超臨界CO2流體提取復(fù)方川芎丹參中的有效成分*

張偉，丘泰球

(華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東 廣州，510640)

超臨界CO2流體提取復(fù)方川芎丹參中的有效成分*

張偉，丘泰球

(華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東 廣州，510640)

通過設(shè)計(jì)單因素和正交試驗(yàn)，利用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定復(fù)方川芎丹參中阿魏酸、川芎嗪和丹參IIA等多指標(biāo)的含量進(jìn)行綜合評(píng)分，優(yōu)選出復(fù)方川芎丹參中有效成分超臨界CO2最佳提取工藝條件。結(jié)果表明:超臨界CO2萃取法提取復(fù)方川芎丹參中有效成分的適宜工藝條件是，提取壓力20 MPa，提取溫度55℃，原料粒度為24目，夾帶劑用量為0.75 mL/g。在這一條件下，阿魏酸、川芎嗪和丹參酮IIA的提取率分別可達(dá)到125.74μg/g(RSD=0.84%)、61.68μg/g(RSD=1.23%)和 131.31μg/g(RSD=0.81%)。

超臨界CO2提取，高效液相色譜法(HPLC)，多指標(biāo)綜合評(píng)分法，阿魏酸，川芎嗪，丹參酮IIA

中藥川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)是傘形科藁本屬植物，具有活血行氣，祛風(fēng)止痛之功效。中藥丹參是唇形科植物丹參(Salvia miltiorrhiza Bge.)的干燥根，具有祛瘀止痛，活血通經(jīng)，清心除煩之功效［1］。川芎中主要藥效成分有川芎嗪、阿魏酸、苯酞類物質(zhì)［2］等，丹參中主要功效成分主要是丹參酮IIA、丹酚酸［3］等。川芎配伍丹參使二者的藥效有相互協(xié)同作用［4］。

超臨界 CO2萃取技術(shù)已經(jīng)廣泛用于精油［5－9］、抗氧化劑［10］、色素［11］、醫(yī)藥品［12－13］、殺蟲劑［14－16］等物質(zhì)的提取中，是一種無毒的綠色提取技術(shù)［17］。本文利用超臨界CO2萃取技術(shù)提取復(fù)方川芎丹參中的有效成分，通過設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)方案，以測(cè)定阿魏酸、川芎嗪及丹參酮IIA多指標(biāo)的含量，用綜合評(píng)分法優(yōu)選出其提取工藝。

1 材料、試劑和設(shè)備

1.1 實(shí)驗(yàn)材料、試劑

川芎、丹參(廣州南北行中藥飲片有限公司，產(chǎn)地四川，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)符合《中華人民共和國(guó)藥典》);阿魏酸對(duì)照品、鹽酸川芎嗪對(duì)照品、丹參酮IIA對(duì)照品

≥98%)，西安慈緣生化科技有限公司;甲醇(色譜純)，江蘇永華精細(xì)化學(xué)品有限公司;冰醋酸(分析純)，成都市聯(lián)合化工試劑研究所;蒸餾水，廣州屈臣氏食品飲料有限公司;CO2(質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.9%)，廣州市卓正氣體有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備

HL－5L/50 MPa-ⅡB型超臨界萃取裝置，杭州華黎泵業(yè)有限公司;Dionex高效液相色譜系統(tǒng)(配有P680高壓泵，ASI－100自動(dòng)進(jìn)樣器，PDA-100光電二極管陣列檢測(cè)器)，美國(guó)戴安公司;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE-52A)，上海亞榮生化儀器廠;精密電子天平(FA2004)，上海精科儀器廠。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 超臨界CO2萃取復(fù)方川芎丹參有效成分單因素試驗(yàn)

通過預(yù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)原料粒度、提取壓力、提取溫度、提取時(shí)間、分離釜壓力和溫度等因素對(duì)復(fù)方川芎丹參有效成分提取的得率都有影響，并且在使用無水乙醇作為夾帶劑時(shí)，可以顯著提高有效成分的得率及縮短提取時(shí)間，所以選取原料粒度、提取壓力、提取溫度、提取時(shí)間和夾帶劑用量作為考察因素，分離釜I、II的壓力分別設(shè)為 6、5 MPa，溫度分別為 35、30℃，以藥物浸膏得率為指標(biāo)，初步考察各因素對(duì)復(fù)方川芎丹參有效成分提取的影響。

