乳腺癌組織中nm23、PS2蛋白的表達(dá)及臨床意義

張恒

近年來(lái)乳腺癌的發(fā)病有年輕化的趨勢(shì)。盡早的篩選出高、低危組人群進(jìn)行有針對(duì)性的治療對(duì)于改善預(yù)后尤為重要。nm23是一種腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因，其蛋白表達(dá)水平與腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移能力有關(guān)，高表達(dá)者具有低轉(zhuǎn)移性［1］。PS2蛋白是雌激素誘導(dǎo)蛋白的一種，其表達(dá)能確切地反映乳腺癌對(duì)激素的依賴(lài)［2］。2008年5至6月，我們采用免疫組化SP法檢查了60例乳腺癌患者腫瘤組織和50例乳腺良性疾病患者乳腺組織中的um23、PS2蛋白?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2002年5月至2003年5月我院收治的60例乳腺癌患者，年齡29～73歲，平均52.3歲;病理分級(jí)按Carfl'-Bloom-Richardson系統(tǒng)進(jìn)行分級(jí)，I級(jí)7例，Ⅱ級(jí)26例，Ⅲ級(jí)27例;臨床分期采用2001國(guó)際TNM分期標(biāo)準(zhǔn)：I期ll例，Ⅱ期40例，Ⅲ期9例;同側(cè)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移20例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移43例;雌激素受體(ER)陽(yáng)性44例，ER陰性19例，術(shù)前均未進(jìn)行新輔助化療。所有乳腺癌病例均行改良或保乳根治術(shù)，手術(shù)切除標(biāo)本經(jīng)甲醛固定、取材、常規(guī)脫水及包埋，為觀察組。另取50例乳腺良性疾病患者的手術(shù)切除標(biāo)本為對(duì)照組。

1.2 nm23、PS2蛋白檢測(cè)方法所有標(biāo)本均經(jīng)過(guò)10%甲醛固定，石蠟包埋，石蠟切片機(jī)3pm連續(xù)切片。采用免疫組化SP兩步法檢測(cè)nm23蛋白和PS2蛋白的表達(dá)情況。所采用鼠抗人nm-23單克隆抗體、鼠抗人PS2蛋白單克隆抗體和免疫組化SP染色試劑盒為美國(guó)Maxim公司生產(chǎn)。用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對(duì)照，以已知陽(yáng)性的切片作為陽(yáng)性對(duì)照。nm23蛋白以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性染色?；静恢邽?分，著色淡者為1分，著色適中者為2分，著色深者為3分。著色細(xì)胞占計(jì)數(shù)細(xì)胞百分率≤5%為0分，6%～25%為1分，26% ～50%為2分，≥51%為3分。將每張切片著色程度得分與著色細(xì)胞百分率得分相乘，即為陽(yáng)性系數(shù)。陽(yáng)性系數(shù)為0～1分為(-)，2～3分為(+)，4～6分為(++)，7～9分為(+++)。PS2蛋白的陽(yáng)性表達(dá)定位于細(xì)胞質(zhì)。染色強(qiáng)度分為3級(jí)：1級(jí)淺棕色;3級(jí)深褐色;2級(jí)介于級(jí)和3級(jí)之間。陽(yáng)性細(xì)胞占總腫瘤細(xì)胞的比例≤10%為(-)，11% ～25%為(+)，26%-50%為(4++)，≥51%為(+++)。(+)及以上者為PS2蛋白陽(yáng)性表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件 組間比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組nm23蛋白、PS2蛋白陽(yáng)性率分別為80.00%(48/60)和70.00%(42/60)，對(duì)照組分別為98.16%(49/50)和96.00%(48/50)，兩組相比，P均 ＜0.05。乳腺癌組織中nm23、PS2蛋白表達(dá)與腫瘤臨床病理指標(biāo)的關(guān)系見(jiàn)表1。觀察組nm23蛋白、PS2蛋白均陽(yáng)性者37例(A組)，nm23蛋白陽(yáng)性PS2蛋白陰性11例(B組)，nm23蛋白陰性PS2蛋白陽(yáng)性5例(C組)，nm23白、PS2蛋白均陰性10例(D組)，兩者的表達(dá)存在正相關(guān)關(guān)系，χ2=9.84，r=0.955，P ＜0.01。A、B、C、D組分別有34、9、4、6例患者術(shù)后5年無(wú)瘤生存，兩兩比較除A、D組患者5年生存率比較P＜0.05外，其余各組兩兩比較，P 均 ＞0.05。

3 討論

腫瘤的發(fā)生在很大程度上歸咎于癌基因和抑癌基因的異常及由此引起的蛋白產(chǎn)物的質(zhì)和量的變化，這些變化最終引起細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化、成熟、衰老和死亡的異常，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。

