轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1在大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1在大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義

張 梁1,鄧益斌1,鄧巧瑩1,黃永秩2
(右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 1 .檢驗(yàn)科;2.病理科,廣西 百 色533000)

轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)是一類功能復(fù)雜的多肽類細(xì)胞因子,構(gòu)成一個(gè)多功能的細(xì)胞因子超家族,體內(nèi)幾乎所有細(xì)胞都能產(chǎn)生并存在其受體。TGF-β1是其成員之一,有資料表明TGF-β1在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過(guò)程中起著重要作用[2-4],但TGF-β1由抑癌作用轉(zhuǎn)變成促癌作用的機(jī)制尚未十分清楚。因此,本文通過(guò)對(duì)大腸癌TGF-β1的表達(dá)進(jìn)行研究,探討TGF-β1在大腸癌診療中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 材料 2005年8月-2008年8月在我院住院手術(shù)的62例大腸癌患者為病例組,男48例,女14例,年齡43-81歲,其中結(jié)腸癌40例,結(jié)腸腺癌22例,對(duì)照組為大腸癌患者自身癌旁正常組織,兔抗人TGF-β1一抗及即用型非生物素免疫組化ElivisionTM super試劑盒(福州生物技術(shù)開發(fā)有限公司)。

1.2 方法 所有標(biāo)本均經(jīng)過(guò)10%福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋,4 μ m厚連續(xù)切片,切片經(jīng)二甲苯脫蠟和梯度酒精水化,蒸餾水洗,經(jīng)檸檬酸鹽高溫修復(fù),冷卻后用PBS沖洗3次,每次3 min,滴加過(guò)氧化酶阻斷溶液,室溫下孵育10 min,PBS沖洗3次,每次3 min,分別滴加一抗(濃度1∶100;兔抗人TGF-β1),37℃孵育10 min,PBS沖洗3次,每次 3 min,加多聚酶結(jié)合物(試劑B)37℃孵育10 min,PBS沖洗3次,每次3 min,DAB室溫顯色3-5 min,自來(lái)水沖洗,蘇木素復(fù)染,經(jīng)梯度酒精脫水,二甲苯透明后中性樹脂封片,光鏡下觀察,陰性對(duì)照以PBS代替-抗,陽(yáng)性對(duì)照為已知陽(yáng)性切片。

1.3 染色結(jié)果判定 TGF-β1主要位于細(xì)胞漿內(nèi),部分位于細(xì)胞膜上。細(xì)胞內(nèi)具有棕黃色或黃褐色顆粒者為陽(yáng)性。每例隨機(jī)觀察5個(gè)視野,每個(gè)視野100個(gè)細(xì)胞,計(jì)數(shù)500個(gè)細(xì)胞中染色細(xì)胞陽(yáng)性數(shù)。陰性(-):陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜20%或無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞,與背景顏色一致;陽(yáng)性(+):陽(yáng)性細(xì)胞數(shù) 20%-70%;強(qiáng)陽(yáng)性(++):陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞70%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理分析,采用 χ2檢驗(yàn),P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TGF-β1在大腸癌及自身癌旁正常結(jié)腸組織中的表達(dá)比較 免疫組織化學(xué)染色后,兩組結(jié)果見表1。兩組數(shù)據(jù)比較有顯著性意義(P＜0.05)。

表1 TGF-β1在大腸癌及癌旁正常結(jié)腸組織中的表達(dá)比較(%)

2.2 TGF-β1表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系 在50例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中,TGF-β1表達(dá)見表2。兩組比較有顯著性意義(P＜0.05)。

