離子敏感型左氧氟沙星原位膠化滴眼液的制備及質(zhì)量控制

楊遠(yuǎn)榮，任貽軍，林飛剛

（1.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬荊州醫(yī)院，湖北 荊州 434020； 2.鄖陽(yáng)醫(yī)學(xué)院藥護(hù)學(xué)院，湖北 十堰 442000）

離子敏感型左氧氟沙星原位膠化滴眼液的制備及質(zhì)量控制

楊遠(yuǎn)榮1，任貽軍1，林飛剛2

（1.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬荊州醫(yī)院，湖北 荊州 434020； 2.鄖陽(yáng)醫(yī)學(xué)院藥護(hù)學(xué)院，湖北 十堰 442000）

目的 制備左氧氟沙星原位膠化滴眼劑并建立其質(zhì)量控制方法。方法 以氯化鈉為滲透壓調(diào)節(jié)劑、海藻酸鈉為增稠劑、羥苯乙酯為防腐劑，制備左氧氟沙星原位膠化滴眼劑，用高效液相色譜法測(cè)定含量。結(jié)果 制得的液體為無色或淺黃色澄明液體，pH為5.57，鑒別、檢查結(jié)果均符合2005年版《中國(guó)藥典（二部）》中的相關(guān)規(guī)定，含量測(cè)定的線性范圍為9.39～62.60!g/mL，平均回收率為99.27%，RSD為2.92%（n=6）。結(jié)論 左氧氟沙星原位膠化滴眼液處方合理，質(zhì)量符合要求。

左氧氟沙星；原位膠化；滴眼劑；質(zhì)量控制

Abstract：Objective To prepare insitu gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops and to establish its quality control method.MethodsThe insitu gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops was prepared with sodium chloride as buffer to regulate the pH value and osmotic pressure and with sodium polymannuronate as thickener.The content of levofloxacin hydrochloride was determined by high performance liquid chromatography(HPLC).Results The sustained-release eye drops were colorless or yellow limpid liquid.Its test and identificationResultsall conformed to the related stipulation stated in Chinese Pharmacopeia(2005 edition).There was the good linear relationship within the concentration range of 9.39-62.60!g/mL for levofloxacin hydrochloride，and its average recovery rate was 99.27%，RSD was 2.92%and pH was 5.57.Conclusion The preparative method is simple and feasible.The quality of insitu gelling of Hydrochloride Levofloxacin Eye Drops is stable and controllable.

Key words：levofloxacin；insitu gelling；eye drops；quality control

左氧氟沙星是新一代廣譜、高效氟喹諾酮類抗微生物藥，抗菌活性是氧氟沙星的2倍，在水中的溶解度是氧氟沙星的8倍[1]。該藥在體內(nèi)吸收迅速，多種劑型已廣泛用于各種疾病的治療，效果良好。其眼內(nèi)通透性良好，以0.3%的滴眼液?jiǎn)未蔚窝劭稍诜克羞_(dá)到多數(shù)敏感菌的最低抑菌濃度(MIC)[2]。由于眼部運(yùn)動(dòng)，滴眼液用后大部分經(jīng)鼻淚管流出，或被淚液稀釋，或直接流出，常通過增加給藥頻率或提高藥物濃度彌補(bǔ)這一不足，但高濃度藥物會(huì)增加全身性毒副作用[3]。為了提高滴眼液生物利用度及延長(zhǎng)藥物作用持續(xù)時(shí)間，筆者研制了左氧氟沙星原位膠化滴眼液，并采用高效液相色譜法測(cè)定其含量，報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 1100型高效液相色譜儀（安捷倫公司），包括在線脫氣機(jī)、G1311A四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、Agilent化學(xué)工作站。左氧氟沙星原料(河南省龍泉集團(tuán)藥業(yè)有限公司，純度為97.78%，批號(hào)為20060220)；左氧氟沙星對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為1305182200602)；海藻酸鈉(青島膠南明月海藻化工有限公司，藥用級(jí)，批號(hào)為20060225)；氯化鈉、羥苯乙酯（藥用級(jí)），乙醇（色譜純），其他試劑（分析純）。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方及制備

