SULT1A1和雌、孕激素受體蛋白在子宮肌瘤中的表達(dá)及其臨床意義

王敏，李青，史春雪

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科，沈陽 110004）

子宮肌瘤是婦科最常見的良性腫瘤。其病因的研究頗多，一般認(rèn)為雌激素有誘發(fā)并促進(jìn)子宮肌瘤生長的作用。近來研究表明孕激素對子宮肌瘤更有促生長作用［1，2，3］。 SULT1A1是硫酸基轉(zhuǎn)移酶（SULTs）家族的主要成員之一，主要參與雌激素的無活性代謝和某些外源性復(fù)合物的硫酸化轉(zhuǎn)化［4，5］，通過催化雌激素的硫酸化反應(yīng)降低循環(huán)及靶組織雌激素暴露水平，進(jìn)而避免雌激素對子宮組織局部的過度刺激，降低子宮肌瘤的發(fā)病。本研究應(yīng)用免疫組化S-P法檢測SULT1A1、ERα、ERβ和PR在子宮肌瘤中的表達(dá)，以進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)SULT1A1、ERα、ERβ和PR與子宮肌瘤發(fā)生、發(fā)展之間的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 材料來源

實驗對象為2007年1月至2007年10月在沈陽市紅十字會醫(yī)院因子宮肌瘤行子宮切除術(shù)的30例患者和因?qū)m頸CINⅢ級或子宮脫垂行子宮切除術(shù)的10例患者的石蠟組織標(biāo)本。肌瘤組：取子宮肌瘤結(jié)節(jié)中心部位組織30例，患者年齡35～40歲，平均37.27±1.5歲。肌瘤包膜外組：取自肌瘤組同一患者的子宮肌瘤包膜外2 cm子宮肌層組織30例，患者年齡同肌瘤組；正常子宮肌層組：取正常子宮肌層組織10例，患者年齡35～40歲，平均37.40±1.5歲。標(biāo)本均經(jīng)術(shù)后病理確診。排除內(nèi)分泌干擾因素，即：手術(shù)時間為患者月經(jīng)周期的第8～14日，手術(shù)前6個月未服用激素類藥物，亦無糖尿病，甲狀腺功能亢進(jìn)或減低，卵巢腫瘤等并發(fā)癥。本研究經(jīng)中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)并征得患者知情同意。

1.2 方法

標(biāo)本取材后，常規(guī)用10%的甲醛溶液固定12～24 h，石蠟包埋。切4 um厚的石蠟切片，HE染色后光鏡下觀察組織學(xué)形態(tài)，篩選組織標(biāo)本。采用S-P免疫組化法測標(biāo)本中SULT1A1、ERα、ERβ和PR的表達(dá)情況。

1.3 結(jié)果判定

各個受體細(xì)胞核內(nèi)或細(xì)胞漿內(nèi)有棕黃色顆粒染色者為陽性染色細(xì)胞，陽性判斷采用Sinicrope改良法［6］。記錄各級切片中染色細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，分為5級：0分：染色細(xì)胞<5%；1分：染色細(xì)胞5%～25%；2分：染色細(xì)胞25%～50%；3分：染色細(xì)胞50%～75%；4分：染色細(xì)胞>75%。染色強(qiáng)度分為4級，0分：不顯色；1分：淺黃色；2分：棕黃色；3分：深棕色。每份切片記分=染色細(xì)胞計數(shù)分?jǐn)?shù)×染色強(qiáng)度分?jǐn)?shù)，所得分?jǐn)?shù)<1分為陰性結(jié)果，反之為陽性，2～3分為弱陽性（+），4～5分為中度陽性 （++），>5分為強(qiáng)陽性（+++）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 11.0軟件包對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。陽性率比較及相關(guān)性采用χ2檢驗和Spearman等級相關(guān)分析。P<0.05為差別有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SULT1A1，ERα、ERβ 、PR蛋白表達(dá)情況

SULT1A1蛋白陽性著色定位于細(xì)胞漿，ERα、ERβ、PR蛋白主要表達(dá)于上皮細(xì)胞核中。SULT1A1蛋白在子宮肌瘤、肌瘤包膜外肌層組織及正常子宮肌層的表達(dá)見圖1。ERα蛋白在子宮肌瘤、肌瘤包膜外肌層組織及正常子宮肌層的表達(dá)見圖2。ERβ蛋白在子宮肌瘤、肌瘤包膜外肌層組織及正常子宮肌層的表達(dá)見圖3。PR蛋白在子宮肌瘤、肌瘤包膜外肌層組織及正常子宮肌層的表達(dá)見圖4。

