影響甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的幾個(gè)因素分析

侯朝祥，趙培方，劉家勇，趙 俊，吳才文，崔 杰，陳學(xué)寬

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院甘蔗研究所／云南省甘蔗遺傳改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，開遠(yuǎn) 661600）

甘蔗組培是一種快速繁殖推廣應(yīng)用甘蔗良種的有效途徑，根據(jù)離體繁殖路線的不同，可分為愈傷組織成苗法和直接誘導(dǎo)成苗法，其中直接誘導(dǎo)成苗法又可根據(jù)接種外植體的不同，分為腋芽培養(yǎng)和莖尖培養(yǎng)。兩種成苗法，其技術(shù)流程都包括室內(nèi)培養(yǎng)和室外假植。目前室內(nèi)培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)較為成熟，但室外假植管理在實(shí)際應(yīng)用過程中，常受設(shè)施條件和管理技術(shù)的影響，導(dǎo)致成活率不高、成活苗的質(zhì)量差，嚴(yán)重影響著甘蔗組培快繁技術(shù)的應(yīng)用。針對(duì)這瓶頸問題，國(guó)內(nèi)已有研究人員[1－5]做了相關(guān)研究，并取得了可喜成績(jī)。但絕大多數(shù)研究重點(diǎn)是成活率的高低，而對(duì)成活植株的質(zhì)量評(píng)價(jià)較少。本文針對(duì)影響甘蔗組培苗一級(jí)假植成活質(zhì)量的幾個(gè)因素，將假植成活率和成活植株的形態(tài)特征結(jié)合起來，作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以云蔗新品種99－91的莖尖組培苗為材料，探索了不同消毒處理、不同苗床基質(zhì)、不同濃度NAA蘸根處理對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院甘蔗研究所自育品種云蔗99－91的莖尖組培苗。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及方法

為達(dá)到高效快捷的目的，參考研究資料，試驗(yàn)摸索分為3步，第一步確定最佳的消毒處理方式；第二步比較篩選最佳苗床基質(zhì)；第三步利用激素處理，全面提高假植苗質(zhì)量。

1.2.1 不同消毒處理對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響 以生土＋上層粗沙為基質(zhì)苗床，選取長(zhǎng)勢(shì)基本一致的組培苗，清洗干凈后，設(shè)兩種消毒處理，即0.1%高錳酸鉀40s和0.5%多菌靈5min。每處理種植3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)種植12余叢，植株成活后1個(gè)月，觀察統(tǒng)計(jì)成活情況，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取6叢，每叢隨機(jī)調(diào)查1株植株的株高、葉長(zhǎng)、葉寬，通過調(diào)查成活率、成活植株的株高、葉長(zhǎng)、葉寬（下同），比較兩種消毒處理方式對(duì)甘蔗組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

1.2.2 不同苗床基質(zhì)對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響 苗床基質(zhì)設(shè)計(jì)了7個(gè)處理：①生土；②生土＋上層有機(jī)質(zhì)；③生土＋上層細(xì)沙；④生土＋上層粗沙；⑤生土＋上層珍珠巖；⑥生土∶珍珠巖＝1∶1；⑦粗沙。每種苗床基質(zhì)的面積為0.36m2，即長(zhǎng)×寬為1.2m×0.3m，7個(gè)苗床間用塑料板隔離，并保持在同一個(gè)水平面，構(gòu)成一個(gè)大的整體苗床，假植管理技術(shù)一致。選取長(zhǎng)勢(shì)基本一致的組培苗，經(jīng)0.5%多菌靈浸泡5min消毒處理種植。1個(gè)月后調(diào)查統(tǒng)計(jì)不同苗床基質(zhì)上假植苗的成活率及成活植株形態(tài)，比較不同苗床基質(zhì)對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

1.2.3 不同濃度NAA蘸根處理對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響 選取長(zhǎng)勢(shì)基本一致組培苗清洗干凈，浸泡于0.3%的多菌靈溶液5min后，分別用濃度為0mg/L、2mg/L、6mg/L、12mg/L、18mg/L的NAA進(jìn)行蘸根處理20s，假植于生土＋上層粗沙的苗床上。假植51d后通過觀察統(tǒng)計(jì)成活率，測(cè)量成活植株的株高、葉長(zhǎng)、葉寬、根長(zhǎng)等形態(tài)指標(biāo)，比較不同濃度NAA蘸根處理對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響。

成活率計(jì)算公式：假植成活率（%）＝成活株數(shù)/假植株數(shù)×100%

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 不同消毒處理對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響有差異

兩種不同消毒處理方式對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響有差異。由表1可知，兩種不同消毒處理方式對(duì)甘蔗組培苗假植成活率的影響較小，但對(duì)成活植株質(zhì)量的影響較大，多菌靈處理的成活植株在株高、葉長(zhǎng)、葉寬方面，明顯優(yōu)于高錳酸鉀。

2.2 不同苗床基質(zhì)對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量有一定影響

不同苗床基質(zhì)對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量有一定影響，根據(jù)表2可知，生土＋粗沙的苗床基質(zhì)較其他苗床基質(zhì)，在成活率、株高、葉長(zhǎng)、葉寬、草害方面均較佳；生土＋細(xì)沙的成活率僅為66.0%，可草害較輕，植株性狀一般；生土＋珍珠巖的成活率較高，達(dá)到了100.0%，但植株的株高、葉長(zhǎng)、葉寬相與生土＋粗沙相比均較低；生土、粗沙基質(zhì)的成活率分別為96.0%、84.5%，但植株的株高、葉長(zhǎng)、葉寬較低，且生土的草害最為嚴(yán)重。

