖抑制作用，且呈時間、濃度依賴，其作用可能通過阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的。

3 展 望

蟾蜍毒素作為一種新型抗腫瘤中藥制劑，已被廣泛應(yīng)用于腫瘤臨床，有望成為療效顯著，副作用少的抗瘤新星，對中、晚期癌癥患者，尤其是失去手術(shù)機(jī)會，沒有放療條件及不能接受化療的患者來說，是一種有希望的抗癌藥物并且在腫瘤的放、化療過程中能減少其毒副作用，增加患者對放、化療的耐受性， 提高腫瘤細(xì)胞對放、化療產(chǎn)生的凋亡誘導(dǎo)作用的敏感性，從而提高療效或在相同療效下減輕放、化療的劑量，逆轉(zhuǎn)多藥耐藥。目前已經(jīng)研制的制劑有蟾酥注射液、華蟾素注射液、復(fù)方蟾皮膠囊等，都顯示出抗腫瘤的良好作用，如果進(jìn)一步明確藥理活性和作用機(jī)制及其提取工藝，研制出更純、更新、更有效的制劑，使其成為新一代高效、低毒的抗癌藥物指日可待。

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