環(huán)氧化酶-2在分化型甲狀腺癌中的表達及意義

李曉玲 黃 仲 黃健萍

分化型甲狀腺癌(differentiated thyroid carcinoma，DTC)包括甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma，PTC)和濾泡癌 (follicular thyroid carcinoma，FTC)，它們是甲狀腺濾泡源性惡性腫瘤中2種不同生物學行為的病理類型。頸部淋巴結轉移是PTC的主要轉移途徑，血行轉移少見，而FTC則易發(fā)生血行轉移而較少發(fā)生淋巴結轉移。近年來大量研究表明，環(huán)氧化物酶2(COX-2)與許多腫瘤的轉移相關。本實驗檢測分化型甲狀腺癌中COX-2的表達，探討COX-2在分化型甲狀腺癌中的表達及意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選自廣東醫(yī)學院附屬醫(yī)院病理科及廣東農墾中心醫(yī)院病理科、2005年1月～2010年6月存檔的、有明確病理診斷的甲狀腺癌蠟塊。51例分化型甲狀腺癌中，男性14例，女性37例，年齡13～72歲，中位年齡42歲。其中乳頭狀癌36例，濾泡癌15例；頸部淋巴結轉移者28例，無淋巴結轉移者23例；按照國際抗癌協會聯盟(UICC)的TNM分期，Ⅰ～Ⅱ期33例，Ⅲ～Ⅳ期18例；所有患者術前均未接受藥物及同位素治療。

1.2 試劑與方法

全部標本均經4%中性甲醛固定，梯度脫水、浸蠟、包埋，4μm連續(xù)切片，烤干、常規(guī)脫蠟后行免疫組織化學SP法染色。兔抗人單克隆抗體COX-2、抗體稀釋液、SP-900通用型試劑盒、DAB顯色試劑盒、PBS磷酸鹽緩沖液及Citrate枸櫞酸鹽緩沖液，均購于北京中杉金橋生物技術有限公司，采用高溫高壓抗原修復。

1.3 結果判定

COX-2陽性表達定位于細胞質，呈棕黃色或棕褐色顆粒樣分布。每張切片隨機選擇3個視野(×100)，在顯微鏡(×400)下計數每個視野100個腫瘤細胞中陽性細胞數，以3個視野的平均百分數為判定結果。評分標準采用半定量積分法，將染色強度分為3級：無著色記1分，淺著色記2分，棕黃色記3分；陽性細胞百分數≤5%為0分；6%～25%為1分；26%～50%為2分；51%～75%為3分；>75%為4分。上述兩項評分的乘積為最后得分：0～1分為陰性(-)；2～3分為陽性(+～++)；≥4分為強陽性(+++)。(+)及以上評為陽性表達。

1.4 統計學方法

采用SAS 8.0軟件分析，免疫組織化學染色陽性率比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 COX-2在分化型甲狀腺癌中的表達情況

COX-2陽性表達于細胞胞質，乳頭狀癌組織中其陽性率(72.22%，26/36)高于濾泡癌組織(40.00%，6/15)，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2 COX-2表達與甲狀腺癌臨床病理因素的關系

COX-2陽性表達與患者性別、年齡無關(P>0.05)，而與甲狀腺癌病理類型、有無頸部淋巴結轉移及TNM分期有關(P<0.05)，見表1。

表1 COX-2表達與甲狀腺癌臨床病理因素的關系(例，%)

3 討論

環(huán)氧化酶(COX) 是催化花生四烯酸轉化為前列腺素(PG) 的重要限速酶。目前發(fā)現哺乳動物的COX有3種同工酶：COX-1為結構型基因，在正常組織和細胞內表達；COX-2為誘導型基因，在生理狀態(tài)下很少檢測到，正常表達被認為限制于某些組織中，如前列腺、乳腺、胃腸；COX-3則表達于腦、脊髓等組織，具體功能有待研究。人類COX-2基因定位于1號染色體的1q25.2～q25.3[1]，由10個外顯子和9個內含子構成，產物為編碼604個氨基酸殘基組成的多肽，大小為69.93 kDa。

COX-2在多種腫瘤組織的癌變過程中出現高表達，表達程度與多種惡性腫瘤的轉移及預后密切相關[2～4]。目前認為，COX-2的致癌機制主要是促進腫瘤細胞增殖和抑制凋亡、影響腫瘤細胞的黏附和遷移、抑制免疫反應、促進腫瘤血管形成以及影響腫瘤淋巴管的生成。關于COX-2與腫瘤血管的形成是研究的一個熱點，目前對該機制的了解比較清楚，認為COX-2能誘導腫瘤細胞產生VEGF，而腫瘤組織產生的COX-2產物如PGE2、PGF2及TXA2等亦可直接或間接促進血管的生成，此外COX-2促進基質金屬蛋白酶的表達，激活血管生成素，也可刺激抗凋亡因子Bcl-2的表達來抑制內皮細胞的凋亡，從而促進血管的生成[5]。但關于COX-2在甲狀腺濾泡癌血行轉移中的作用機制方面研究不多。在甲狀腺乳頭狀癌的研究中，朱洪源等[6]發(fā)現，COX-2高表達于甲狀腺乳頭狀癌，發(fā)生淋巴結轉移組表達率高于未發(fā)生淋巴結轉移組，與Lo等[7]的研究結果相近。有學者[8]發(fā)現COX-2和VEGF-C在甲狀腺乳頭狀癌中呈高表達且關系密切，兩者在甲狀腺乳頭狀癌頸淋巴結轉移中發(fā)揮作用且可能存在協同效應，與朱洪源等[8]、胡賢杰等[9]的研究結論相一致，認為COX-2對甲狀腺乳頭狀癌患者的淋巴管形成起重要作用，其機制可能是通過上調VEGF-C的表達促進腫瘤淋巴管的形成，利于甲狀腺乳頭狀癌淋巴結的轉移。本實驗中，COX-2在PTC中的陽性表達率高于FTC，有淋巴結轉移組高于無淋巴結轉移組，并與TNM分期有關，與文獻報道的一致，可見COX-2在分化型甲狀腺癌的轉移中起重要作用，其機制可能與VEGF、VGEF-C等血管、淋巴管生成因子相關。目前COX-2在PTC的淋巴管生成與淋巴道轉移、在FTC的血管生成與血行轉移機制中的研究尚淺，甲狀腺乳頭狀癌與濾泡癌同屬分化型甲狀腺癌，卻有著兩種不同的轉移傾向路徑，COX-2在此2種轉移路徑中的具體機制，仍有待深入研究。

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[8]朱洪源,湯建國,毛鑫禮,等.環(huán)氧化酶-2和血管內皮生長因子與甲狀腺癌頸淋巴結轉移的關系〔J〕.中國耳鼻咽喉頭頸外科,2007,14(5):284.

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