探討 MMP9和 CD44V5表達(dá)與肺鱗癌浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

馮漢飛

肺鱗狀細(xì)胞癌是我國(guó)常見的肺部惡性腫瘤之一,肺癌術(shù)后轉(zhuǎn)移是肺癌患者死亡的主要原因,探討與肺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)的生物學(xué)標(biāo)記備受關(guān)注[1]。研究表明 MMP9(基質(zhì)金屬蛋白水解酶)和 CD44V5(細(xì)胞黏附分子)在人類多種惡性腫瘤中有較高水平的表達(dá)并與腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移有關(guān)。不同病理組織學(xué)分級(jí)和生物學(xué)標(biāo)記的肺鱗狀細(xì)胞癌治療和預(yù)后有一定差異,因此對(duì)肺鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行 MMP9和 CD44V5標(biāo)記測(cè)定很有必要,對(duì)這兩種標(biāo)記物進(jìn)行聯(lián)合標(biāo)記測(cè)定,則預(yù)測(cè)肺鱗狀細(xì)胞癌復(fù)發(fā)的準(zhǔn)確率更高。如聯(lián)合標(biāo)記均為陽(yáng)性者,在術(shù)后的進(jìn)一步治療、復(fù)查、隨訪等均應(yīng)采取更為積極的態(tài)度,而聯(lián)合標(biāo)記均為陰性者提示預(yù)后良好。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集本院 2000年 6月—2009年 12月肺鱗狀細(xì)胞癌 (其他各類型癌不作統(tǒng)計(jì))手術(shù)切除標(biāo)本 87例。其中男 62例,女 25例,年齡 32～75歲,平均年齡 (59.63±3.27)歲。標(biāo)本用 10%甲醛溶液固定,行蠟包埋組織塊,制成 4μm切片。全部患者術(shù)前均未經(jīng)過任何抗癌治療。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 免疫組化技術(shù)采用常規(guī) S-P法。鼠抗人MMP9、CD44V5,單克隆抗體和 S-P試劑盒 (超微)購(gòu)自福建省邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。所有染色均用已知陽(yáng)性片作陽(yáng)性對(duì)照。

1.2.2 分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù) 《中國(guó)腫瘤病理學(xué)分類》對(duì)肺鱗狀細(xì)胞癌的分級(jí)法[2],將 87例肺鱗狀細(xì)胞癌分為高分化鱗狀細(xì)胞癌 9例 (10.35%),中分化鱗狀細(xì)胞癌 14例 (16.10%)、低分化鱗狀細(xì)胞癌64例 (73.55%)。肺炎性假瘤10例作為對(duì)照組。

1.2.3 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) 以 MMP9標(biāo)記細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞,CD44V5標(biāo)記細(xì)胞的細(xì)胞膜出現(xiàn)棕色顆粒為陽(yáng)性細(xì)胞。根據(jù)表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞在同類細(xì)胞中所占比例將結(jié)果分為陰性、弱陽(yáng)性、陽(yáng)性 3個(gè)等級(jí),＜5%的細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)為陰性 (-),5%～10%的細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)為弱陽(yáng)性 (±),＞20%的細(xì)胞呈陽(yáng)性反應(yīng)為陽(yáng)性 (+)。

1.2.4 數(shù)值測(cè)量計(jì)算步驟 石蠟組織塊 4μm切片,MMP9和CD44V5標(biāo)記,在顯微鏡下 (400倍視野)觀察,固定各測(cè)量條件,經(jīng)攝像系統(tǒng)提取圖像,對(duì) 87例肺鱗狀細(xì)胞癌每例在上、下、左、右、中間各連續(xù)測(cè)量 20個(gè)細(xì)胞 (相互融合或重疊者不作統(tǒng)計(jì)),檢測(cè)每例肺鱗狀細(xì)胞癌陽(yáng)性細(xì)胞標(biāo)記的結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 肺鱗狀細(xì)胞癌中 MMP9和 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記 87例肺鱗狀細(xì)胞癌組織中 MMP9和 CD44V5聯(lián)合表達(dá)陽(yáng)性為 40.23%(35/87),弱陽(yáng)性為 22.99%(20/87),陰性為 36.78%(32/87)。

2.2 MMP9和 CD44V5標(biāo)記肺鱗狀細(xì)胞癌與臨床病理分級(jí)的關(guān)系 通過對(duì) 87例肺鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行 MMP9和 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記,肺高分化鱗狀細(xì)胞癌陽(yáng)性 11.12%(1/9)、陰性88.88%(8/9);中分化鱗狀細(xì)胞癌陽(yáng)性 21.43%(3/14)、弱陽(yáng)性 35.72%(5/14)、陰性 42.85%(6/14);低分化鱗狀細(xì)胞癌陽(yáng)性 48.43%(31/64)、弱陽(yáng)性 23.44%(15/64)、陰性28.13%(18/64)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 3l例,為 35.64%(31/87)。聯(lián)合標(biāo)記陽(yáng)性與年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤大小無(wú)關(guān),與肺鱗狀細(xì)胞癌分化程度、浸潤(rùn)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。