2.1.1 原料粒度的影響

將川芎和丹參分別粉碎，選取粒徑為12目、24目、40目、60目、80目的川芎和丹參，分別稱取每一粒徑的川芎和丹參各100 g，混合均勻，放入萃取釜進(jìn)行提取，提取壓力20 MPa、提取溫度50℃、提取時(shí)間1.5 h，夾帶劑用量200 mL。將提取物減壓蒸除夾帶劑，稱重，計(jì)算浸膏得率。

2.1.2 提取壓力的影響

分別稱取100 g粉碎過40目篩的川芎和丹參粉末，混合均勻，放入萃取釜中，分別在10、15、20、25 和

表1 因素水平表

2.3 HPLC測(cè)定阿魏酸、川芎嗪含量方法［18－19］

2.3.1 色譜條件

色譜柱:DIONEX C18柱(250 mm×4.6 mm 5 μm);流動(dòng)相:甲醇-1%冰醋酸(體積比90∶10);檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm，流速:1 mL/min;柱溫:35℃，進(jìn)樣量:10 μL。

2.3.2 對(duì)照品溶液制備

精密稱取阿魏酸對(duì)照品11 mg、鹽酸川芎嗪對(duì)照品5 mg，分別用甲醇溶于5 mL容量量瓶中，定容(濃度分別為2.2和1.0mg/mL)，制成阿魏酸對(duì)照品和鹽酸川芎嗪對(duì)照品儲(chǔ)備液，各精密吸取1mL，加入到一個(gè)10 mL的容量瓶中，甲醇定容，制成阿魏酸和川芎嗪的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液(濃度分別為0.22和0.1mg/mL)。

2.3.3 線性關(guān)系

將制備好的阿魏酸和川芎嗪的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液用 0.22μm 微孔濾膜過濾，準(zhǔn)確進(jìn)樣 2、5、10、15、20μL，按2.2.1所述方法測(cè)定，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到阿魏酸和川芎嗪的回歸方程分別為y=10.644x－8.589 4，R2=0.999 9;y=3.998 4x－7.324 5，R2=0.989。結(jié)果表明，阿魏酸和鹽酸川芎嗪進(jìn)樣量分別在0.44～4.4 μg和0.2～2 μg內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.4 HPLC測(cè)定丹參酮ⅡA含量方法［20］

2.4.1 色譜條件

色譜柱:DIONEX C18柱(250 mm×4.6mm 5μm);流動(dòng)相:甲醇-水(體積比 70∶30);檢測(cè)波長(zhǎng)265 nm，流速:1 mL/min;柱溫:35℃，進(jìn)樣量:10 μL。

2.4.2 對(duì)照品溶液制備

精密稱取丹參酮IIA對(duì)照品5 mg于50 mL容量瓶中，制成丹參酮IIA對(duì)照品儲(chǔ)備液(濃度為0.1 mg/mL)。

2.4.3 線性關(guān)系

將制備好的丹參酮IIA對(duì)照品儲(chǔ)備液用0.22μm微孔濾膜過濾，準(zhǔn)確進(jìn)樣 2、5、10、15、20μL，按 2.3.1方法測(cè)定，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到丹參酮IIA回歸方程分別為y=8.827 2x－1.725 3，R2=0.999。結(jié)果表明，丹參酮ⅡA進(jìn)樣量在0.2～2 μg內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

2.5 樣品溶液的測(cè)定

將超臨界CO2提取復(fù)方川芎丹參所得的提取物減壓蒸餾，除去夾帶劑，用甲醇溶解轉(zhuǎn)移至25 mL棕色容量瓶中，甲醇定容，制成樣品儲(chǔ)備液。精密吸取樣品儲(chǔ)備液1 mL至10 mL容量瓶中，甲醇定容，制成樣品溶液，0.22μm微孔濾膜過濾，準(zhǔn)確進(jìn)樣10μL，按2.3.1和2.4.1所述方法分別測(cè)定其中阿魏酸、川芎嗪和丹參酮IIA的含量。

