毛細(xì)管氣相色譜法測定丙酸倍氯米松中3種有機(jī)溶劑殘留量

葉海青，傅應(yīng)華

（1.浙江余姚市人民醫(yī)院，余姚市 315400；2.嘉興學(xué)院醫(yī)學(xué)院，嘉興市 314001）

丙酸倍氯米松系一種強(qiáng)效外用糖皮質(zhì)激素類藥物，為《中國藥典》2005年版二部收載的品種[1]，劑型主要有氣霧劑和乳膏劑，其中氣霧劑可用于預(yù)防和治療常年性及季節(jié)性的過敏性鼻炎和血管舒縮性鼻炎。目前，丙酸倍氯米松質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚未收載殘留溶劑檢測項目，文獻(xiàn)也未見報道。為了提高藥品質(zhì)量及用藥安全，本文依據(jù)《中國藥典》2005年版[1]，對其生產(chǎn)工藝中使用的正己烷、乙酸乙酯和二氧六環(huán)等有機(jī)溶劑，參考有關(guān)文獻(xiàn)[1～3]，建立了毛細(xì)管氣相色譜法同時測定上述3種溶劑殘留量的方法。結(jié)果表明，該方法簡單、靈敏、準(zhǔn)確。

1 材料

1.1 儀器

6890N氣相色譜儀，配置氫火焰離子化檢測器（FID）、7683B自動進(jìn)樣器、10μL微量注射針、ChemStation色譜工作站（美國安捷倫公司）；AE240電子天平（瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司，精度：±0.01 mg）。

1.2 試藥

丙酸倍氯米松原料藥6批（某藥廠提供，批號：080115、080118、080121、080211、080215、080220，按干燥品計算，含量分別為99.3%，98.9%，100.2%，99.6%，99.8%，101.1%）；正己烷、乙酸乙酯均為分析純，二氧六環(huán)、二甲基亞砜（DMSO）均為色譜純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

HP-INNOWAX（PEG-20M）毛細(xì)管柱（30 m×0.32 μm×0.25 μm）；柱溫：程序升溫，初始溫度60 ℃，保持5 min，并以45 ℃·min－1速率升溫至200 ℃，保持3 min；載氣：高純氮氣，流速1.5 mL·min－1；FID：250 ℃；進(jìn)樣口溫度：200 ℃；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比1∶1；燃?xì)猓簹錃?，流?0 mL·min－1；助燃?xì)猓嚎諝?，流?00 mL·min－1；尾吹氣：氮氣，流速25 mL·min－1；進(jìn)樣量：1μL。

2.2 對照品溶液制備

分別精密稱取正己烷5.80 mg、乙酸乙酯100.0 mg、二氧六環(huán)7.60 mg，置于加有適量DMSO的20 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，作為殘留溶劑貯備液；再精密量取1 mL，置于10 mL容量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照溶液。

2.3 專屬性考察

分別取“2.9”項下樣品溶液（批號：080121）和混合對照溶液，注入氣相色譜儀，結(jié)果見圖1。

圖1 氣相色譜圖A.混合對照溶液；B.樣品溶液；1.正己烷；2.乙酸乙酯；3.二氧六環(huán)Fig 1 GC chromatographyA.mixture control；B.sample；1.n-hexane；2.ethyl acetate；3.dioxane

圖1結(jié)果表明，各殘留溶劑分離較好。

2.4 精密度

精密量取混合對照溶液1μL，注入氣相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積，計算正己烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)的RSD分別為2.6%、1.1%、1.4%，表明精密度良好。

