咪達(dá)唑侖對異氟烷小鼠的鎮(zhèn)痛、催眠作用的影響

王 雷，孫 飛，李 艷，劉 備，龐 靜，趙冰雪，談艷雯，惠洪亮，廖藝聰，王紅軍，孟 晶

(1.徐州醫(yī)學(xué)院麻醉學(xué)院，2.江蘇省麻醉學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 徐州 221004)

異氟烷(Isoflurane，Iso)是臨床常用吸入麻醉藥。有研究發(fā)現(xiàn)［1］，GHB受體、神經(jīng)元煙堿受體與吸入麻醉藥的催眠作用有關(guān)，而 NMDA、GlyR及 AMPA與其鎮(zhèn)痛作用有關(guān)，但是GABA受體與吸入麻醉藥的鎮(zhèn)痛作用的關(guān)系還不明確［2］。咪達(dá)唑侖(Midazolam，Mid)是一種含咪唑環(huán)的苯二氮類藥物，可增強(qiáng)麻醉藥的鎮(zhèn)痛作用。本實(shí)驗(yàn)通過觀察咪達(dá)唑侖對異氟烷的鎮(zhèn)痛、催眠作用的影響，為臨床合理使用兩藥奠定理論基礎(chǔ)，并初步探討苯二氮受體與異氟烷作用機(jī)制的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器 吸入用異氟烷(批號(hào):61K05A)，英國羅地亞精細(xì)化工有限公司;咪達(dá)唑侖注射液(批號(hào):20100108)，江蘇恩華藥業(yè)股份有限公司;HH-42數(shù)顯恒溫?cái)嚢柩h(huán)水箱，常州國華電器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及方法 昆明種小鼠18～25 g，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。熱板法用♀，扭體法、翻正反射法♀♂兼用。每種方法均按分層隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)分為生理鹽水組(NS組)、Mid組(M組)、Iso組(I組)、咪達(dá)唑侖 +異氟烷組(MI組)4組，每組10只，使各組動(dòng)物平均體重、年齡相似。Mid腹腔注射劑量為 2.7 mg·kg－1，Mid和 NS注射容積為0.1 ml·(10 g)－1。Iso 腹腔注射鎮(zhèn)痛劑量為 2.5 μl·(10 g)－1［3］，催眠劑量為 6 μl·(10 g)－1［3］。

1.3 咪達(dá)唑侖對異氟烷鎮(zhèn)痛作用的影響

1.3.1 熱板法 小鼠置于(55±0.5)℃的恒溫水浴箱熱板上，記錄從小鼠放入到舔后足的時(shí)間作為痛閾(pain threshold in the hot-plate test，HPPT)，選取 5 s＜HPPT ＜30 s的小鼠。觀察時(shí)間超過60 s者HPPT記為60 s。用藥前測痛閾2次，間隔5 min，取其平均值為基礎(chǔ)痛閾。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，I組先ip Iso，5 min后 ip生理鹽水;MI組先 ip Iso，5 min后給 ip Mid，均為腹腔注射。記錄4組小鼠的基礎(chǔ)痛閾和用藥后5、15、30、45 min 的 HPPT。

1.3.2 扭體法 腹腔注射1%冰醋酸造模。注冰醋酸前5 min，各組給予相應(yīng)的藥物，給藥順序同熱板法。觀察并記錄致痛后15 min內(nèi)各組小鼠的扭體次數(shù)(writhing times，WT)。

1.4 咪達(dá)唑侖對異氟烷催眠作用的影響 給藥順序同熱板法。記錄小鼠翻正反射消失的持續(xù)時(shí)間，即睡眠時(shí)間(sleeping time，ST)。

2 結(jié)果

2.1 咪達(dá)唑侖對異氟烷鎮(zhèn)痛作用的影響 在熱板實(shí)驗(yàn)中，NS組、I組和M組HPPT較基礎(chǔ)痛閾均無差異，MI組 HPPT給藥后延長(P＜0.05或 P＜0.01);與 NS組相比，僅 MI組HPPT延長(P＜0.01)。在扭體法實(shí)驗(yàn)中可見MI組小鼠15 min扭體次數(shù)只有2～3次(P＜0.01)。見 Tab1。