3 結(jié)果與分析

3.1 單因素結(jié)果30 MPa壓力下進(jìn)行提取，提取溫度50℃，其他條件同2.1.1。將提取物減壓蒸除夾帶劑，稱重，計(jì)算浸膏得率。

2.1.3 提取溫度的影響

分別稱取100 g粉碎過40目篩的川芎和丹參粉末，混合均勻，放入萃取釜中，分別在 30、40、50、60 和70℃的提取溫度在進(jìn)行提取，提取壓力20 MPa，其他條件同2.1.1。將提取物減壓蒸除夾帶劑，稱重，計(jì)算浸膏得率。

2.1.4 提取時(shí)間的影響

分別稱取100 g粉碎過40目篩的川芎和丹參粉末，混合均勻，放入萃取釜中分別提取0.5、1、1.5、2.0和2.5 h，其他條件同2.1.1。將提取物減壓蒸除夾帶劑，稱重，計(jì)算浸膏得率。

2.1.5 夾帶劑用量的影響

分別稱取100 g粉碎過40目篩的川芎和丹參粉末，混合均勻，放入萃取釜中，分別按 0.25、0.5、0.75、1.0和1.25 mL/g加入夾帶劑無水乙醇進(jìn)行提取，其他條件同2.1.1。將提取物減壓蒸除夾帶劑，稱重，計(jì)算浸膏得率。

2.2 超臨界CO2萃取復(fù)方川芎丹參有效成分正交試驗(yàn)

在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，按表1設(shè)計(jì)提取試驗(yàn)的因素水平表。選L9(34)正交表對(duì)復(fù)方川芎丹參有效成分進(jìn)行超臨界萃取。分別稱取100g粉碎過篩的川芎和丹參藥材，混合均勻，放入超臨界CO2萃取裝置中萃取2 h，利用HPLC法測(cè)定萃取物中阿魏酸、川芎嗪和丹參酮IIA的含量。以阿魏酸、川芎嗪和丹參酮IIA含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用綜合評(píng)分法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析(其權(quán)重系數(shù)分別為阿魏酸:0.35，川芎嗪:0.35，丹參酮IIA:0.3)。

3.1.1 原料粒度的影響

圖1 原料粒度對(duì)復(fù)方川芎丹參浸膏得率的影響

從圖1中可以看出，在粒度＜60目，復(fù)方川芎丹參浸膏的得率隨著原料粒徑的減小而增大，而當(dāng)粒度上升到80目時(shí)，浸膏的得率呈下降趨勢(shì)。這是因?yàn)樵谝欢ǚ秶鷥?nèi)，原料的粒徑變小，細(xì)胞壁被破壞的程度增大，整個(gè)原料的顆粒被溶劑浸潤(rùn)的時(shí)間縮短，有效成分溶劑化的速度和擴(kuò)散速度則自然加快，同時(shí)粒徑減小也增加了超臨界CO2與原料的接觸面積和提取通道，從而有利于提高提取率，但并不是原料的粒徑越小越好，原料過細(xì)，雖然此時(shí)對(duì)原料細(xì)胞壁的破壞更加徹底，但卻增加了原料的堆積密度，通透性變差，致使超臨界CO2只能沿著阻力小的線路穿過料層，形成許多針孔，使提取顯著不均勻。同時(shí)，顆粒太細(xì)，不僅會(huì)導(dǎo)致流路堵塞，使提取柱柱壓過高，而且還會(huì)造成原料結(jié)塊，提取不利，因此，提取過程中原料的粒徑應(yīng)該適當(dāng)，故選擇顆粒粒徑為40～60目。

