歐洲花楸組織培養(yǎng)育苗技術的研究

周 鑫 張樹寶 宋洪文

(黑龍江林業(yè)職業(yè)技術學院 生態(tài)工程系，黑龍江 牡丹江 157011)

歐洲花楸(Sorbusaucuparia)：薔薇科，花楸屬。原產歐洲和亞洲西部，我國北方部分地區(qū)生長。春季花為白色，花朵密集，繁花似錦，葉初春為紅色，夏季為深綠色，秋季紅色，果橘紅色，整個冬季至翌年2月橘紅色的果實宿存于枝頭，與瑞雪互映，是重要的觀葉、觀花、觀果樹種，用于庭院、公園、廣場、小區(qū)綠化。但是歐洲花楸種子深度休眠，發(fā)芽率低，催芽處理難度大，費用高，生產用苗奇缺，價格高，采用組織培養(yǎng)技術可以在短期內獲得大量優(yōu)質苗木，解決生產需求，同時為園林植物工廠化育苗提供理論依據(jù)。

1 實驗材料及方法

1.1 材料選取

選取歐洲花楸一年生枝條作為實驗材料。

1.2 材料處理

選取健壯的當年生枝條,用飽滿而未萌發(fā)的側芽作為外植體。側芽以枝條中段的為好。枝條去葉,剝去附在莖上的葉柄及皮刺,然后切成小段,每段長2～3cm。每段至少帶有一個側芽,用水洗凈,用濾紙吸干。在無菌條件下用75%的酒精消毒30s,再用0.1%的升汞消毒10min,最后用無菌水沖洗5～7遍,在超凈工作臺上接種到培養(yǎng)基上。

1.3 培養(yǎng)基

1.3.1 誘導芽分化培養(yǎng)基

以MS為基本培養(yǎng)基，蔗糖3%，瓊脂1%，pH為5.8，細胞分裂素采用以6—BA，生長素采用NAA、IBA，激素組合見表1，培養(yǎng)條件溫度25℃，光照2000lx。

1.3.2 增值培養(yǎng)基

以MS為基本培養(yǎng)基，蔗糖3%，瓊脂1%，pH為5.8，細胞分裂素采用以6—BA、KT。根據(jù)誘導生長情況，生長素采用NAA，激素組合見表2，培養(yǎng)條件溫度25℃，光照2000lx。

1.3.3 生根培養(yǎng)基

以1/2MS為基本培養(yǎng)基，蔗糖3%，瓊脂1%，pH為5.8，生長素采用NAA和IBA，細胞分裂素采用6—BA，激素組合見表3，培養(yǎng)條件溫度25℃，光照2000lx。

表1 誘導芽分化培養(yǎng)基的激素組合 單位：mg/L

表2 增值培養(yǎng)基的激素組合 單位：mg/L

表3 生根培養(yǎng)基的激素組合 單位：mg/L

2 研究結果

2.1 誘導側芽分化結果分析

將歐洲花楸的莖段接種在加入不同激素的誘導培養(yǎng)基上，部分培養(yǎng)基5d后側芽開始膨大，10～22d分化芽逐漸形成幼苗，統(tǒng)計生長情況，從表4可見激素對歐洲花楸芽誘導效果顯著，細胞分裂素6—BA低濃度促進芽生長，高濃度形成愈傷組織，生長素對芽誘導效果NAA>IBA>IAA，NAA效果最好，綜合誘導芽生長情況以MS+6—BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L培養(yǎng)基上生長最好。

表4 不同培養(yǎng)基誘導結果

2.2 芽在莖段上的位置對生長的影響

將歐洲花楸20個枝條分成含腋芽的7段,放于含有不同激素的培養(yǎng)基上,經過一段時間的培養(yǎng), 同一枝條不同位置芽在相同培養(yǎng)基上表現(xiàn)不同,頂端和基部的芽萌發(fā)生長較慢,需11～13d,而中部的芽萌發(fā)較快,需5d(見圖1)。

2.3 增值培養(yǎng)結果分析

將歐洲花楸誘導的側芽接種在含有不同激素的增值培養(yǎng)基上，15～22d后部分培養(yǎng)基上形成叢生芽。從表5可以看出，對叢生芽形成6—BA比KT作用明顯。6—BA濃度在0.5mg/L時，無叢生芽形成，6—BA濃度在1.0～3.0mg/L時>形成叢生芽；低濃度NAA促進生長，高濃度NAA促進愈傷組織，綜合芽分化率、叢生芽數(shù)量、生長情況，增值以MS+6—BA2.0+NAA0.1生長最好。

表5 側芽增值生長情況統(tǒng)計表

注：平均分化芽數(shù)指形成叢生芽總數(shù)/分化叢生芽外植體數(shù)

2.4 生根培養(yǎng)

歐洲花楸嫩芽長到2～3cm長度時，接種到生根培養(yǎng)基上，經20d培養(yǎng)后，統(tǒng)計生長情況，結果表明(表6):IBA、NAA對生根有顯著影響，低濃度的生長素有利根的形成，濃度過高會抑制根的形成，0.1～1.5mg/L的生長素濃度才能有效地促進根的形成。從圖2可以看出，NAA促進生根效果好于IBA，1/2MS+NAA0.5培養(yǎng)基生根率達83.33%，效果最佳，根系生長良好。

表6 不同培養(yǎng)基對生根的影響

3 結論

歐洲花楸組培育苗，外植體采用一年生枝條中部的芽萌發(fā)較快，誘導側芽分化最佳培養(yǎng)基為：MS+6—BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L，增值最佳培養(yǎng)基：MS+6—BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L，生根最佳培養(yǎng)基：1/2MS+NAA0.5mg/L。

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