高效液相色譜法測定泮托拉唑在健康人血中的濃度

蔡穎 羊強(qiáng) 符策浩

（海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院國家藥物臨床試驗機(jī)構(gòu) 海南?？?571101）

本品為泮托拉唑為一種人工合成的質(zhì)子泵抑制劑，主要用于治療胃、十二指腸潰瘍，也可以治療胃泌素瘤導(dǎo)致的潰瘍。本文采用的HPLC外標(biāo)法測定泮托拉唑血漿藥物濃度，方法簡便，重現(xiàn)性好，可用于泮托拉唑人體藥代動力學(xué)研究。

1 儀器與試劑

Waters1525液相色譜儀、Waters2487檢測器(美國)；TL-16R臺式高速冷凍離心機(jī)(上海市離心機(jī)械研究所),XW-80A旋渦混合器(上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠),島津AX200型電子天平(日本)，SZ-Ⅲ型自動三重純水蒸餾器（上海嘉鵬科技有限公司），PHS 3C精密pH計（上海精密科學(xué)儀器有限公司）等。

泮托拉唑鈉對照品由國家藥品生物制品檢定所提供(100575-200301含量:95.1%)。乙腈(美國Fisher公司生產(chǎn),色譜純),磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉(均為廣州化學(xué)試劑廠,AR)，磷酸（廣州化學(xué)試劑廠），純化水（自制）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

流動相：乙腈：磷酸鹽緩沖液（磷酸氫二鈉1.25g，磷酸二氫鈉0.3g，加純化水至1000mL，用磷酸調(diào)pH值至5.6）(33:67)，色譜柱：依利特Spherisorb C8,5um ，4.6mm×150mm，柱溫為30℃，紫外檢測波長288nm，流速為1.2mL/min。

2.2 血漿樣品處理

取肝素化血漿0.2mL，加入乙腈0.3mL,渦旋1min，10000rpm/min，溫度25℃，離心5min,吸取上清液50uL定量環(huán)進(jìn)樣，用峰面積進(jìn)行定量分析。在上述色譜條件下，泮托拉唑的出峰時間約為4.6min，與血漿中內(nèi)源性物質(zhì)分離良好。

2.3 血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

用空白血漿配制相當(dāng)于泮托拉唑濃度分別為0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0ug/mL的樣品，按“血漿樣品處理”項下操作，記錄對照品峰面積，以泮托拉唑峰面積對樣品濃度(ug/ml)作直線回歸，線性方程：Y=27705X-882.85，線性范圍為0.05～5.0ug/mL,相關(guān)系數(shù)R2＝0.9996。

2.4 方法精密度和回收率

配制含泮托拉唑0.1、1.0、5.0ug/mL血漿標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)份，分別于1d內(nèi)每個濃度平行5份按血漿樣品處理方法處理并測定，評價本法測定血漿中泮托拉唑含量的回收率及日內(nèi)精密度。連續(xù)3d配制并測定上述濃度樣品，考察方法日間精密度。3個濃度的萃取回收率在66.3%～73.6%之間，方法的回收率均在96.40%～111.6%之內(nèi)，日內(nèi)RSD<3%、日間中、高濃度RSD均<11%，低濃度<20%。符合生物等效性研究的方法學(xué)要求。

2.5 穩(wěn)定性考察

按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備方法，制備低、中、高濃度樣品數(shù)份，分別置室溫、凍存、凍融條件下存放不同時間后，按“2.2”項下方法處理并測定，考察樣品放置穩(wěn)定性，并考察了處理完的溶液的室溫穩(wěn)定性，結(jié)果表明泮托拉唑血漿樣品在室溫條件下至少能穩(wěn)定12h；凍存條件（-20℃）下至少能穩(wěn)定30d；在凍融4周期內(nèi)含量沒有下降。

3 討論

本品為泮托拉唑為一種人工合成的質(zhì)子泵抑制劑，主要用于治療胃、十二指腸潰瘍，也可以治療胃泌素瘤導(dǎo)致的潰瘍?？诜笪昭杆?、完全，單次口服40mg后,2～3h左右即可達(dá)到血藥濃度峰值，其口服制劑的絕對生物利用度為77%。80%的代謝產(chǎn)物通過腎臟排出，其余經(jīng)膽汁進(jìn)入糞便排出。泮托拉唑血藥濃度檢測方法國內(nèi)外均有文獻(xiàn)報道，大多采用HPLC內(nèi)標(biāo)法[1～3]，本文用HPLC外標(biāo)法測定人血漿中泮托拉唑濃度，結(jié)果表明它與內(nèi)源性雜質(zhì)分離良好，樣處理簡便，完全可以滿足臨床藥代動力學(xué)以及藥物代謝的要求。

[1]師少軍,李忠芳,陳華庭,等.泮托拉唑鈉腸溶片在中國男性健康志愿者體內(nèi)的藥動學(xué)和相對生物利用度研究[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2005,10(11):1236～1239.

[2]李佐軍,雷建平,吳翠芳,等.泮托拉唑鈉腸溶膠囊在健康人體中的生物等效性研究[J].中國藥師,2006,9(9):797～799.

[3]王永慶,吳春勇,張靜,等.泮托拉唑腸溶膠囊人體生物利用度及生物等效性研究[J].中國藥業(yè)，2009,18(3):3～4.