3.1.2 提取壓力的影響

圖2 提取壓力對(duì)復(fù)方川芎丹參浸膏得率的影響

從圖2中可以看出，隨著提取壓力的增大，復(fù)方川芎丹參浸膏得率也增大，這是因?yàn)樘崛毫Φ纳咭馕吨R界CO2密度的增加。當(dāng)壓力超過20 MPa后，再增大萃取壓力，浸膏得率增加的速度已經(jīng)放緩。雖然提取壓力越大，浸膏得率越高，然而壓力增加，生產(chǎn)成本也增加，而且壓力過高還會(huì)增加不安全因素，因此最終選擇提取壓力為20 MPa。

3.1.3 提取溫度的影響

圖3 提取溫度對(duì)復(fù)方川芎丹參浸膏得率的影響

從圖3中可以看出，當(dāng)提取溫度從30℃升高50℃時(shí)，復(fù)方川芎丹參浸膏得率呈上升趨勢(shì)，當(dāng)提取溫度＞50℃后浸膏得率呈下降趨勢(shì)。這是因?yàn)闇囟葘?duì)萃取效果的影響主要體現(xiàn)在2個(gè)方面:(1)溫度升高時(shí)，溶質(zhì)的蒸汽壓升高，且分子熱運(yùn)動(dòng)加快，擴(kuò)散性加強(qiáng)，因此增強(qiáng)了傳質(zhì);(2)在一定壓力下升高溫度，萃取劑CO2的密度降低，溶解能力下降。因此，提取溫度選擇40～50℃較為合適。

3.1.4 提取時(shí)間的影響

圖4 提取時(shí)間對(duì)復(fù)方川芎丹參浸膏得率的影響

圖4 結(jié)果表明，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，浸膏得率也相應(yīng)的增加，但其浸膏得率的曲線斜率是逐漸減小的，以至最后趨于平緩。從工藝和生產(chǎn)而言，也不應(yīng)用延長(zhǎng)時(shí)間來提高生產(chǎn)率。因此較佳提取時(shí)間為1.5 ～2 h。

3.1.5 夾帶劑用量的影響

圖5 夾帶劑用量對(duì)復(fù)方川芎丹參浸膏得率的影響

圖5結(jié)果表明，復(fù)方川芎丹參浸膏得率隨著夾帶劑用量的增大而迅速增大，但當(dāng)萃取劑用量＞1.0 mL/g后，夾帶劑用量的增加對(duì)萃取率的增強(qiáng)效果已經(jīng)開始放緩，因此選擇夾帶劑用量為0.75～1.0 mL/g。

超臨界CO2是非極性物質(zhì)，當(dāng)提取阿魏酸等極性物質(zhì)時(shí)，需要在高壓下才能使之溶解，且效果不明顯。乙醇無毒，是功能食品及藥物加工過程中唯一允許使用的有機(jī)試劑，通過引入無水乙醇作為夾帶劑，不單可以增加超臨界流體的密度，而且其分子質(zhì)量小，在基體中擴(kuò)散、滲透能力強(qiáng)，能夠與溶質(zhì)發(fā)生氫鍵締合作用，促使其脫離基體，提高超臨界流體的溶解效果，因此在加入了夾帶劑后，極大地提高了極性物質(zhì)的提取效果。

3.2 正交試驗(yàn)結(jié)果和極差分析

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

圖6 阿魏酸(1)、川芎嗪(2)對(duì)照品HPLC圖

圖7 樣品HPLC圖(1:阿魏酸，2:川芎嗪)

川芎、丹參兩味中藥在中醫(yī)臨床上多同時(shí)廣泛用于治療心腦血管疾?。?1］，而川芎嗪、阿魏酸和丹參酮ⅡA、丹參素等都是主要的藥效成分［22－23］，根據(jù)文獻(xiàn)［23］分別觀察了丹參酮ⅡA、丹參素、川芎嗪和阿魏酸對(duì)ADP誘導(dǎo)大鼠和人血小板聚集的影響，4種成分抑制血小板聚集的相互作用類型為協(xié)同作用，4種成分的配比關(guān)系為24.8、37.6、25.0和25.3 mg/mL。但由于實(shí)驗(yàn)條件和科研經(jīng)費(fèi)所限，筆者不能對(duì)所有藥效成分一一測(cè)定和評(píng)定，綜合考慮，在綜合評(píng)分中選取川芎嗪、阿魏酸和丹參酮ⅡA3種化合物的權(quán)重系數(shù)分別為0.35、0.35和0.30。

