早期梅毒的TRUST和TPPA檢測(cè)對(duì)比臨床探討

朱玉梅

早期梅毒的TRUST和TPPA檢測(cè)對(duì)比臨床探討

朱玉梅

目的 應(yīng)用兩種不同的血清學(xué)檢測(cè)方法測(cè)定血清梅毒抗體，比較其檢測(cè)方法的特性。方法 對(duì)200例臨床確診的患者同時(shí)進(jìn)行甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)和梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)兩種方法進(jìn)行檢測(cè)，分析和比較兩種方法的敏感性。結(jié)果 200例樣本中，186例為TPPA陽(yáng)性，陽(yáng)性率為93.1%；144例為TRUST陽(yáng)性，陽(yáng)性率為72.0%。結(jié)論 在梅毒診斷中，TPPA的敏感性高于TRUST。

梅毒；TPPA；TRUST；敏感性

梅毒螺旋體感染俗稱梅毒，是由蒼白密螺旋體(treponema pallidum)即梅毒螺旋體(treponema pallidum TP)所引起的一種慢性、系統(tǒng)性的傳播性疾病，是我國(guó)三大性傳播疾病之一[1]。當(dāng)人體感染梅毒后，螺旋體很快散播全身，可侵犯機(jī)體各組織與器官，臨床表現(xiàn)多樣，病程較長(zhǎng)，且時(shí)隱時(shí)顯。近年來我國(guó)梅毒的發(fā)病率有逐年增加的趨勢(shì)、研究新的快速、價(jià)廉、簡(jiǎn)便、敏感且特異的診斷方法是當(dāng)前主要研究熱點(diǎn)。

目前梅毒的實(shí)驗(yàn)室篩查診斷方法有兩類：一類是非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(如VDRL、RPR、USR、TRUST)，這些試驗(yàn)具有相同的標(biāo)準(zhǔn)化抗原(心磷脂、卵磷脂和膽固醇)，所以敏感性相同；另一類采用梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)(如TPHA、TPPA、FTAABS、TPELISA)，其特異性、靈敏度各異。免疫印跡法可作為確證試驗(yàn)，但成本較高、操作復(fù)雜，尚不適用于臨床篩查[2]。本文采用TRUST、TPPA同時(shí)檢測(cè)200例標(biāo)本，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本來源 標(biāo)本來源于2008年1月～2009年7月間本院性病門診確診梅毒患者200例，年齡19～52歲，男性107例，女性93例，采用真空采血管一次性抽取靜脈血約3mL，靜置待凝，分離血清，-20℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑和儀器 甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)試劑盒(上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供)；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)試劑盒(日本富士瑞必歐公司提供)；加樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司提供)。

1.3 方法 清晨空腹采集靜脈血3mL，所有標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行TRUST和TPPA檢測(cè)。兩項(xiàng)試驗(yàn)均為陽(yáng)性者為梅毒血清學(xué)陽(yáng)性，TRUST定性試驗(yàn)陽(yáng)性者加檢TRUST血清滴度(血清作1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64稀釋)。按試劑盒說明書操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS軟件檢驗(yàn)各組間差異。

2 結(jié)果

200例血清均用TRUST和TPPA兩種方法檢測(cè)，結(jié)果見表1。

在144例TRUST陽(yáng)性血清中做TPPA試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)有10例陰性，均可見TRUST對(duì)梅毒診斷特異性為93%與文獻(xiàn)[3]中描述基本相符。

以TPPA為標(biāo)準(zhǔn)TRUST的特異性為82.4%和敏感度93.5%。見表2。

3 討論

梅毒螺旋體(TP)又稱蒼白密螺旋體，人體是其惟一宿主，主要是以性傳播為主，人體在感染蒼白螺旋體后可產(chǎn)生兩種抗體：一種是針對(duì)病原體表面物質(zhì)產(chǎn)生的特異性抗體IgG和IgM；另一種則是梅毒螺旋體在破壞人體組織時(shí)釋放的類脂類抗原性物質(zhì)刺激機(jī)體產(chǎn)生具有抗體性質(zhì)的反應(yīng)素。

中華人民共和國(guó)《國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則》指出，梅毒診斷必須根據(jù)病史、臨床癥狀、體檢及實(shí)驗(yàn)室檢查等進(jìn)行綜合分析，慎重做出診斷。梅毒血清試驗(yàn)是梅毒臨床診斷中重要的依據(jù)之一，但決不能認(rèn)為是可以替代一切的惟一的依據(jù)，因?yàn)槿魏我环N試驗(yàn)都不能做到100%的準(zhǔn)確，都會(huì)出現(xiàn)一些假陽(yáng)性結(jié)果。所以，對(duì)其判斷應(yīng)該慎之又慎[5-6]。

梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷在梅毒的診斷中有非常重要的意義，是診斷梅毒的重要依據(jù)。當(dāng)人體感染梅毒螺旋體后4～10周，血清中可產(chǎn)生抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體(主要是IgG、IgM)和一定數(shù)量的抗類脂質(zhì)抗原的非特異性反應(yīng)素抗體(主要是IgM和IgG)。梅毒的實(shí)驗(yàn)室診斷就是運(yùn)用各種免疫學(xué)及生物化學(xué)的方法來檢測(cè)此兩種抗體。這種診斷梅毒的方法已成為梅毒臨床診斷不可缺少的步驟。由于梅毒病理和臨床經(jīng)過的復(fù)雜性，以及病期長(zhǎng)和時(shí)隱時(shí)現(xiàn)的特點(diǎn)，臨床上還存在生物學(xué)假陽(yáng)性的情況，故將臨床血清試驗(yàn)分為兩大類：一類為非梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)，常用性病研究實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(VDRL)、不加熱血清反應(yīng)素試驗(yàn)(USR)、血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)(RPR、TRUST)，主要應(yīng)用于初篩試驗(yàn)和療效觀察；另一類為梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)，常用有梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(TPHA)、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)、熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗(yàn)(FTA-ABS)、19sIgM梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(19sIgM．TPHA)試驗(yàn)，主要應(yīng)用于確證試驗(yàn)，對(duì)療效觀察意義不大。

梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)是針對(duì)梅毒特異性抗體的檢測(cè)。人體一旦感染梅毒螺旋體后，該抗體檢測(cè)終身為陽(yáng)性。它采用雙抗體夾心法，具有很高的特異性和敏感度，且重復(fù)性好。TPPA具有快速、簡(jiǎn)便、敏感和特異等特點(diǎn)。只要有血清通常用作1∶80以上稀釋微量的抗體就可使致敏明膠顆粒發(fā)生凝聚作用。試劑盒內(nèi)的血清吸收劑可消除試驗(yàn)中的生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)，提高實(shí)驗(yàn)的特異性。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)200例血清均用TRUST和TPPA兩種方法檢測(cè)，對(duì)比檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)TRUST陽(yáng)性率為72%，而TPPA實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性率為93%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明TPPA實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性檢測(cè)率較高，結(jié)合臨床資料200名患者臨床確診為早期梅毒，也與對(duì)梅毒診斷特異性為93.1%與文獻(xiàn)[3]中描述基本相符。

表1 TRUST和TPPA兩種方法檢測(cè)200例血清結(jié)果比較

表2 以TPPA為標(biāo)準(zhǔn)TRUST的特異性和敏感度

甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)則主要是測(cè)定血清中的心磷脂抗體。梅毒螺旋體內(nèi)部具有類脂質(zhì)抗原，在螺旋體屬中各群之間或同螺旋體以外均可出現(xiàn)交叉反應(yīng)，而且采用肉眼觀測(cè)，其漏檢率較高，故特異性、敏感度較低，但其價(jià)格低廉、操作簡(jiǎn)便。本研究以TPPA為標(biāo)準(zhǔn)TRUST的特異性為82.4%和敏感度93.5%說明以TPPA實(shí)驗(yàn)在特異性和敏感度等指標(biāo)均優(yōu)于TRUST實(shí)驗(yàn)。

雖然TPPA具有更高的敏感性和特異性，但TRUST實(shí)驗(yàn)具有快速簡(jiǎn)便的特性，這兩種試驗(yàn)都可用于梅毒的篩查和治療效果的檢測(cè)。試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)：方法簡(jiǎn)易、快速、敏感性和特異性好。適用于大量人群的血清篩查。早期梅毒硬下疳出現(xiàn)一二周后可呈陽(yáng)性，經(jīng)治療后血清滴度可下降并轉(zhuǎn)陰性，故可作為療效觀察、判愈、復(fù)發(fā)或再感染的指征。

TRUST滴度與疾病損害程度呈正相關(guān)，是疾病急性期出現(xiàn)較早的抗體，而本文所討論的TPPA是檢測(cè)IgG抗體，故當(dāng)急性期疾病未治愈或愈后患者都可能出現(xiàn)陽(yáng)性。TRUST試驗(yàn)在抗體含量過高時(shí)可出現(xiàn)前帶現(xiàn)象，生物學(xué)假陽(yáng)性反應(yīng)可出現(xiàn)于孕婦、患上呼吸道感染、肺炎、活動(dòng)性肺結(jié)核、風(fēng)濕性心臟病、亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、傳染性肝炎、肝硬化、慢性腎炎、鉤端螺旋體病、麻風(fēng)、瘧疾、猩紅熱、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡及海洛因成癮等疾病，常導(dǎo)致過激治療。因此對(duì)疾病的診斷特異性要與TPPA診斷結(jié)合在一起。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2010.20.073

517000 廣東省河源市中心血站 (朱玉梅)