高麗參注射液的制備與含量測定

陳前進(jìn) 戴振彪 朱坤福 黎瑞珍

（廣東省臺山市中醫(yī)院 廣東 臺山 529200）

高麗參注射液是我院采用南朝鮮良字30支“正官裝”高麗紅參生產(chǎn)。由于“正官裝”高麗紅參是選用了6年的人參進(jìn)行炮制，而且又得到了韓國官方認(rèn)證和監(jiān)督，再加上其炮制和配方的獨特，用其生產(chǎn)的高麗參注射液療效肯定，不良反應(yīng)少，在本地區(qū)深受病患者和臨床醫(yī)生的喜愛，從1990～2006年間，高麗參注射液一直是我院自制藥的拳頭產(chǎn)品。

1 處方與制備

1.1 處方

高麗紅參500g、氯化鈉8g、共制成1000mL。高麗紅參為韓國“正官裝”紅參，規(guī)格為良字、30支裝、150g/盒。

1.2 制備

1.2.1 回流提取 稱取高麗紅參，去蘆頭，切成薄片，用65%乙醇加熱回流提取7次，每次用4倍量65%乙醇加熱回流提取2h，合并回流提取液。

1.2.2 醇沉 取回流提取液過濾，回收乙醇，并濃縮至稠膏狀，加乙醇使藥液含乙醇量為75%，放置冰箱中4℃冷藏48h，過濾，濾液以40%氫氧化鈉液調(diào)pH值至7.8～8.2，再放置冰箱中4℃冷藏48h，過濾，濾液回收乙醇，濃縮至稠膏狀，再加乙醇使藥液含乙醇量為85%，放置冰箱中4℃冷藏48h，過濾，回收乙醇并濃縮至無醇味。

1.2.3 配成貯備液 取上述濃縮液加入適量注射用水，攪拌溶解，加入氯化鈉并使之溶解，再加注射用水至1000mL，過濾，濾液調(diào)pH值至6.0～6.5，加入0.1%針用活性炭煮沸15min，過濾除炭，濾液灌封于500mL的玻璃瓶中，115℃滅菌30min，放涼，置冰箱中4℃冷藏30d以上備用。

1.2.4 配制注射液 取上述貯備液，用0.45um微孔濾膜精濾，灌封于潔凈的2mL安瓿中，100℃滅菌30min，即得。

2 含量測定

高麗紅參總皂苷含量約為2%～4%，據(jù)研究報道[1]，以人參皂苷Re作為對照品，利用比色法測定高麗紅參總皂苷含量，方法可靠、準(zhǔn)確。

2.1 儀器與試劑

M850紫外分光光度計（江蘇泰州無線電儀器廠）；FA1604s型電子分析天平（上海天平儀器廠）；高麗參注射液（臺山市中醫(yī)院生產(chǎn)，規(guī)格2mL，批號20040825等）；人參皂苷Re對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號0754-200012，供含量測定用）；水為注射用水；其它試劑為分析純。

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取經(jīng)60℃減壓干燥至恒重的人參皂苷Re對照品適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1mL中含人參皂苷Re2mg的溶液，即得。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密量取對照品溶液10、20、40、60、80、100uL，分別置10mL具塞試管中，揮盡溶劑，精密加5%香草醛冰醋酸溶液-高氯酸（2∶8）（臨用新配）的混合液1mL，于60℃水浴中放置15min，取出，置冰浴冷卻，精密加冰醋酸5mL，搖勻，立即照分光光度法，在544nm的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.4 供試品溶液的制備及測定

精密量取高麗參注射液0.25mL，蒸干，加乙醇溶解，過濾，并定量轉(zhuǎn)移至10mL容量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。精密量取1mL，于具塞試管中，蒸干，照標(biāo)準(zhǔn)曲線項下的方法，自“精密加5%香草醛冰醋酸溶液-高氯酸（2∶8）（臨用新配）的混合液1mL”起，依法測定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液的濃度，計算，即得。

2.5 穩(wěn)定性試驗

取高麗參注射液（批號20040825）的供試品溶液和對照品溶液按以上測定方法項下依法測定，每隔一定時間測定其吸收度，共測定0～4h，結(jié)果見表1。

2.6 重復(fù)性試驗

取同一批號（20040825）高麗參注射液，按上述供試品溶液的制備方法制備6份，然后按上述的測定方法進(jìn)行測定，計算人參皂苷的含量，結(jié)果人參皂苷的平均含量為3.32mg/mL，RSD=3.89%(n=6)。

2.7 回收率試驗

取已知人參皂苷含量的高麗參注射液5份，分別精密按（1：1）添加已知量的人參皂苷Re對照品，按上述供試品溶液的制備方法制備5份，然后按上述的測定方法進(jìn)行測定，計算人參皂苷的含量，結(jié)果見表2。

3 結(jié)語

（1）人參皂苷是高麗紅參的主要成分，含量約為2%～4%（g/g），易溶于水、甲醇、乙醇。曾用不同濃度乙醇（55%、65%、75%）進(jìn)行加熱回流提取研究，發(fā)現(xiàn)用65%乙醇提取制得的高麗參注射液澄明度最為理想。

（2）制備工藝中加入活性炭吸附雜質(zhì)，能提高產(chǎn)品的澄明度，同時亦能吸附有效成分人參皂苷而造成含量下降。我們曾對工藝中加入活性炭的量進(jìn)行反復(fù)研究，實驗證明，活性炭對高麗參注射液中人參皂苷有明顯的吸附作用，并隨著加入量的增大而明顯增強(qiáng)。通過實驗和多年的生產(chǎn)實踐，活性炭的加入量控制在0.1%左右較為理想，既可以防止有效成分流失，又能確保產(chǎn)品的澄明度。

表1 穩(wěn)定性試驗

表2 回收率試驗結(jié)果（n=5)

（3）我院生產(chǎn)高麗參注射液已有10多年歷史，從2004年開始我們按此法測定人參皂苷含量，連續(xù)測定了25批次，含量范圍為3.29～3.87mg/mL，可見紫外分光光度法測定人參皂苷含量是一種操作簡便、準(zhǔn)確可靠的檢驗方法，適用于基層醫(yī)療單位用作測定含人參的制劑中人參皂苷的含量。

(4）國產(chǎn)“高麗參”多采用長白山地區(qū)的種植人參加工而成，由于沒有嚴(yán)格的年限界定，大多為3～4年齡，效用會存在一些差異。我們曾用國產(chǎn)“高麗參”進(jìn)行生產(chǎn)試驗，發(fā)現(xiàn)其臨床療效差，澄明度不容易控制，產(chǎn)品放置易產(chǎn)生沉淀。

[1]陳發(fā)奎.常用中草藥有效成分含量測定[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:13～15.