2.2 咪達(dá)唑侖對異氟烷催眠作用的影響 NS組和M組小鼠均無入睡，I組有3只小鼠入睡，MI組入睡率為1.0(P＜0.01)。

3 討論

Wakai等［4］的研究顯示異氟烷在臨床濃度時(shí)能夠增強(qiáng)脊髓背角淺層神經(jīng)細(xì)胞GABA能神經(jīng)遞質(zhì)受體系統(tǒng)功能，抑制單突觸的興奮性神經(jīng)傳遞，而咪達(dá)唑侖可以通過GABA受體亞單位的苯二氮類結(jié)合位點(diǎn)發(fā)揮抗傷害作用［5］，苯二氮類受體與GABA受體及氯通道等結(jié)合成GABA-苯二氮類受體－氯通道復(fù)合物調(diào)節(jié)GABA的突觸前抑制作用，也使進(jìn)入脊髓和腦干等二級(jí)神經(jīng)元的神經(jīng)遞質(zhì)釋放減少［6］，從而使中樞接受的興奮性遞質(zhì)進(jìn)一步減少，增強(qiáng)了異氟烷的中樞抑制效果。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明咪達(dá)唑侖能夠增強(qiáng)異氟烷的鎮(zhèn)痛催眠作用。同時(shí)，咪達(dá)唑侖可減少病人的躁動(dòng)，故提示咪達(dá)唑侖與異氟烷合用于臨床麻醉是有利的。

Tab 1Effect of midazolam on the analgesia of isoflurane(writhing test，hot-plate test)(±s，n=10)

Tab 1Effect of midazolam on the analgesia of isoflurane(writhing test，hot-plate test)(±s，n=10)

*P＜0.05，＊＊P＜0.01 vs basal HPPT;##P＜0.01 vs NS

Group WT/n Basal HPPT/s HPPT(after injection of drugs)/s 5 min 15 min 30 min 45 min NS 45.3 ± 16.7 13.1 ±6.0 12.7 ±5.4 11.7 ± 3.7 11.5±4.8 12.9 ± 4.3 Mid 35.4 ± 15.6 12.9 ±4.1 9.8 ±2.7 11.5 ± 3.6 12.1 ±2.7 13.2 ± 4.8 Iso 30.9 ± 17.5 11.0 ±3.3 12.4 ±11.7 19.4 ± 12.8 11.8 ±5.8 12.5 ± 5.4 Mid+Iso 2.6 ±2.8## 13.6 ±2.9 29.2 ±16.1*## 44.8 ±20.8＊＊## 33.2 ±17.0＊＊## 22.0 ±8.8*##

［1］ 周美艷，戴體俊.吸入麻醉藥鎮(zhèn)痛、催眠作用受體機(jī)制研究進(jìn)展［J］.徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，30(5):346 －8.

［1］ Zhou M Y，Dai T J.Research progress on receptor mechanisms of analgesia and hypnosis of inhalation anesthetics［J］.Acta Acad Med Xuzhou，2010，30(5):346 －8.

［2］ 閆 肅，戴體俊，程 偉.全身麻醉藥鎮(zhèn)痛作用受體機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2008，24(10):1272 －5.

［2］ Yan S，Dai T J，Cheng W.Research progress on receptor mechanisms of analgesia of general anesthetics［J］.Chin Pharmacol Bull，2008，24(10):1272 － 5.

［3］ 宋蘇沛，胡柳青，劉傳飛，等.異丙嗪對異氟烷小鼠鎮(zhèn)痛、催眠、遺忘作用和治療指數(shù)的影響［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2010，26(1):66－9.

［3］ Song S P，Hu L Q，Liu C F，et al.The effects of promethazine on the analgesia，hypnosis，amnesia and therapeutic index of isoflurane treated mice［J］.Chin Pharmacol Bull，2010，26(1):66 － 9.

［4］ Wakai A，Kohno T，Yamakura T，et al.Action of isoflurane on the substantia gelatinosa neurons of the adult rat spinal cord［J］.Anesthesiology，2005，102:379 －86.

［5］ Yaksh T L，Allen J W.The use of intrathecal midazolam in humans:a case study of process［J］.Anesth Analg，2004，98:1536 －45.

［6］ 邵 兵，賴朝蓬，黃素清，劉琴湘.咪唑安定用于硬膜外術(shù)后鎮(zhèn)痛的臨床觀察［J］.中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2001，7(1):47.

［6］ Shao B，Lai C P，Huang S Q，Liu Q X.Effect of midazolam for epidural postoperative analgesia［J］.Chin J Pain Med，2001，7(1):47.