涂永勤,張德利,曾 緯,陳仕江,尹定華
(重慶市中藥研究院,重慶 400065)
冬蟲夏草Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.,系由冬蟲夏草菌侵染蝙蝠娥科、蝠蛾屬幼蟲而形成的蟲菌結(jié)合體,是我國(guó)特有的名貴中藥材。分布于我國(guó)西藏、青海、甘肅、云南、四川等省區(qū)海拔3000 m以上的局部高寒山區(qū)草甸地帶[1]。主治咳嗽、咳血、陽(yáng)萎遺精、病后體弱、老年慢性咳嗽等疾病[2]。目前,冬蟲夏草已出現(xiàn)嚴(yán)重的供需矛盾,而人工培殖冬蟲夏草就成了解決這一矛盾最有效的方法。在人工培殖產(chǎn)業(yè)化過程中發(fā)現(xiàn),人工培殖的冬蟲夏草常常因生長(zhǎng)發(fā)育不良,子實(shí)體不能伸出土,而導(dǎo)致蟲草質(zhì)量不佳。本實(shí)驗(yàn)主要研究環(huán)境因子對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響。
1.1.1 感菌幼蟲
小金蝠蛾 Hepialus xiaojinensis Tu et Ma,蟲種資源采自四川省小金縣崇德鄉(xiāng)崇德牧場(chǎng)冬蟲夏草天然產(chǎn)區(qū)。經(jīng)室內(nèi)人工飼養(yǎng)并感染冬蟲夏草菌,幼蟲感菌率85%以上,由康定中藏藥業(yè)科技有限責(zé)任公司提供。
1.1.2 飼養(yǎng)工具
養(yǎng)蟲盒系特殊定制規(guī)格為20 cm×30 cm×40 cm,有紅、綠和黃3種顏色的帶蓋塑料盒。
1.2.1 溫度對(duì)子實(shí)體形成的影響
在感菌幼蟲飼養(yǎng)到即將僵化時(shí),將其集中在養(yǎng)蟲盒中飼養(yǎng),待其僵化后,置于不同的溫度, 0℃~5℃變溫、5℃恒溫、12℃恒溫、室內(nèi)自然變溫(-10℃-5℃)和野外自然變溫下。每盒30條僵化幼蟲,每處理重復(fù)3次。觀察次年子實(shí)體的形成情況。
1.2.2 水分對(duì)子實(shí)體形成的影響
取不同含水量的基質(zhì)(含水量分別為30%、40%、50%、60%、70%和80%)放入養(yǎng)蟲盒中,再加入一定量飼料,放入即將僵化的幼蟲,蓋好養(yǎng)蟲盒蓋。以后每15 d~30 d添加1次水分,使基質(zhì)水分盡量保持在設(shè)定含水量范圍內(nèi)。每盒30條僵化幼蟲,每處理重復(fù)3次。觀察子實(shí)體生長(zhǎng)情況。
1.2.3 光照對(duì)子實(shí)體形成與伸展的影響
當(dāng)老熟幼蟲生長(zhǎng)到8月中旬時(shí),進(jìn)行集中飼養(yǎng),采用不同顏色的飼養(yǎng)盒、光照方向和強(qiáng)度,觀察其對(duì)子實(shí)體形成及伸展的作用。每盒30條老熟幼蟲,每處理重復(fù)3次。
不同溫度下冬蟲夏草子實(shí)體的形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。
表1 溫度與子實(shí)體形成的關(guān)系
由表1可知,僵化幼蟲在恒溫12℃下,子實(shí)體不能分化產(chǎn)生,在恒溫0℃和5℃下,有部分能形成子實(shí)體,溫度越低,形成越多。而在0~5℃變溫下,子實(shí)體形成率大幅提高,為85.56%。野外自然變溫下,子實(shí)體形成率達(dá)97.78%,幾乎全部產(chǎn)生子實(shí)體,因此,僵化幼蟲只有在經(jīng)過一定時(shí)間0℃左右的低溫處理后,才能產(chǎn)生子實(shí)體。
觀察不同含水量對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育影響的實(shí)驗(yàn),結(jié)果見表2。
表2 不同含水量對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的影響
