薄層液基細(xì)胞學(xué)與高危型人乳頭瘤病毒DNA檢測(cè)及陰道鏡聯(lián)合檢查在宮頸病變中的臨床應(yīng)用

承莉

薄層液基細(xì)胞學(xué)與高危型人乳頭瘤病毒DNA檢測(cè)及陰道鏡聯(lián)合檢查在宮頸病變中的臨床應(yīng)用

承莉

目的 探討宮頸病變的篩查方法及其臨床價(jià)值。方法 對(duì)540例TCT異常患者行HC-II（Hybird Capture-II）高危型HPV-DNA檢測(cè)，其中120例細(xì)胞學(xué)結(jié)果為ASC的患者因高危型HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果陰性未進(jìn)行陰道鏡檢查，余均行陰道鏡檢查及多點(diǎn)活檢組織病理學(xué)檢查。結(jié)果 液基細(xì)胞學(xué)與HPVDNA檢測(cè)結(jié)果比較，ASCUS、LSIL、HISL陽(yáng)性率分別為36%、53.3%、61.3%，P＜0.05；HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果與病理結(jié)果比較,炎癥、CINI、CINII-III陽(yáng)性率分別為67.2%、68.2%、91.9%，P＜0.05，有顯著性差異。結(jié)論 TCT是宮頸病變篩查中是首選方法，聯(lián)合高危型HPV-DNA檢測(cè)及陰道鏡檢查則能提高宮頸病變的檢出率。

薄層液基細(xì)胞學(xué)；高危型人乳頭瘤病毒；陰道鏡；宮頸上皮內(nèi)瘤變

目前，宮頸癌在女性中的發(fā)病率僅次于乳腺癌，位居第二。統(tǒng)計(jì)顯示，我國(guó)每年新發(fā)病例13.5萬(wàn)，約占世界的1/4。宮頸癌與人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染有明確關(guān)系［1］。宮頸上皮內(nèi)瘤變是與宮頸浸潤(rùn)癌密切相關(guān)的一組癌前病變，它反映宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的連續(xù)過(guò)程[2]。因此，早期發(fā)現(xiàn)和治療子宮頸的早期病變，是預(yù)防子宮頸癌發(fā)生的關(guān)鍵。本研究采用液基細(xì)胞學(xué)方法在普通婦科門診進(jìn)行宮頸癌篩查3679例，對(duì)540例細(xì)胞學(xué)結(jié)果異常患者行高危型HPV-DNA檢測(cè)，并進(jìn)行陰道鏡下宮頸多點(diǎn)活檢，通過(guò)組織病理學(xué)比較，評(píng)價(jià)液基細(xì)胞學(xué)檢查聯(lián)合高危型HPV-DNA檢測(cè)及陰道鏡檢查對(duì)宮頸病變的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年12月～2011年2月我院婦科門診就診行宮頸細(xì)胞學(xué)篩查患者3679例，年齡25～70歲，結(jié)果異常者540例，且均行HC-II（Hybird Capture-II）高危型HPV-DNA檢測(cè)，其中120例細(xì)胞學(xué)結(jié)果為ASC的患者因高危型HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果陰性未進(jìn)行陰道鏡檢查,余均行陰道鏡檢查及多點(diǎn)活檢組織病理學(xué)檢查。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本的采集 采集前輕輕用無(wú)菌干棉簽擦除宮頸表面粘液，保持適當(dāng)壓力將液基細(xì)胞刷插入宮頸管內(nèi)約1cm，使細(xì)胞刷呈扇形，順時(shí)針或逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)3圈，收集宮頸外口及宮頸管的脫落細(xì)胞，洗入裝有Autocyte prep保存液小瓶中，保存液中的標(biāo)本經(jīng)Thinprep2000系統(tǒng)程序化處理(將標(biāo)本中的黏液、血液和炎細(xì)胞與上皮細(xì)胞分離,經(jīng)高精密度濾器過(guò)濾后轉(zhuǎn)移到靜電處理過(guò)的載玻片上),制成直徑為2cm的薄層細(xì)胞涂片,95%酒精固定,巴氏染色,根據(jù)TBS分級(jí)做出描述性診斷報(bào)告。

1.2.2 細(xì)胞學(xué)診斷方法 采用2001年TBS分類法［3］：（1）正常范圍（WNL）。（2）鱗狀上皮細(xì)胞異常：①不典型鱗狀細(xì)胞（ASC）,分兩類意義未明的不典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）和不能排除高度上皮內(nèi)病變的不典型細(xì)胞（ASC-H）;②鱗狀上皮內(nèi)低度病變（LSIL）;③鱗狀上皮內(nèi)高度病變（HSIL）;④鱗狀細(xì)胞癌（SCC）;⑤不典型腺細(xì)胞（AGC）。（3）腺細(xì)胞異常：①不典型腺細(xì)胞（AGC）；②宮頸管原位癌（AIS）；③腺癌。

