Brm蛋白在胃癌組織的表達及其臨床意義

祝 青

(附屬菏澤市立醫(yī)院普外科,山東 菏澤 274031)

胃癌早期檢出率較低,病情進展快,是一種嚴重威脅人類身體健康的惡性腫瘤。因此,尋找能夠用于胃癌早期篩查和判斷臨床預后的分子指標具有重要的意義。研究發(fā)現(xiàn),Brm屬于SWI/SNF基因家族的核心成員之一,Brm蛋白表達降低或者基因突變與多種組織類型惡性腫瘤發(fā)生密切[1]。因此,Brm基因被認為是一種重要的抑癌基因。本研究采用免疫組化方法檢測胃癌以及正常胃黏膜組織中Brm蛋白表達情況,旨在探討B(tài)rm蛋白表達與胃癌發(fā)生發(fā)展以及淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系,為胃癌臨床診斷和預后判斷提供參考指標。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集我院手術(shù)切除的原發(fā)性胃癌組織69例,其中男性 41例,女性 28例,年齡37～63歲,平均45歲。同期隨機選取因良性病變(胃上皮內(nèi)瘤變、十二指腸球部潰瘍等)行胃次全切除術(shù)后的正常胃組織標本71例作為對照組,其中男性39例,女性32例,年齡35～60歲,平均 42歲 。所有胃癌的病理診斷均按照WHO分類中的TNM分期;所有組織按照常規(guī)程序固定、石蠟包埋和制作病理切片,病理診斷均經(jīng)兩位以上病理醫(yī)師會診確定,同時記錄患者的病史和臨床資料。

1.2 免疫組織化學染色 免疫組化采用S-P法,Brm抗體購自美國Santa Cruz公司,免疫組化試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)公司。所有標本經(jīng)10%福爾馬林固定,石蠟包埋,4 μ m連續(xù)切片。實驗用PBS代替一抗作為陰性對照。免疫組化染色步驟按照說明書進行,DAB顯色、蘇木精復染、二甲苯透明、封片。

1.3 判斷標準 細胞核呈棕黃色至深褐色者為染色陽性細胞,同時伴有部分胞質(zhì)呈淡黃色,僅有胞質(zhì)著色而細胞核沒有著色者則視為陰性。每例切片選5個 高倍視野,計數(shù)陽性細胞數(shù),以陽性細胞數(shù)占總細胞數(shù)的比計算陽性細胞百分率,以此表示細胞Brm陽性表達水平。

1.4 統(tǒng)計學處理 應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件,采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 Brm蛋白在胃癌組織表達 Brm蛋白表達主要定位在細胞核,在胃腫瘤組織細胞中陽性表達率為65.3%,而正常胃黏膜組織細胞表達陽性率為89.7%,兩組相比具有顯著性差異(P＜0.05)。

2.2 Brm蛋白表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系Brm蛋白表達水平與腫瘤細胞的分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及臨床分期有關(guān)(P＜0.05)。分化程度：高分化者57例,Brm表達陽性率40.2%;中/低分化者12例,Brm表達陽性率25.1%。浸潤深度：未浸及漿膜層者27例,Brm表達陽性率41.6%;浸及漿膜層者42例,Brm表達陽性率23.7%。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者23例,Brm表達陽性率45.0%;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者46例,Brm表達陽性率20.3%。TNM分期：Ⅰ+Ⅱ者 24例,Brm表達陽性率39.5%;Ⅲ+Ⅳ者45例,Brm表達陽性率25.8% 。

3 討論

SWI/SNF復合體通過改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)來調(diào)控基因表達,參與腫瘤發(fā)生、細胞分化和組織胚胎發(fā)育過程的調(diào)節(jié)[1]。Brm蛋白屬于SWI/SNF復合體的亞單位之一,具有ATP酶催化活性。利用細胞系以及基因敲除小鼠等方法的基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn),Brm蛋白具有抑制腫瘤發(fā)生的作用,因而Brm基因通常被稱為腫瘤抑制基因[2,3]。此外,來自臨床腫瘤組織的研究表明,Brm蛋白往往在肺癌、前列腺癌和皮膚癌等多種組織類型的原發(fā)腫瘤細胞內(nèi)表達異常,而且Brm蛋白異常表達與腫瘤細胞分化程度、腫瘤浸潤和淋巴轉(zhuǎn)移有一定的關(guān)系[1,4]。我們研究發(fā)現(xiàn),原發(fā)胃癌組織細胞內(nèi)Brm蛋白表達陽性率較正常胃黏膜細胞明顯降低,結(jié)合Brm蛋白在生理條件下具有抑制腫瘤發(fā)生的生物學作用,由此說明Brm蛋白表達異常降低可能在胃癌的發(fā)生過程中起重要的促進作用。上述結(jié)果與Yamamichi等[5]研究結(jié)果基本一致,他們同樣發(fā)現(xiàn)胃癌組織細胞內(nèi)Brm蛋白表達水平異常降低,而且Brm蛋白表達水平與胃癌組織類型、分化程度也密切相關(guān),Brm蛋白表達在惡性程度較高、分化差的組織類型較惡性程度較低、分化好的明顯降低。此外,我們進一步分析還發(fā)現(xiàn),Brm蛋白表達水平與胃癌細胞的分化程度、浸潤深度、臨床分期以及是否伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移同樣有關(guān),Brm蛋白表達水平在細胞分化好、浸潤程度低、臨床分期較早以及沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織細胞內(nèi)相對較高。由此說明Brm表達水平與胃癌的臨床病理指標有很好的相關(guān)性,因而可以作為判斷胃癌惡性程度以及臨床預后的分子指標。

總之,Brm蛋白在調(diào)控胃癌細胞分化、浸潤以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過程中起著非常重要的作用,Brm蛋白表達異常與胃癌的發(fā)生發(fā)展以及惡性程度密切相關(guān),檢測Brm蛋白表達可能有助于胃癌診斷以及臨床預后的評估。

[1] Klochendler-Yeivin A,M uchardt C,Yaniv M.SWI/SNF chromatin remodeling and cancer[J].Curr Opin Genet Dev,2002,12(1)：73-79.

[2] Yamamichi N,Yamamichi-Nishina M,Mizutani T,et al.The Brmgene suppressed at the post-transcriptional level in various human cell lines is inducible by transient HDAC inhibitor treatment,which exhibits antioncogenic potential[J].Oncogene,2005,24：5471 5481.

[3] Yamamichi-Nishina M,Ito T,Mizutani T,et al.SW13 cells can transition between two distinct subtypes by switching expression of BRG1 and Brmgenes at the post-transcriptional level[J].J Biol Chem,2003,278：7422 430.

[4] Reisman DN,Sciarrotta J,Wang W,Funkhouser WK,Weissman BE.Loss of BRG1/BRM in human lung cancer cell lines and primary lung cancers：correlation with poor prognosis[J].Cancer Res,2003,63：560 566.

[5] Yamamichi N,Inada K,Ichinose M,et al.Frequent loss of Brm expression in gastric cancer correlates with histologic features and differentiation state[J].Cancer Res,2007,67(22)：10727-10735.