由正交表可以明顯看出，各因素作用主次為A＞D＞C＞B，即提取壓力＞夾帶劑用量＞原料粒度＞提取溫度。并且最優(yōu)提取組合為A2B3C1D2，即提取壓力為20 MPa，提取溫度55℃，原料粒度為24目，夾帶劑用量為0.75 mL/g。

3.3 HPLC測(cè)定阿魏酸、川芎嗪和丹參IIA含量結(jié)果

按2.2.1和2.3.1所述方法和條件進(jìn)行測(cè)定，得到阿魏酸、川芎嗪和丹參酮IIA對(duì)照品及樣品的HPLC圖(圖6～圖9)。

圖8 丹參酮IIA對(duì)照品HPL C圖

圖9 樣品HPLC圖(丹參酮IIA)

4 結(jié)論

利用超臨界CO2提取復(fù)方川芎丹參中有效成分是一種經(jīng)濟(jì)有效的方法，其最佳提取工藝為提取壓力為20 MPa，提取溫度55℃，原料粒度為24目，夾帶劑用量為0.75 mL/g。在此條件下對(duì)復(fù)方川芎丹參重復(fù)3次提取，對(duì)提取物依法測(cè)定，得阿魏酸、川芎嗪和丹參酮 IIA提取率分別為 125.74 μg/g(RSD=0.84%)、61.68 μg/g(RSD=1.23%)和 131.31 μg/g(RSD=0.81%)。

本文采用HPLC法對(duì)提取物中阿魏酸、川芎嗪和丹參酮IIA等多指標(biāo)的含量進(jìn)行測(cè)定，這樣能對(duì)提取物的質(zhì)量進(jìn)行綜合評(píng)定。

［1］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:28－52.

［2］ Ru Yana，Song Linlia，Chung Hoising.Simultaneous quantification of 12 bioactive components of Ligusticum chuanxiong Hort.by high-performance liquid chromatography［J］.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，2005，37:87－95.

［3］ 趙小亮，雷浩東，張繼.丹參有效成分提取的研究概述［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35(6):1 795－1 796.

［4］ 郭冬，劉珍，張恩戶.丹參酮IIA、丹參素、川芎嗪和阿魏酸抑制血小板聚集的相互作用類型及配比關(guān)系研究［J］.陜西中醫(yī)，2007 ，28(6):743－745.

［5］ Rodrigues V M，Tosa P T V，Marques M O M，et al.Supercritical extraction of essential oil from Aniseed(Pimpinella anisum L.)using CO2:solubility，kinetics and composition data［J］，J Agric Food Chem.，2003，51:1 518 －1 523.

［6］ Porta G Della，Taddeo R，UrsoE D，et al.Isolation of clovebud and star anise essential oil by supercritical CO2extraction［J］，Lebensm Wiss U Technol，1998，31:454 –460.

［7］ Monteiro A R，Meireles M A，Marques M O M，et al.Extraction of the soluble material from the shells of the bacuri fruit(Platonia insignis Mart)with pressurized CO2and other solvents［J］.J Supercrit Fluids，1997，11:91 － 102.

［8］ Rozzi N L，Phippen W，Simon J E.Supercritical fluid extraction of essential oil components from lemon-scented botanicals［J］.Lebensm Wiss U Technol，2002，35:319 －324.

［9］ Carlson L H C，Machado R A F，Spricigo C B，et al.Extraction of lemongrass essential oil with dense carbon dioxide［J］.J Supercrit Fluids，2001，21:33 －39.

［10］ Ibanez E，Oca A，Murga G De，et al.Supercritical fluid extraction and fractionation of different preprocessed rosemary plants［J］，J Agric Food Chem，1999，47:1 400 －1 404.