表2 TGF-β1表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系

3 討論

TGF-β1在胚胎生長(zhǎng)發(fā)育、細(xì)胞分化、增殖及凋亡的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用,同時(shí)參與細(xì)胞外基質(zhì)的分泌和發(fā)育分化等多種生理過(guò)程。TGF-β1與腫瘤的發(fā)生,腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系,并在不同階段所起的作用不同。在腫瘤的早期階段,TGF-β1在細(xì)胞生長(zhǎng)及分化過(guò)程中起重要的調(diào)節(jié)因子作用,可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。隨著腫瘤的進(jìn)程,生長(zhǎng)環(huán)境的變化,TGF-β1成為腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及血管新生的重要刺激因子。有資料表明,TGF-β1隨著腫瘤惡性度的增高而表達(dá)增加,其作為一個(gè)判斷腫瘤預(yù)后的不良指標(biāo)[5-8]。隨著大腸癌浸潤(rùn)深度的增加,癌組織可以自分泌大量的TGF-β1與自身表面受體結(jié)合,從而促進(jìn)癌組織細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移;并可能通過(guò)旁分泌作用發(fā)揮其他功能,如誘導(dǎo)新生血管形成,促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成,抑制機(jī)體免疫反應(yīng)等,為癌組織提供了一個(gè)適宜的微環(huán)境,從而加速了癌細(xì)胞的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移[5-6],本研究結(jié)果顯示,大腸癌組TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)率90.3%,明顯高于正常結(jié)腸組織組11.3%(P＜0.05)。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的TGF-β1表達(dá)強(qiáng)度顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P＜0.05),提示TGF-β1可作為反映腸腫瘤侵襲性的參考指標(biāo)。

有研究認(rèn)為,TGF-β1具有抑制正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞的功能,是抑癌基因[7,8]。在本研究中,我們檢測(cè)到癌旁正常結(jié)腸組織,腺瘤組織中TGF-β1僅有微弱表達(dá),而在癌組織中有明顯表達(dá)。TGF-β1在正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞的過(guò)程中,由于機(jī)體的免疫監(jiān)視機(jī)制使TGF-β1大量分泌以阻止正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞,但腫瘤細(xì)胞上TGF-β1受體表達(dá)缺失或功能喪失,瘤細(xì)胞逃逸TGF-β1的生長(zhǎng)抑制作用而周圍正常細(xì)胞生長(zhǎng)被TGF-β1抑制,減少癌細(xì)胞增殖的空間限制,為癌細(xì)胞的生長(zhǎng)創(chuàng)造良好環(huán)境[5-8]。腫瘤細(xì)胞的無(wú)限生長(zhǎng)是腫瘤轉(zhuǎn)移的前提。TGF-β1在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的高陽(yáng)性率表明了其在腫瘤發(fā)生,發(fā)展及轉(zhuǎn)移中的復(fù)雜作用;推測(cè)檢測(cè)原發(fā)腫瘤標(biāo)本中TGF-β1的水平有可能反映整個(gè)腫瘤的一般轉(zhuǎn)移特性。由于TGF-β1在不同組織類型中作用變化很大,故大腸癌與TGF-β1的關(guān)系值得進(jìn)一步探討。

[1]Shion S R,singh A B,Moorthy K,et al.Smad4 regulates elaudirr 1 expression in a transforming growth factorbeta independent manner in colon cancer cells[J].Cancer Res,2007,67(4):1571.

[2]王 勇,許建明.轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1-Smad信號(hào)通路與結(jié)腸癌研究進(jìn)展[J].中華腫瘤防治雜志,2008,15(13):1036.

[3]張佩怡,禹 晶,王燕穎,等,TGF-β1和MPO在結(jié)腸腫瘤中的表達(dá)及意義[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2008,17(4):297.

[4]于金海,所 劍.轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子TGF-β1和Smad4在老年結(jié)腸癌中的表達(dá)[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2008,28(20):2022.

[5]李志剛.轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1信號(hào)傳導(dǎo)與結(jié)直腸癌[J].中國(guó)普通外科雜志,2007,16(4):372.

[6]王燕穎,孫麗芳,陳學(xué)英,等.TGF-β1與P53在結(jié)腸腫瘤中的表達(dá)及意義[J].臨床消化病雜志,2008,20(4):230.

[7]Jung B,Smith E J,Doetolero R T,et al.Influence of target gene mutations on survival,stage and histology in sporadic microsatellite unstable colon cancers[J].Int J Cancer,2006,118(10):2509.

[8]Munoz N M,u PTON m,Rojas A,et al,Transforming grouth factor beta type 11 inactivation induces the malignant transformation of intestinal neplasms in iniated bu A pc mutation[J].Cancer Res,2006,66(20):9837.

1007-4287(2010)09-1468-02

2009-11-28)