生姜提取物對(duì)四氯化碳損傷小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化的影響

孫小姍

姜是多年生草本植物，作為藥食兩用在我國(guó)已經(jīng)有悠久的歷史。姜精油是從姜根莖中用水汽蒸餾的方法提取出來(lái)的揮發(fā)性油分，主要成分為倍半萜烯類碳水化合物50%～60%，氧化倍半萜烯17%，其余主要是單萜烯類碳水化合物和氧化單萜烯類。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，生姜有抗氧化、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫等作用[1]。四氯化碳是肝臟毒理學(xué)中親肝性毒物之一，對(duì)肝臟具有較強(qiáng)的損傷作用，可導(dǎo)致細(xì)胞的變性、壞死、脂肪變等，并可導(dǎo)致大鼠免疫機(jī)能的損傷[2]。本研究以不同濃度的生姜提取物給小鼠灌胃后進(jìn)行四氯化碳急性染毒，觀察生姜提取物對(duì)四氯化碳所致的小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化損傷的保護(hù)作用。

1 材料和方法

1.1 生姜提取物的制備

采用市售鮮姜切碎后經(jīng)水蒸汽蒸餾，獲得黃色、透明、具有濃郁芳香氣味的油狀液體。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與器材

四氯化碳（上海申鶴化學(xué)品有限公司）；上海產(chǎn)722光柵分光光度計(jì)（上海第三分析儀器廠）；日本產(chǎn)UV-260型紫外分光光度計(jì)；日本產(chǎn)MTX-150型低溫高速離心機(jī)； 丙二醛試劑盒、超氧化物歧化酶試劑盒、谷胱甘肽過(guò)氧化酶試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 動(dòng)物分組及處理

選用昆明小鼠50 只，雌雄各半，體質(zhì)量（ 25±2） g，觀察1周后隨機(jī)分成5組，每組10只。各組分別是A組為陰性對(duì)照組（ 未染毒組），B組為陽(yáng)性對(duì)照組（ 單純?nèi)径窘M） ，C組為高劑量生姜提取物組，D組為中劑量生姜提取物組，E組為低劑量生姜提取物組，A、B組用4.2mL/kg體質(zhì)量色拉油灌胃，C、D、E組分別用8.4mL/kg體質(zhì)量、4.2mL/kg體質(zhì)量、2.1mL/kg體質(zhì)量生姜提取物灌胃，B、C、D、E組小鼠灌胃后6h經(jīng)口給予10%的CCl4染毒，劑量0.2mg/10（g·bw），A組給予植物油。染毒24h后，將小鼠脫臼處死，取肝臟。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

各組小鼠于染毒后24h，脫臼處死。取肝臟，將肝組織切碎，冰浴下勻漿，3600 轉(zhuǎn)/分離心5min，分光光度法測(cè)上清液的SOD 、GSHPx酶的活性和MDA的含量。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)0.05（雙側(cè)）。

2 結(jié) 果

由表1可以看出，陽(yáng)性對(duì)照組的SOD、GSH- Px活性明顯低于陰性對(duì)照組，MDA含量明顯高于陰性對(duì)照組；高劑量組的SOD、GSH- Px活性明顯低于其他各組，MDA含量明顯高于其他各組；低劑量組的SOD、GSH- Px活性明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組和高劑量組，MDA含量明顯低于陽(yáng)性對(duì)照組和高劑量組。

3 討 論

SOD酶能夠清除超氧陰離子自由基，對(duì)機(jī)體的氧化與抗氧化平衡起著至關(guān)重要的作用，機(jī)體清除氧自由基的能力與SOD活性的高低密切相關(guān)，SOD酶活性變化與體內(nèi)自由基的變化呈負(fù)相關(guān)[3]。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)物，MDA含量的高低間接反映了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度[4]。GSH-Px是體內(nèi)廣泛存在的特異催化還原型谷胱甘肽對(duì)過(guò)氧化氫的還原反應(yīng)的酶，可以起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用[5]。

表1 生姜提取物對(duì)CCl4損傷小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化影響（±s）

表1 生姜提取物對(duì)CCl4損傷小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化影響（±s）

n=10，a: compared with A，P＜0.05；b: compared with B，P＜0.05；c: compared with C，P＜0.05；d: compared with D，P＜0.05

Group SOD(NU/mgprot) MDA(Nmol/mgprot) GSH-Px(U/mgprot)A 140.33±10.20 53.25± 5.18 7.51±0.78 B 109.23± 7.26a 68.48± 5.74a 6.27±0.91a C 87.34±11.47ab 88.12±11.49ab 3.12±0.58ab D 131.84±12.77bc 70.48±11.79ac 6.41±0.53ac E 127.19± 8.86abc 41.37±10.31bcd 9.75±1.03bcd

實(shí)驗(yàn)中陽(yáng)性對(duì)照組SOD和GSH-Px酶活性明顯低于陰性對(duì)照組，MDA含量明顯高于陰性對(duì)照組，可能是由于CCl4導(dǎo)致小鼠體內(nèi)自由基增加，大量消耗SOD酶，同時(shí)小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化作用增加，MDA含量也明顯增加。高劑量組SOD和GSH-Px酶活性明顯低于陽(yáng)性對(duì)照組，MDA含量明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組，表明生姜提取物在高劑量時(shí)對(duì)小鼠肝臟抗氧化系統(tǒng)無(wú)保護(hù)作用，并有可能與CCl4協(xié)同增強(qiáng)了小鼠體內(nèi)的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，其機(jī)制有待進(jìn)一步研究。中、低劑量組SOD和GSH-Px酶活性均明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組，低劑量組MDA含量明顯低于陽(yáng)性對(duì)照組，說(shuō)明在中、低劑量時(shí)生姜提取物能夠降低CCl4引起的小鼠肝臟的脂質(zhì)過(guò)氧化作用，保護(hù)肝細(xì)胞免受脂質(zhì)過(guò)氧化的損傷，對(duì)CCl4的造成的肝損傷起保護(hù)作用。

結(jié)合各抗氧化指標(biāo)的變化可以看出中低劑量生姜提取物可以促使小鼠肝臟抗氧化系統(tǒng)恢復(fù)，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化作用的發(fā)生，減少肝細(xì)胞的破壞和使肝細(xì)胞功能活躍。說(shuō)明適量生姜提取物可通過(guò)保護(hù)小鼠抗氧化系統(tǒng)，減少自由基對(duì)小鼠肝細(xì)胞的損傷，拮抗CCl4對(duì)小鼠肝臟的損傷作用。

[1] 劉寧,霍貴成,張玲等.生姜對(duì)高血脂大鼠脂質(zhì)過(guò)氧化作用的研究[J] .衛(wèi)生研究,2003,32 (1): 22-23.

[2] 王丙云,陳龍,毛鑫智等.四氯化碳誘導(dǎo)的肝損傷對(duì)大鼠免疫機(jī)能的影響[J].中國(guó)病理生理雜志,2001,16(7):665-666.

[3] 張全武,孫少華,楊迪.慢性甲醛吸入對(duì)小鼠肝臟的氧化性損傷[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2003,30 (6): 767- 768.

[4] 潘洪志,邱向紅,王軍等.南瓜提取物對(duì)慢性苯染毒小鼠抗氧化酶的影響[J] .現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2005,32 (11): 1446-1447.

[5] 吳媚,張遵真,葉叢茂等.60Coγ射線對(duì)小鼠組織細(xì)胞氧化損傷的研究[J] .現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2005,32 (10) : 1267-1269.