［11］ Vagi E，Simandi B，Daood H G，et al.Recovery of pigments from Origanum majorana L.by extraction with supercritical carbon dioxide［J］.J Agric Food Chem，2002，50:2 297－2 301.

［12］ Catchpole O J，Perry N B ，Dasilva B M T，et al.Supercritical extraction of herbs and Echinacea［J］.J Supercrit Fluids，2002，22:129 － 138.

［13］ Rompp H，Seger C，Kaiser C S，et al.Enrichment of Hyperforin from St.John’s Wort(Hypericum perforatum)by pilotscale supercritical carbon dioxide extraction［J］.Eur J Pharm Sci，2004，21，443 －451.

［14］ Quan C，Li S，Tian S，et al.Supercritical fluid extraction and clean-up of organochlorine pesticides in ginseng［J］J Supercrit Fluids，2004，31:149 －157.

［15］ Porta G Della，Reverchon E.Fourth International Symposium on High Pressure Process Technology and Chemical Engineering［M］.Italy:Venice，2002:223.

［16］ Kiriamiti H K，Camy S，Gourdon C，et al.Pyrethrin extraction from pyrethrum flowers using carbon dioxide［J］.J Supercrit Fluids，2003，26:193 －200.

［17］ Reverchon Ernesto，Iolanda，Marco De.Supercritical fluid extraction and fractionation of natural matter［J］.J of Supercritical Fluids，2006，38:146 －166.

［18］ 宋金春，王楊楊，楊鶴，等.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定古方生化湯中阿魏酸和川芎嗪的含量［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2004，24(7):419 －420.

［19］ 楊寧蓮，楊文遠(yuǎn)，楊振紅，等.高效液相色譜法測(cè)定生化湯口服液中阿魏酸含量［J］.中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，1999，19(2):88.

［20］ 國(guó)家藥典委員會(huì)，中華人民共和國(guó)藥典［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:72.

［21］ 李曉莉，李曉蓉，王麗娟，等.RP-HPLC測(cè)定丹芎方中丹參素、阿魏酸、隱丹參酮和丹參酮ⅡA的含量［J］.中成藥，2008，30(1):77 －80.

［22］ 馮彬彬，張建海，張繼芬，等，川芎嗪、阿魏酸及其配伍藥代動(dòng)力學(xué)比較研究［J］.中國(guó)中藥雜志，2010，35(7):900－903.

［23］ 郭冬，劉珍，張恩戶.丹參酮ⅡA、丹參素、川芎嗪和阿魏酸抑制血小板聚集的相互作用類型及配比關(guān)系研究［J］.陜西中醫(yī)，2007，28(6):743 －745.

Optimization of the Extraction for Effective Ingredients from Ligusticum chuanxiong Hort.and Salvia miltiorrhiza Bge.with Supercritical CO2

Zhang Wei，Qiu Tai-qiu
(College of Light Industry and Food Science，South Univesity of Technology，Guangzhou 510640，China)

To optimize the extraction for effective ingredients from Ligusticum chuanxiong Hort.and Salvia miltiorrhiza Bge.by Supercritical CO2extraction，single factor experiments and orthogonal test，Multi－index comprehensive evaluation were performed.The content of the interest compounds(ferulic acid，tetramethylpyrazine and Tanshinone IIA)was measured by HPLC.It showed that the optimal extraction conditions were:extraction pressure 20 MPa，extraction temperature 55℃，Granularity size of raw materials were 24 mush，solvent dosage 0.75 mL/g.The yield of ferulic acid，tetramethylpyrazine and Tanshinone IIA was 125.74 μg/g(RSD=0.84%)，61.68 μg/g(RSD=1.23%)and 131.31 μg/g(RSD=0.81%)respectively.

supercritical carbon dioxide extraction，high performance liquid chromatography(HPLC)，multi-index comprehensive evaluation，ferulic acid，tetramethylpyrazine，tanshinone IIA

碩士研究生(丘泰球博士為通訊作者，E-mail:tqqiu@scut.edu.cn)。

*廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2009A030100007)

2010－02－02，改回日期:2010－09－06