3 討論

3.1 肺鱗狀細(xì)胞癌的轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)分為浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移和腫瘤細(xì)胞脫落遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移兩種。近年研究表明,MMP9標(biāo)記陽(yáng)性與浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移相關(guān),CD44V5標(biāo)記陽(yáng)性則與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)。腫瘤細(xì)胞在侵襲、轉(zhuǎn)移過程中必須破壞細(xì)胞外基質(zhì)和基質(zhì)膜等一系列自然屏障[3]。MMP9主要功能為降解Ⅳ型膠原,在腫瘤細(xì)胞突破基底膜屏障和浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中起重要作用,陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤侵襲密切相關(guān)。CD44V5與細(xì)胞黏附有關(guān),陽(yáng)性表達(dá)可改變腫瘤細(xì)胞表面黏附分子的構(gòu)成和功能,有助于腫瘤細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)移潛能。MMP9和 CD44V5促進(jìn)浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移作用機(jī)制可能是表達(dá) MMP9和CD44V5的癌細(xì)胞與淋巴管或血管內(nèi)某種配體結(jié)合,使浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移至那里的腫瘤細(xì)胞更加穩(wěn)定地寄宿與生長(zhǎng),在近處或遠(yuǎn)處形成腫瘤結(jié)節(jié)。

3.2 MMP9存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi),它的來(lái)源可能是癌細(xì)胞本身復(fù)制的產(chǎn)物,MMP9增多釋放到細(xì)胞外,破壞了細(xì)胞基質(zhì)防御系統(tǒng),侵略了癌周組織,為癌細(xì)胞增殖擴(kuò)大爭(zhēng)取空間。細(xì)胞膜的黏附分子有多種,而 CD44V5是其中一種,它給惡性腫瘤患者帶來(lái)不幸,是一種細(xì)胞分離分子,它的出現(xiàn)可能是癌細(xì)胞自身復(fù)制轉(zhuǎn)錄至細(xì)胞膜,也可能是其他細(xì)胞復(fù)制釋放出體液被癌細(xì)胞某種配體吸附在癌細(xì)胞膜上,CD44V5物質(zhì)的增加,細(xì)胞的黏附性降低,親和力脆弱,使癌細(xì)胞易脫落隨血管或淋巴管形成轉(zhuǎn)移癌。如有某種藥物或方法能夠阻止 MMP9和 CD44V5的產(chǎn)生,人們塒防治癌癥將有新的突破。

3.3 對(duì) 87例肺鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行 MMP9和 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記與臨床病理及治療關(guān)系,肺鱗狀細(xì)胞癌 MMP9和 CD44V5標(biāo)記均為陰性 36.78%(32/87),手術(shù)切除干凈后不需化療。肺鱗狀細(xì)胞癌的 MMP9和 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記弱陽(yáng)性 22.99%(20/87),手術(shù)切除后必須追蹤觀察。肺鱗狀細(xì)胞癌 MMP9和CD44V5聯(lián)合標(biāo)記陽(yáng)性 40.23%(35/87),必須采取積極有效的治療措施,密切隨防。因此在肺鱗狀細(xì)胞癌手術(shù)切除后,根據(jù)各患者 MMP9和 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記陰性和陽(yáng)性的結(jié)果,進(jìn)行合理的治療,才能收到理想的效果。

3.4 隨著肺鱗狀細(xì)胞癌惡性程度增高,MMP9和 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記的陽(yáng)性結(jié)果增多,肺鱗狀細(xì)胞癌陽(yáng)性 35例、弱陽(yáng)性 20例、陰性 32例,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 31例為 35.64%(31/87)。肺鱗狀細(xì)胞癌的惡性程度越高,MMP9和 CD44V5的陽(yáng)性率越多,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)越大。通過對(duì) 87例肺鱗狀細(xì)胞癌進(jìn)行MMP9和 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記,得出肺鱗狀細(xì)胞癌陰性和陽(yáng)性結(jié)果,可為肺鱗狀細(xì)胞癌的術(shù)后治療和預(yù)后提供較客觀的依據(jù)。

3.5 肺炎性假瘤 10例,作為對(duì)照組,進(jìn)行基質(zhì)金屬蛋白水解酶 MMP9和細(xì)胞黏附分子 CD44V5聯(lián)合標(biāo)記測(cè)定均為陰性,手術(shù)切除干凈則無(wú)后顧之憂,對(duì)肺炎性假瘤的治療及預(yù)后判斷很有意義。

1 邱小芬,王孝養(yǎng),張?jiān)鲣h,等.非小細(xì)胞肺癌中 CD44V 6的表達(dá)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2003,19(4):413.

2 張友會(huì),劉復(fù)生,劉彤華,等.中國(guó)腫瘤病理學(xué)分類 [M].北京:科學(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社,2001,2:107.

3 范松青,魏?jiǎn)?dòng),李美容,等.MMP2、MMP9、TIMPl和 TIMP2在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義 [J].診斷病理學(xué)雜志,2003,10(2):99.