2.3 不同濃度NAA蘸根處理對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量影響較大

由圖1可以看出，應(yīng)用不同濃度的NAA蘸根處理甘蔗莖尖組培苗，對(duì)其假植成活質(zhì)量有較大影響，蘸根處理的成活率較對(duì)照有所降低，可成活植株的根長(zhǎng)、株高、葉長(zhǎng)、葉寬均有較大增加，但不同濃度間增加的幅度有差異，且呈現(xiàn)出一定規(guī)律，在0～6mg/L間，成活植株的根長(zhǎng)、株高、葉長(zhǎng)、葉寬隨著濃度的增加而增加，當(dāng)處理濃度高于6mg/L時(shí)，成活植株的根長(zhǎng)、株高、葉長(zhǎng)、葉寬隨著濃度的增加而逐漸降低。

表1 不同消毒處理對(duì)甘蔗組培苗假植成活質(zhì)量的影響

表2 不同苗床基質(zhì)對(duì)甘蔗組培苗假植成活質(zhì)量的影響

圖1 不同濃度NAA蘸根處理對(duì)甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量的影響

3 討論

3.1 甘蔗莖尖組培苗在恒溫恒濕全營(yíng)養(yǎng)含糖的理想環(huán)境中培育而成，當(dāng)過渡到室外自然環(huán)境后，容易感染霉菌死亡。因此，在假植過程中，對(duì)其進(jìn)行消毒處理成為必不可少的有效措施，可消毒劑的類型、濃度、消毒時(shí)間都會(huì)影響消毒效果，直接影響著假植苗的成活率、成活植株的質(zhì)量，本文以常用型消毒劑多菌靈與廣西甘蔗研究所組培中心應(yīng)用的消毒劑高錳酸鉀，設(shè)計(jì)了兩個(gè)處理，進(jìn)行比較分析，從試驗(yàn)結(jié)果來看，用0.5%多菌靈浸泡甘蔗莖尖組培苗5min，對(duì)其假植成活質(zhì)量較好，雖然高錳酸鉀處理的成活率略高，可成活植株的質(zhì)量不如多菌靈處理，這可能是處理時(shí)間較長(zhǎng)的緣故。

3.2 苗床基質(zhì)與濾水透氣性密切相關(guān)，直接影響著甘蔗莖尖組培苗的假植成活質(zhì)量。本試驗(yàn)分析篩選出較佳的苗床基質(zhì)為“生土＋上層粗沙”，與何為中[4]等人的研究結(jié)論一致，與董立華[1]等、楊生超[2]等研究者報(bào)道提出的“沙土沙”苗床基質(zhì)有相似之處，省去了底層沙，減少操作，降低了管理成本。

3.3 NAA作為人工生長(zhǎng)素，具有促進(jìn)生長(zhǎng)、生根作用，在甘蔗組培中，被廣泛用于生根培養(yǎng)，而用于假植蘸根處理尚未見報(bào)道，為此本試驗(yàn)進(jìn)行了嘗試。結(jié)果表明：利用合適濃度的NAA蘸根處理，對(duì)提高甘蔗莖尖組培苗假植成活質(zhì)量確實(shí)有明顯效果，值得推廣利用。

綜合試驗(yàn)過程分析表明，甘蔗莖尖組培苗的一級(jí)假植成活質(zhì)量受多個(gè)因素的影響，主要涉及生根培養(yǎng)基、消毒防霉技術(shù)、苗床基質(zhì)、激素蘸根處理、水肥管理技術(shù)、設(shè)施條件等。其中篩選利用最佳激素配比的生根培養(yǎng)基，培育健壯植株是提高假植成活質(zhì)量的前提；保溫保水設(shè)施條件是高成活率必備條件；消毒防霉技術(shù)是關(guān)鍵；科學(xué)的苗床基質(zhì)、水肥管理技術(shù)起著積極作用；適當(dāng)濃度的激素蘸根處理可發(fā)揮重要的促進(jìn)作用。將這些影響因素有機(jī)結(jié)合起來，形成一套操作可行的技術(shù)措施，才能有效提高甘蔗莖尖組培苗的成活質(zhì)量，培育獲得健壯植株，推廣應(yīng)用于生產(chǎn)。

[1]董立華，張家瑞，桃聯(lián)安，等.甘蔗芽培苗一、二級(jí)苗圃管理技術(shù)[J].甘蔗，2001（2）：32-34.

[2]楊生超，楊清輝，李富生，等.甘蔗腋芽培養(yǎng)苗假植管理技術(shù)研究[J].種子，2001（4）：42-43.

[3]張春良.甘蔗腋芽組培苗一、二級(jí)苗定植管理技術(shù)[J].云南熱作科技，2002，25（1）：42.

[4]何為中，曾慧，劉紅堅(jiān)，等.影響甘蔗組培苗假植成活率的幾個(gè)因素的研究[J].甘蔗糖業(yè)，2002（3）：10-12.

[5]張躍彬.云南雙高甘蔗標(biāo)準(zhǔn)化綜合技術(shù)[M].昆明：云南科技出版社，2004