毛楊梅樹皮化學(xué)成分研究

陳 健，韋 丁

（華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東廣州510640）

毛楊梅樹皮化學(xué)成分研究

陳 健，韋 丁*

（華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東廣州510640）

目的：研究毛楊梅樹皮的化學(xué)成分。方法：采用硅膠柱層析、聚酰胺柱、薄層層析等進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果：從毛楊梅樹皮中分離鑒定出了4個(gè)化合物：蒲公英賽醇（A）、蘆薈甙（B）、楊梅醇（C）、楊梅素（D）。結(jié)論：化合物A、B、C為首次從該植物中分離得到。

毛楊梅樹皮，化學(xué)成分

毛楊梅為楊梅科楊梅屬植物，產(chǎn)于我國(guó)四川中部以西、貴州西部和南部、廣東西北部及廣西等［1］。有關(guān)楊梅藥用活性物質(zhì)的研究，我國(guó)才剛剛起步，日本則較為深入，已從楊梅樹皮和葉中分離出數(shù)種活性化學(xué)物質(zhì)，并對(duì)其中的一些活性物質(zhì)進(jìn)行了藥理學(xué)研究［2］。毛楊梅樹皮內(nèi)含黃酮、鞣質(zhì)、有機(jī)酸等化學(xué)物質(zhì)，其提取物可望開發(fā)成為新型天然抗氧化及自由基清除劑［3］?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，楊梅樹皮提取物具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗腫瘤、消炎抑菌、護(hù)肝等多種功效，可加工為抗心律失常、抗心肌缺血、抗高血壓等新型藥物［4］。為探索該藥用植物的活性化學(xué)成分，且孫達(dá)旺［5］等人對(duì)乙酸乙酯部位的化學(xué)成分已有報(bào)道，本文對(duì)其氯仿部位的化學(xué)成分進(jìn)行了研究。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

毛楊梅樹皮 廣西武鳴栲膠廠提供，經(jīng)廣東藥學(xué)院王定勇副教授鑒定為楊梅科（Myricae）楊梅屬（Myrica）毛楊梅（Myrica esculenta Buch.-Ham）樹皮。

BrukerDRX-400核磁共振儀 TMS為內(nèi)標(biāo)ESI； WatersZMD4000質(zhì)譜儀 用于測(cè)定ESI-MS；X-5顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀 北京泰克儀器有限公司，用于測(cè)定熔點(diǎn)；RE-52 AAA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海嘉鵬科技有限公司；VECTOR33紅外光譜儀 德國(guó)Bruker公司；薄層層析硅膠、柱層析用硅膠 青島海洋化工廠。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

干燥的毛楊梅樹皮打粉，過60目篩，稱取3kg置于廣口瓶中。加8L 95%乙醇室溫浸提7d，過濾，重復(fù)三次，合并三次浸提液。離心，上層溶液60℃減壓濃縮得棕褐色浸膏。加少量甲醇分散、加水溶解，用300mL石油醚萃取。下層同法萃取兩次，將三次的上層萃取液合并，無水硫酸鈉干燥。石油醚萃取液同法用氯仿萃取得氯仿浸膏。

取4.5g浸膏，少量丙酮溶解，拌硅膠，上真空液相柱，以硅膠和聚酰胺填料為固定相，分別用PE∶Acetone=20∶1、15∶1、5∶1、2∶1的混合液梯度洗脫。薄層層析檢測(cè)跟蹤洗脫物，合并斑點(diǎn)比移值相近的流分，得到了4個(gè)部分，分別上分析柱進(jìn)一步純化，結(jié)合重結(jié)晶、薄層層析技術(shù)，得到了高純度的化合物A、B、C、D。