由表2結(jié)果可知,隨著基質(zhì)含水量的增加,子實(shí)體的形成率逐漸提高,50%以下的含水量不利于子實(shí)體的形成和伸展。含水量達(dá)70%時(shí),子實(shí)體形成率為84.4%。加蓋養(yǎng)蟲盒內(nèi)的相對(duì)濕度一般都能達(dá)80%~100%,說明子實(shí)體的形成需要充足的水分和較高的相對(duì)濕度。在子實(shí)體形成階段,保持基質(zhì)含水量為60%~80%,相對(duì)濕度為95%~100%為宜,這與野外大雪及多雪年份蟲草產(chǎn)量高相一致。
光照對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育與出土的影響結(jié)果見表3。
表3 光照對(duì)子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育及出土的關(guān)系
由表3可知,當(dāng)用透明薄膜(1000 lx~1200 lx)做盒蓋,使光線從上向下照射時(shí),形成的子實(shí)體絕大多數(shù)都能伸出土外,出土率為95.45%,說明光照方向與子實(shí)體出土有關(guān),由土表向下的光照有利于蟲草子實(shí)體出土。各色養(yǎng)蟲盒培殖和背光暗室中培殖也能形成子實(shí)體,但出土率低。用紅、黃、綠3色養(yǎng)蟲盒和處于背光暗室(0~30 lx)中培殖的子實(shí)體,出土率分別為36.78%、40.45%、47.67%和53.49%,說明只要有微弱的光照(0~30 lx)菌核仍能分化形成子實(shí)體,光照強(qiáng)度對(duì)子實(shí)體形成幾乎沒有影響,但光線照射的方向與子實(shí)體是否出土有關(guān)。
本研究結(jié)果表明,環(huán)境因子對(duì)冬蟲夏草子實(shí)體形成具有十分重要的作用。通過本實(shí)驗(yàn)可得出幾點(diǎn)結(jié)論。子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育需要0℃左右的低溫刺激,溫度越低,越有利于子實(shí)體的形成,變溫有利于子實(shí)體的形成;子實(shí)體的生長(zhǎng)還需要有充足的水分及高濕環(huán)境,要求基質(zhì)含水量為60%~80%,相對(duì)濕度95%~100%為宜;在自然界中,大雪及多雪年份,天然蟲草產(chǎn)量高,水分充足,有利于子實(shí)體的萌發(fā)生長(zhǎng),這與我們的研究結(jié)果一致;微光或無光照(0~30 lx)都能誘導(dǎo)子實(shí)體分化,子實(shí)體有向光性生長(zhǎng)的特性。在野外,僵化前的幼蟲,借助土壤中微弱的光線,爬行到近土表1 cm~3 cm處,將頭向上然后僵化,這樣有利于子實(shí)體出土。在人工培殖冬蟲夏草過程中,發(fā)現(xiàn)許多蟲草形成子實(shí)體后,由于養(yǎng)蟲盒從各個(gè)方向透光,使其不能從基質(zhì)中伸出,不被發(fā)現(xiàn)而爛掉。這既是最后出土,也因生長(zhǎng)過度而質(zhì)量低劣。
[1]楊大榮,龍勇誠(chéng),沈發(fā)榮,等.云南蟲草蝠蛾生態(tài)學(xué)的研究-Ⅰ.區(qū)域分布和生態(tài)地理分布[J].動(dòng)物學(xué)研究,1987,8(1):1.
[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(2005年版一部)[S].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005.
[3]曾緯,尹定華.冬蟲夏草菌侵染及寄生階段的生長(zhǎng)發(fā)育研究[J].菌物學(xué)報(bào),2006,25(4):646-650.