SULT1A1、ERα、ERβ和PR蛋白在子宮肌瘤組織、肌瘤包膜外肌層組織和正常子宮肌層組織的表達(dá)（表 1）。

表1 SULT1A1、ERα、ERβ和PR蛋白在子宮肌瘤組織、肌瘤包膜外肌層組織和正常子宮肌層組織的表達(dá)Tab.1 Expression of SULT1A1，ERα，ERβ，PR in uterine leiomyoma，normal myometrium out of uterine leiomyoma and normal myometrium

2.2 SULT1A1和 ERα、ERβ、PR蛋白 在子宮肌瘤組織中表達(dá)的相關(guān)性

SULT1A1與ERα、PR之間存在負(fù)相關(guān)關(guān)系，與ERβ之間無相關(guān)關(guān)系。ERα與PR之間存在正相關(guān)關(guān)系，與ERβ之間無相關(guān)關(guān)系。ERβ與PR之間無相關(guān)關(guān)系。

3 討論

雌激素是誘發(fā)子宮肌瘤的一個重要的內(nèi)分泌因素。孕激素對子宮肌瘤的生長也有重要作用。孕激素通過其受體（PR）發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)，PR的表達(dá)依賴于雌激素，雌激素有上調(diào)PR含量的作用。通過雌、孕激素受體與雌、孕激素較高的親和力，選擇性保留較高濃度的雌、孕激素，從而使其生物學(xué)效應(yīng)加強(qiáng)。本研究表明：子宮肌瘤組織ERα、ERβ和PR蛋白含量明顯高于肌瘤包膜外肌層組織（P<0.05），且也明顯高于正常肌層組織（P<0.05），可見子宮肌瘤患者的瘤體組織ER.、PR的含量增加，且ERα在子宮肌瘤組織中表達(dá)陽性率較高，推測子宮肌瘤的發(fā)生與雌激素受體水平升高有關(guān)，并且ERα在其中可能起主要作用。子宮肌瘤PR的表達(dá)強(qiáng)度比肌層有明顯的增高［7］，與郁雯等［8］研究結(jié)果相同。相關(guān)分析表明：PR與ERα蛋白的表達(dá)強(qiáng)度正相關(guān)，隨著ERα表達(dá)強(qiáng)度的升高PR表達(dá)強(qiáng)度升高，推測兩者可能在作用機(jī)制上存在某種聯(lián)系，可能是因果關(guān)系，也可能是伴隨關(guān)系。通過相互調(diào)節(jié)，共同發(fā)揮促進(jìn)肌瘤發(fā)生、發(fā)展作用。

SULT1A1是SULT1亞家族的主要成員之一，屬Ⅱ相代謝酶，最近分子生物學(xué)及酶化學(xué)研究表明，SULT1A1的編碼基因稱為STP1，位于染色體16p12.1-p11.2上，其序列已被確定［9］。SULT1A1主要參與雌激素的無活性代謝，可催化內(nèi)源性雌激素發(fā)生硫酸化反應(yīng)，形成雌激素?zé)o活性形式即雌激素的硫酸酯復(fù)合物—硫酸化雌激素，這種復(fù)合物不能與雌激素受體結(jié)合而喪失活性，可降低循環(huán)及靶組織雌激素暴露水平。王敏等［10］已對絕經(jīng)后婦女肝臟和小腸的SULTs的硫酸化代謝進(jìn)行了研究。但在其它組織，如子宮組織，SULTs的生物學(xué)功能知之甚少。SULT1A1在子宮肌瘤組織中的低表達(dá)可以導(dǎo)致內(nèi)源性雌激素水平升高，雌激素有上調(diào)PR含量的作用，進(jìn)而促進(jìn)子宮肌瘤生長，為子宮肌瘤的病因?qū)W及治療學(xué)的研究提供了新思路。但SULT1A1對ERα、ERβ、PR數(shù)量的調(diào)控，及SULT1A1活性的精確控制及其機(jī)制還需進(jìn)一步深入研究。

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