處方：左氧氟沙星3 g，海藻酸鈉5 g，羥苯乙酯0.5 g，氯化鈉8.5 g，注射用水加至1 000 mL。

制備：稱取海藻酸鈉5 g，加水200 mL，緩慢攪拌使之溶解，靜置備用；稱取羥苯乙酯0.5 g，加水500 mL，煮沸，緩慢攪拌使之溶解；精密稱取左氧氟沙星3 g，氯化鈉8.5 g，加入其中，攪勻后加入制備好的海藻酸鈉溶液，緩慢攪拌至澄清，以0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)pH至5.0～6.0，加水至900 mL。以0.8!m的濾膜濾過，自濾器上添加注射用水至1 000 mL，搖勻，嚴(yán)封，用100℃ 流通蒸汽滅菌30 min，分裝即得，10 mL/支。

2.2 一般質(zhì)量控制

性狀：本品為無色或淡黃色澄明液體。

鑒別：在含量測(cè)定項(xiàng)下，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與左氧氟沙星對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。

檢查：pH為5.0～6.0，其他應(yīng)符合2005年版《中國(guó)藥典（二部）》眼用制劑項(xiàng)下的規(guī)定[4]。3批樣品的pH平均值為5.57。

2.3 含量測(cè)定（高效液相色譜法）

2.3.1 溶液配制

精密稱取左氧沙星對(duì)照品31.3 mg，置100 mL量瓶中，用0.01 mol/L鹽酸溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻即得質(zhì)量濃度為0.313 g/L的對(duì)照品溶液，避光冷藏保存；精密量取樣品1 mL，置100 mL量瓶中，用0.01 mol/L鹽酸稀釋至刻度，搖勻，過0.45!m微孔濾膜，取續(xù)濾液作為供試品溶液；除不加左氧氟沙星外，依法制備陰性樣品，按供試品溶液制備方法制得陰性對(duì)照品溶液。

2.3.2 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Zorbax SB-C18柱(250 mm ×4.6 mm，5!m)；流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀3.4 g，磷酸4 mL，加水至1 000 mL，pH=2.8)-甲醇(65 ∶35)；流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：293 nm；進(jìn)樣量：20!L。在此條件下，主藥和其他雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于1.5。色譜圖見圖1?？梢?，空白輔料對(duì)樣品測(cè)定無干擾，樣品主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品主峰的保留時(shí)間一致。

2.3.3 方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：精密量取對(duì)照品溶液，用0.01 mol/L的鹽酸溶液稀釋成質(zhì)量濃度分別為 9.39，15.65，31.30，43.82，50.08，62.60!g/mL的系列溶液。取20!L進(jìn)樣，以左氧氟沙星的峰面積(A)對(duì)進(jìn)樣質(zhì)量濃度(C)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 A=83.932 C+29.48，r=1.00（ n=6)。結(jié)果表明，左氧氟沙星質(zhì)量濃度在9.39～62.60!g/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

圖1 高效液相色譜圖

精密度試驗(yàn)：精密量取對(duì)照品溶液1.0 mL，置10 mL量瓶中，加0.01 mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，分別于1 d內(nèi)和不同天內(nèi)依法測(cè)定含量。結(jié)果日內(nèi)精密度的 RSD為0.98%（n=3），日間精密度的 RSD為0.39%（n=3），表明方法精密度良好。

重現(xiàn)性試驗(yàn)：精密量取同一批樣品1.0 mL，置100 mL量瓶中，加0.01 mol/L鹽酸至刻度，搖勻，依法進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果平均含量為28.78!g/mL，RSD為1.41%（n=5)，表明方法重現(xiàn)性良好。

回收率試驗(yàn)：精密量取對(duì)照品溶液10 mL，置100 mL量瓶中，再加入1.0 mL陰性對(duì)照品溶液，以0.01 mol/L鹽酸溶液稀釋至刻度，依法測(cè)定峰面積并計(jì)算含量。結(jié)果見表1。

表1 左氧氟沙星回收率試驗(yàn)結(jié)果（n=6）

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，于 0，2，4，6，8 h時(shí)分別進(jìn)樣測(cè)定含量。結(jié)果平均含量為28.97!g/mL，RSD為1.02%(n=5)。

2.3.4 樣品含量測(cè)定

取樣品3批，精密吸取適量，用0.01 mol/L鹽酸稀釋成每1 mL含左氧氟沙星0.3 mg的溶液，作為供試品溶液。依法測(cè)定峰面積并計(jì)算含量，本品含左氧氟沙星應(yīng)為標(biāo)示量的90.0%～110.0%。結(jié)果見表2。