2.5 線性關(guān)系考察

分別取正己烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)各25 mg，精密稱定，置于25 mL容量瓶中，加DMSO至刻度，搖勻；精密量取上述溶液適量，用DMSO逐級稀釋制成0.5、0.2、0.1、0.05、0.02 g·L－1的溶液，按上述色譜條件測定，所得峰面積（Y）與相應(yīng)殘留溶劑對照品濃度（X）作線性回歸處理。結(jié)果正己烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)的回歸方程分別為Y＝－18.428+2288.3X（r＝0.9999），Y＝－3.897+1800.7X（r＝0.9999），Y＝0.404+1581.1X（r＝0.9999）。結(jié)果3種溶劑檢測濃度線性范圍分別為0.0211～1.055、0.0215～1.074、0.0229～1.147 mg·mL－1。

2.6 溶液穩(wěn)定性試驗

取混合對照溶液，分別于0、2、4、6、8 h取樣測定峰面積，結(jié)果峰面積均無明顯差別，正己烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)的RSD分別為2.3%、1.8%、2.0%，表明溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 最低定量限

精密量取線性關(guān)系項下的0.02 mg·mL－1溶液適量，用DMSO逐級稀釋，依法測定，按S/N＝10計算最低定量濃度。結(jié)果，正己烷為0.027 μg·mL－1，乙酸乙酯為0.033 μg·mL－1，二氧六環(huán)為0.095 μg·mL－1。

2.8 加樣回收率試驗

取經(jīng)105℃干燥至恒重的樣品（批號為080115）約1g，置于10 mL容量瓶中，精密稱定，共9份，分別精密加入上述殘留溶劑貯備液0.8、1、1.2 mL，再加DMSO使溶解并稀釋至刻度，搖勻；再取混合對照溶液，依法測定，計算回收率。得高、中、低3個濃度的回收率（n＝3）分別為正己烷100.8%、101.7%、102.5%，RSD分別為1.8%、2.4%、2.8%；乙酸乙酯分別為101.0%、99.3%、100.8%，RSD 分別為1.6%、1.5%、2.2%；二氧六環(huán)分別為99.5%、98.9%、101.2%，RSD分別為2.5%、1.7%、2.6%。

2.9 樣品中殘留溶劑含量測定

取 批 號 為 080115、080118、080121、080211、080215、080220的6批丙酸倍氯米松各1 g，精密稱定，置于10 mL容量瓶中，加DMSO使溶解并稀釋至刻度，依法測定，結(jié)果除批號080118和080215樣品中檢出乙酸乙酯含量分別為0.10%與0.15%外，其余各批號均未檢出上述3種有機(jī)殘留溶劑。

3 討論

3.1 溶劑的選擇

丙酸倍氯米松不溶于水，但在DMSO中溶解，故選擇DMSO作為溶劑。

3.2 色譜柱與柱溫的選擇

考慮到正己烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)極性依次增強(qiáng)，經(jīng)試驗在PEG-20M極性色譜柱上分離效果良好。由于二氧六環(huán)和DMSO沸點較高，若采用等柱溫法，出峰時間長；為了縮短分析時間，改用程序升溫法，在正己烷、乙酸乙酯出峰后，快速升高柱溫加速二氧六環(huán)和DMSO出峰。結(jié)果，在給定的色譜條件下，正己烷、乙酸乙酯、二氧六環(huán)與DMSO之間均達(dá)到基線分離，一次進(jìn)樣在12 min內(nèi)完成測定，達(dá)到了快速分析的目的。

3.3 溶劑限度的擬定

根據(jù)《中國藥典》2005年版二部[1]規(guī)定，正己烷、二氧六環(huán)為二類溶劑，限度分別為0.029%、0.038%；乙酸乙酯為三類溶劑，限度為0.5%。因此，本品檢查結(jié)果合格。

[1]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典（二部）[S].2005年版.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：79、附錄ⅧP.

[2]欒成章，祝 波，王尊文，等.頂空氣相色譜法測定夫西地酸中有機(jī)溶劑殘留量[J].中國藥房，2006，17（7）：535.

[3]張 軍，孫會敏，李 科.氣相色譜法測定阿德福韋酯的10種殘留溶劑[J].藥物分析雜志，2005，25（6）：660.