2 結(jié)果與分析

2.1 化合物A的鑒定結(jié)果

無色針狀結(jié)晶，熔點(diǎn)278～279℃，在苯-乙酸乙酯-乙酸（5∶4∶1）、碘蒸氣顯色系統(tǒng)中呈深棕色。ESI-MS（m/z）：426［M+］。13C-NMR譜中給出30個(gè)碳信號(hào)，觀察其化學(xué)位移可發(fā)現(xiàn)：一個(gè)連氧碳信號(hào)79.1，表明含有一個(gè)-OH，116.9、158.1的烯碳信號(hào)表明可能是羽扇豆烷型的9（11）位雙鍵或蒲公英烷型的14（15）位雙鍵。1H-NMR譜中的甲基信號(hào)0.81（6H，s）、0.91（6H，s）、0.95（6H，s）、0.99（3H，s）、1.10（3H，s）和連氧氫信號(hào)3.21（1H，m，w1/2=16Hz）及不飽和雙鍵的氫信號(hào)5.54（1H，dd，J=8 and 3Hz），其13C NMR和1H NMR光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］一致，可確定為蒲公英賽醇，結(jié)構(gòu)式見圖1。

表1 化合物B的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)（MeOH，400MHz，δppm）

表2 化合物C的1H NMR和13C NMR數(shù)據(jù)（MeOH，400MHz，δppm）

圖1 化合物A的結(jié)構(gòu)圖

2.2 化合物B的鑒定結(jié)果

黃色針尖結(jié)晶，熔點(diǎn)148～149℃。能溶于甲醇、乙醇及水中，難溶于乙醚、苯。以吡啶-水-苯（1∶3∶1）為展開劑、0.5%乙酸鎂-甲醇系統(tǒng)顯色，斑點(diǎn)呈藍(lán)色，且均一。ESI-MS（nagetive），m/z：416.9，分子式為C21H22O9，1H NMR和13C NMR見表1。其光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］基本一致，可確定為蘆薈甙，結(jié)構(gòu)式見圖2。

2.3 化合物C的鑒定結(jié)果

白色粉末，熔點(diǎn)193.5～194.8℃。不溶于石油醚，溶于氯仿、乙酸乙酯、甲醇和丙酮。以石油醚-丙酮（2∶1）為展開劑、碘蒸氣顯色，斑點(diǎn)呈紅綜色。ESI-MS（positive），m/z：357.1。1H NMR和13C NMR見表2，與文獻(xiàn)［8］報(bào)道的楊梅醇光譜數(shù)據(jù)一致，結(jié)構(gòu)式見圖3。

圖2 化合物B的結(jié)構(gòu)圖

圖3 化合物C的結(jié)構(gòu)圖

2.4 化合物D的鑒定結(jié)果

黃色針晶，熔點(diǎn)324～326℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮，微溶于水，難溶于氯仿、石油醚。FeCl3反應(yīng)呈深紫色，在紫外燈下呈黃色熒光。IR max kBr，cm-1：3350（OH），1648（CO）；ESI-MS，m/z：318［M+ H］+。1H NMR數(shù)據(jù)提示，該化合物具有6個(gè)羥基和4個(gè)碳?xì)滟|(zhì)子δppm：7.2（2H，s，C2-H），表明B環(huán)為3，4，5-三羥基取代，6.1（1H，d，J=2.5Hz，C8-H）和6.3（1H，d，J=2.5Hz，C6-H），表明A環(huán)為5，7-二羥基取代。綜合13C-NMR和1H NMR數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)與文獻(xiàn)［9］報(bào)道的楊梅素光譜數(shù)據(jù)一致。該化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)證實(shí)為3，5，7，3′，4′，5′-六羥基黃酮，即楊梅樹皮素（myricetin），結(jié)構(gòu)式見圖4。

圖4 化合物D的結(jié)構(gòu)圖

3 結(jié)論

3.1 毛楊梅樹皮乙醇提取物氯仿部位浸膏，經(jīng)過大型硅膠柱、聚酰胺柱、分析型柱層析，再結(jié)合溶劑重結(jié)晶等方法，對(duì)其進(jìn)行了分離純化，得到了高純度的四種化合物。