3 討論

滴眼液具有易配制、易過濾除菌和使用方便等優(yōu)點(diǎn)，且易被患者接受，因此成為最主要的眼科用藥。但由于眼角膜屏障、淚液的稀釋和淚道的引流等，傳統(tǒng)滴眼液的生物利用度較低，療效往往欠佳[5]。一般滴眼劑以水溶液為主，包括少數(shù)水性混懸液，用后約有70%的藥液直接從眼中溢出，若眨眼將有90%的藥液損失；凝膠劑雖然能延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間，達(dá)到增加療效的作用，但也有分劑量不準(zhǔn)確、黏度較大、給藥不方便、患者順應(yīng)性不好等缺點(diǎn)。原位膠化滴眼劑不同于傳統(tǒng)的親水凝膠劑，是指以溶液狀態(tài)給藥后立即在用藥部位發(fā)生相轉(zhuǎn)變形成的非化學(xué)交聯(lián)的半固體制劑[6]。藥物在眼部被相對(duì)固定，局部吸收較多，某些極苦或強(qiáng)刺激性的藥物不會(huì)大量迅速流入口鼻，減輕了患者痛苦，患者依從性大大提高，在一定程度上還減少了用藥量，減少了不良反應(yīng)的發(fā)生。原位膠化滴眼劑以其分劑量準(zhǔn)確、使用方便、生物利用度高、滯留時(shí)間長(zhǎng)、控制釋藥性能良好、患者順應(yīng)性好而成為眼用制劑研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（，n=3）

表2 樣品含量測(cè)定結(jié)果（，n=3）

批號(hào)09041701 09041702 09041703標(biāo)示量(%)93.43±2.18 93.81±1.67 96.37±1.30 RSD(%)2.33 1.78 1.34

人的淚液中含有大量Na+，K+，Ca2+等陽(yáng)離子，某些多糖類衍生物能夠與其中的陽(yáng)離子絡(luò)合發(fā)生構(gòu)象改變，使溶液黏度急劇增大，溶液發(fā)生相變，轉(zhuǎn)化成凝膠狀態(tài)，而在眼中形成凝膠[7]。本制劑中的海藻酸鈉就具有這一特性，在遇到陽(yáng)離子時(shí)能迅速發(fā)生相變，黏附在角膜上，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間。

左氧氟沙星原位膠化滴眼劑中的海藻酸鈉具有一定的黏度，容易堵塞色譜柱，影響測(cè)定，故筆者采用離心法消除海藻酸鈉的干擾。方法學(xué)考察結(jié)果表明，高效液相色譜法能夠滿足本制劑質(zhì)量控制的要求。

[1]單愛連，呂 媛，李家泰.左旋氧氟沙星與氧氟沙星臨床應(yīng)用進(jìn)展評(píng)價(jià)[J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志，1997，13(2)：115.

[2]陳 悅，張俊杰，陣祖基.左旋氧氟沙星滴眼液的兔眼內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究[J]. 眼科研究，2001，19(5)：429.

[3]Balasubramaniam J，Pandit JK.Ion-Activated In Situ Gelling Systems for Sustained Ophthalmic Delivery of Ciprofloxacin Hydrochloride[J].Drug Delivery，2003，10：185-191.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（二部）[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄 9.

[5]凌沛學(xué)，管華詩(shī)，榮曉花，等.眼科藥物傳遞系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2006，41(1)：729.

[6]魏 剛，徐 暉，鄭俊民.原位凝膠的形成機(jī)制及在藥物控制釋放領(lǐng)域的應(yīng)用[J]. 中國(guó)藥學(xué)雜志，2003，38(8)：564-568.

[7]張俊杰，高長(zhǎng)鳳，王麗婭.更昔洛韋原位膠化滴眼液兔眼部藥物動(dòng)力學(xué)及生物利用度研究[J].中華眼科雜志，2006，42(7)：637-641.

Preparation and Quality Control of Ion－Activated in Situ Gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops

Yang Yuanrong1，Ren Yijun1，Lin Feigang2
(1.Jingzhou Hospital Affiliated to Tongji Medical College，Huazhong University of Science and Techololgy，Jingzhou，Hubei，China 434020；2.Pharmacy and Nurse College，Yunyang Medical College，Shiyan，Hubei，China 442000)

TQ460.6；R988.1

A

1006－4931(2010）07－0038－02

楊遠(yuǎn)榮，男，碩士，副主任藥師，主要從事臨床藥學(xué)工作，（電話）0719-8499992（電子信箱）yangyr1970@sina.com。

2009－06－02；

2009－07－16）