3.1 nm23蛋白表達(dá)與腫瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系nm23基因是Steeg等［3］在1988年采用消減雜交法從7個(gè)轉(zhuǎn)移潛力不同的K-1735鼠黑色素瘤細(xì)胞株中分離鑒定出來(lái)的，其在低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中的表達(dá)強(qiáng)度是高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株內(nèi)10倍;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的癌細(xì)胞nm 23蛋白、PS2蛋白表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系注：同一臨床病理參致內(nèi)比較。P＜0.05胞均有低水平的nm23 RNA表達(dá)，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者的癌細(xì)胞有較高水平的nm23 RNA表達(dá)。Belev等［4］的研究也顯示，nm23蛋白陽(yáng)性表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，與預(yù)后呈正相關(guān)，nm23蛋白陽(yáng)性者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移少，5年生存率高。本研究結(jié)果顯示nm23蛋白在乳腺良性疾病中的表達(dá)要高于在乳腺癌組織中的表達(dá)。在乳腺癌組織中nm23蛋白的表達(dá)與年齡無(wú)關(guān);與組織學(xué)分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。組織學(xué)分級(jí)越低、臨床分期越早、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者nm23蛋白陽(yáng)性率越高，反之nm23蛋白陽(yáng)性率越低，癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移浸潤(rùn)能力強(qiáng)，發(fā)生轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)性高，預(yù)后差，與文獻(xiàn)報(bào)道研究結(jié)果一致［5］;與ER狀態(tài)呈正相關(guān)，ER陽(yáng)性乳腺癌nm23蛋白表達(dá)陽(yáng)性率高于ER陰性者。因此，nm23蛋白低表達(dá)或無(wú)表達(dá)可能與乳腺癌發(fā)生轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為乳腺癌轉(zhuǎn)移潛能的判斷指標(biāo)，通過(guò)對(duì)nm23蛋白表達(dá)程度的檢測(cè)，有助于判斷腫瘤轉(zhuǎn)移情況和評(píng)估預(yù)后［6］。

3.2 PS2蛋白表達(dá)與腫瘤臨床病理參數(shù)的關(guān)系在乳腺癌細(xì)胞內(nèi)，PS2蛋白只雌激素控制下才能被轉(zhuǎn)錄，從而認(rèn)為PS2蛋白一種乳腺癌雌激素誘發(fā)蛋白。PS2蛋白的表達(dá)依靠腫瘤中的ER的存在。該蛋白表達(dá)與細(xì)胞分化有關(guān)。國(guó)內(nèi)楊新華等［9］研究發(fā)現(xiàn)PS2蛋白的表達(dá)與患者年齡、病理類(lèi)型和腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)有關(guān)，與腫瘤大小移無(wú)關(guān)。本研究實(shí)驗(yàn)結(jié)果也提示PS2蛋白在不同年齡階段患者中的表達(dá)存在差異性，其在中青年組的表達(dá)水平明顯高于老年組，這也說(shuō)明了雌激素刺激對(duì)PS2蛋白表達(dá)的調(diào)控作用［10］。本研究結(jié)果提示不同病理類(lèi)型的乳腺癌組織PS2蛋白的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能與實(shí)驗(yàn)方法、陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)及病例數(shù)量有關(guān)。本研究結(jié)果還提示PS2蛋白的表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)呈負(fù)相關(guān)，與ER表達(dá)呈正相關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。

3.3 nm23蛋白和PS2蛋白表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系國(guó)內(nèi)外的很多文獻(xiàn)報(bào)道nm23蛋白的表達(dá)水平與患者的預(yù)后有關(guān)，高表達(dá)患者5年生存率高，陰性或低表達(dá)者預(yù)后較差。本研究結(jié)果顯示兩者均陽(yáng)性患者5年無(wú)瘤生存率要高于均陰性患者，這也又一次印證了nm23蛋白與PS2蛋白檢測(cè)在指導(dǎo)乳腺癌患者治療與判定患者預(yù)后方面的價(jià)值。

綜上所述，nm23蛋白和PS2蛋白表達(dá)之間可能存在著相互協(xié)同的關(guān)系。nm23蛋白陰性和PS2蛋白陰性的乳腺癌患者細(xì)胞惡性化程度高，更容易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而兩者均陽(yáng)性的患者則其分化程度更高，惡性程度更低，不易發(fā)生腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，且更容易通過(guò)內(nèi)分泌治療獲益。兩者聯(lián)合檢測(cè)可以作為獨(dú)立指標(biāo)來(lái)估計(jì)乳腺癌的生物學(xué)行為，在區(qū)分乳腺癌高、低?；颊呒邦A(yù)測(cè)乳腺癌患者預(yù)后方面更有經(jīng)驗(yàn)交流意義。

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