3.2 分離得到的A、B、C、D四種化合物，應(yīng)用紅外掃描光譜（IR）、質(zhì)譜（MS）和核磁共振波譜（NMR）闡明其化學(xué)結(jié)構(gòu)，鑒定這四種化合物分別為蒲公英賽醇、蘆薈甙、楊梅醇、楊梅素，其中化合物A、B、C均為首次從該植物中得到。

3.3 毛楊梅在云南大理、文山、西雙版納等地區(qū)是化瘀止痛、活血止血、收斂止瀉的常用藥，常用來治療跌打損傷、骨折、痢疾、胃及十二指腸潰瘍，外用治創(chuàng)傷出血、燒傷、目翳、牙痛、濕疹、慢性瘡瘍等。樹皮內(nèi)含黃酮、鞣質(zhì)、有機(jī)酸等化學(xué)物質(zhì)。初步研究結(jié)果表明，毛楊梅樹皮提取物可望進(jìn)一步開發(fā)成為新型天然抗氧化及自由基清除劑［3］。

［1］謬松林，王定詳.楊梅［M］.杭州：浙江科學(xué)技術(shù)出版社，1987：9-14.

［2］Tao J，Morikawa T，Toguchida I，et al.Inhibitors of nitric oxide production from the bark of Myrica rubra.Structures of new biphenyl type diarylheptanoid glycosedes and taraxerane type trierpene［J］.Bioorganic&Medicinal Chemistry，2002（10）：4005 -4012.

［3］陳笳鴻，汪泳梅，吳冬梅，等.毛楊梅樹皮提取物抗氧化及其清除自由基活性初步研究［J］.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2007，27（10）：1-7.

［4］唐霖，張莉靜，王明謙.楊梅中活性成分楊梅素的研究進(jìn)展［J］.中成藥，2006（1）：39.

［5］孫達(dá)旺，趙祖春，羅慶云，等.毛楊梅樹皮化學(xué)成分研究［J］.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，1982（3）.

［6］ Nobuko Sakurai，Yoshikatsu Yaguchi，Takao Inoue. Triterpenoids form Myrica rubra［J］.Phytochemistry，1987，26（1）：217-219.

［7］Manito P，Monti D，Seperanza G.J Chem soc，perkin Transl，1990（5）：1297.

［8］廖華衛(wèi)，劉恩桂，王定勇.楊梅樹皮的化學(xué)成分研究［J］.中南藥學(xué)，2006（3）.

［9］何桂霞，裴剛，周天達(dá)，等.瑤族藤茶中楊梅素的分離與結(jié)構(gòu)鑒定［J］.中國(guó)民族醫(yī)藥雜志，2001，6（1）：40-41.

Study on chemical constituents of bark of Myrica esculenta Buch.-Ham

CHEN Jian，WEI Ding*
（College of Light Industry and Food Science，South China University of Technology，Guangzhou 510640，China）

Objective：To study the chemical constituents of the bark of Myrica esculenta Buch.-Ham.Methods：Compounds were isolated and purified by silicon gel column，polyamide column chromatography，thin layer chromatography.Their structures were elucidated by chemical and spectral methods.Results：Four compounds were isolated from the bark of Myrica esculenta Buch.-Ham，and identified as taraxero（lA），barbaloin（B），myricano（lC）and myricetin（D）.Conclusion：Compounds A，B and C were isolated from the plant for the first time.

bark of Myrica esculenta Buch.-Ham；chemical constituents

TS201.2

A

1002-0306（2010）11-0098-03

2009-10-10 *通訊聯(lián)系人

陳健（1967-），男，博士，副教授，主要從事天然產(chǎn)物化學(xué)和生物分離技術(shù)方面的研究工作。

國(guó)家科技支撐計(jì)劃（2006BAD27B04）資助。