1.2.3 宮頸活檢組織病理組織學(xué)檢查 對(duì)420例患者行陰道鏡指引下多點(diǎn)活檢送病理。按TBS方案統(tǒng)一組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)診斷術(shù)語(yǔ)，低度上皮內(nèi)病變（LSIL）宮頸上皮內(nèi)瘤變I級(jí)（CINⅠ）和宮頸人乳頭瘤病毒感染，高度上皮內(nèi)病變（HSIL）含CINⅡ及其以上病變（CINⅢ）。

1.2.4 陰道鏡檢查 用棉球輕輕擦去宮頸分泌物，調(diào)焦距，用3%～5%醋酸棉球浸濕宮頸表面60s后取出，等待1～2min，觀察宮頸的上皮變化：(1)病變的區(qū)域性分布；(2)上皮的顏色和渾濁度；(3)表面構(gòu)型；(4)血管結(jié)構(gòu)。其中醋白上皮、點(diǎn)狀血管和鑲嵌三個(gè)特征是CIN最常見(jiàn)的異常陰道鏡所見(jiàn)。然后用3%復(fù)方碘溶液涂布宮頸表面，在碘不著色區(qū)活檢，如陰道鏡不滿意，加行頸管搔刮。

1.2.5 HPV-DNA檢測(cè)取宮頸管分泌物用美國(guó)Digene公司生產(chǎn)的第二代基因雜交捕獲信號(hào)放檢測(cè)系統(tǒng)（Hybird Capture,HC-II）檢測(cè)。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理x2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 液基細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果 液基細(xì)胞學(xué)宮頸癌篩查標(biāo)本例，WNL 3139例（85.32%），ASC 375例（10.19%），LSIL 90例（2.45%），HSIL 75例（1.33%）。

2.2 液基細(xì)胞學(xué)與病理結(jié)果 ASC中CINI6.27%（16/255），CINII-III7.45%（19/255）；LSIL中CINI25.56%（23/90），CINII-III27.78%（25/90）；HSIL中CINI33.33%（25/75），CINII-III 56%（42/75）（見(jiàn)表1）。

2.3 HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果 540例細(xì)胞學(xué)異常的患者均行HPV-DNA檢測(cè)，其中120例細(xì)胞學(xué)結(jié)果為ASC的患者因高危型HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果陰性未進(jìn)行陰道鏡檢查；余均行陰道鏡下活檢組織病理學(xué)檢查，隨病變級(jí)別升高HPV陽(yáng)性率呈遞增趨勢(shì)，陽(yáng)性率有顯著差異性,HSIL、LSIL組與ASC組比較HPV-DNA陽(yáng)性率差異有顯著性，P＜0.05。HSIL組與LSIL組比較HPVDNA陽(yáng)性率無(wú)差異，(x2:1.068,P＞0.05)（見(jiàn)表2）。如表1所示在ASCUS且HPV陽(yáng)性中有1例為扁平濕疣，220例為炎癥；75例HSIL中宮頸活檢結(jié)果有3例為炎癥伴鱗狀上皮化生見(jiàn)挖空細(xì)胞，高危型HPV-DNA均為陽(yáng)性。在CINII-III中，僅有1例為高危型HPV-DNA陰性，其宮頸細(xì)胞學(xué)結(jié)果為L(zhǎng)SIL。SCC組3例，且全部病例HPV陽(yáng)性，本組陽(yáng)性率100%，但由于樣本量過(guò)少，現(xiàn)不與其他組進(jìn)行比較。

表1 液基細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果與病理結(jié)果比較

表2 液基細(xì)胞學(xué)與HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果

表3 HPV-DNA檢測(cè)結(jié)果與病理結(jié)果比較

3 討論

CIN約10年發(fā)展為原位癌，原位癌發(fā)展為浸潤(rùn)癌約需3～10a，而CIN發(fā)展為浸潤(rùn)癌可能需10～15a，因此早期篩查、早期診斷、早期治療，將其阻斷在癌前病變階段，在宮頸癌的防治工作中占有非常重要的地位[4]。

液基薄層技術(shù)采用液體存儲(chǔ)宮頸細(xì)胞，自動(dòng)化制片，制成細(xì)胞單層、背景清晰的薄片，避免了常規(guī)刮片中因黏液、血液及炎性細(xì)胞的遮蓋導(dǎo)致的漏診［5］，提高了細(xì)胞學(xué)的準(zhǔn)確性，1996年美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于臨床。美國(guó)癌癥學(xué)會(huì)(ACS)2004年版宮頸癌普查最新指南指出[6]:建議經(jīng)陰道性交大約3年后應(yīng)開(kāi)始宮頸癌的普查,30歲之前的應(yīng)每年做1次常規(guī)的宮頸細(xì)胞學(xué)檢查,或者每?jī)赡曜?次液基細(xì)胞學(xué)檢查,對(duì)那些連續(xù)3次細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果正?；蜿幮缘呐?到30歲以后可每2～3年普查1次,70歲以上的婦女,如果有連續(xù)3年以上細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果正?；蜿幮?同時(shí)在70歲以前的10年里沒(méi)有異?；蜿?yáng)性細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果,可以選擇停止宮頸癌的普查。ACS強(qiáng)調(diào)這些檢查結(jié)果必須有高效的技術(shù)保障為前提,使檢查結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤,目前高效的TCT技術(shù)在發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)廣泛使用,目前液基細(xì)胞學(xué)是宮頸病變的主要篩查手段。

陰道鏡檢查是CIN和早期宮頸癌的重要輔助診斷方法之一。能迅速有效的鑒別宮頸有無(wú)病變；準(zhǔn)確定位，顯著提高了活檢的命中率[6]。對(duì)于細(xì)胞學(xué)異常的，應(yīng)該進(jìn)行陰道鏡檢查，特別是對(duì)于HSIL和可疑早期浸潤(rùn)癌應(yīng)給予優(yōu)先檢查。我國(guó)由于受病理技術(shù)力量及采樣等因素影響，故宮頸細(xì)胞學(xué)有一定的漏診及誤診率。對(duì)高危型HPV-DNA陽(yáng)性者應(yīng)加強(qiáng)警惕，聯(lián)合陰道鏡可提高細(xì)胞異常的檢出率，并有助于對(duì)疾病的了解及預(yù)后。

持續(xù)的高危型HPV感染是宮頸癌發(fā)生的高危因素。靈敏的HPV核酸檢測(cè)對(duì)于腫瘤進(jìn)展的評(píng)估是非常有價(jià)值的。細(xì)胞涂片為ASC-US女性中，如果HPV核酸檢測(cè)為陰性，腫瘤進(jìn)展的危險(xiǎn)性則非常低。故本次研究中我院對(duì)細(xì)胞涂片為ASC-US，HPV核酸檢測(cè)為陰性的女性，未行陰道鏡檢查，而是轉(zhuǎn)為3～6個(gè)月復(fù)查宮頸細(xì)胞學(xué)密切隨訪。對(duì)于較高年齡的女性，如HPV核酸檢測(cè)為陽(yáng)性，也應(yīng)轉(zhuǎn)至陰道鏡檢查。陰道鏡不滿意者，需行活檢及頸管搔刮。據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，在美國(guó)，已同時(shí)使用液基細(xì)胞學(xué)和HPV檢測(cè)作為宮頸癌的篩查，對(duì)于這雙向檢測(cè)均為陰性的個(gè)體進(jìn)展為高級(jí)別的宮頸癌前病變以及宮頸癌的可能性幾乎為零[7]。因此液基細(xì)胞學(xué)聯(lián)合高危型HPV-DNA檢測(cè)及陰道鏡檢查則更能提高宮頸病變的檢出率。

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Objective The clinical value of cytology high-risk human papillomavirus (HR-HPV) testing and colposcope in diagnosis of precancerous diseases. Methods 540 women with abnormal cervical smear were screened by using HPV DNA testing hybrid capture II(HC-II),Among those cases 120 women with high-risk human papillomavirus (HR-HPV) testing negatively cervical smear ASC,were not

Colposcopy.Simultaneously the rest cases were received by colposcopy and colposcope directed biopsy. Results Among 420 cases the positive rates of HR-HPV as ASCUS,LSIL and HSIL were 36%,53.3%,61.3%respectively (P＜0.05). the positive rates of HR-HPV as infl ammation ,CINI and CINII-III were 67.2%,68.2%,91.9% (P＜0.05) ,which have signifi cant deviation.Conclusion Cytology is the preferred method for screening cervical precancerous diseases. Cytology combined with HR-HPV testing and colposcopy can increase the detectable rate of cervical cancer.

Autocyte pap smear fl uid - based system; High-risk human pappilomavirus; Colposcope; Cervical intraepithelial neoplasia

10.3969/j.issn.1009-4393.2011.26.020

213001 蘇州大學(xué)附屬常州腫瘤醫(yī)院（承莉）