耳腦膠粘合修復(fù)大鼠面神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究

蘇娟娟,關(guān) 鍵,王心,張國(guó)梁,朱麗萍

(1.佳木斯大學(xué)附屬口腔醫(yī)院頜外一科,黑龍江 佳木斯 154002;2.哈爾濱市第一醫(yī)院口腔科,黑龍江 哈爾濱 150010)

面神經(jīng)的損傷導(dǎo)致面部表情肌癱瘓,對(duì)患者來說影響極大。應(yīng)用顯微外膜縫合法修復(fù)面神經(jīng)是目前臨床上常用的方法,可是由于縫線存在異物反應(yīng),常規(guī)顯微修復(fù)會(huì)進(jìn)一步損傷神經(jīng)軸突,引起軸突組織錯(cuò)向生長(zhǎng),影響神經(jīng)修復(fù)的效果[1]。本實(shí)驗(yàn)是以現(xiàn)在常用的外膜縫合法為對(duì)照,研究耳腦膠粘合大鼠面神經(jīng)的應(yīng)用效果。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

健康雄性 Wistar大鼠 20只,體重260g～ 300g,隨機(jī)分為兩組,即耳腦膠粘合組(實(shí)驗(yàn)組)和外膜縫合組(對(duì)照組),每組10只,采用左側(cè)面神經(jīng)為修復(fù)模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

1.2.1 耳腦膠 (廣州白云醫(yī)用膠有限公司)。本品在凝血酶和纖維蛋白原的共同作用下,可有效止血、封閉創(chuàng)面、硬組織粘合和堵塞血管。在體內(nèi)應(yīng)用時(shí),固化膜可降解成水溶性的聚氰基丙烯酸及甲酸等,隨尿液排除體外,時(shí)間約一個(gè)月。

1.2.2 縫合線采用國(guó)產(chǎn)10-0尼龍線(上海元洪醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn))。

1.3 手術(shù)方法

采用100g/L水合氯醛0.3/kg腹腔注射進(jìn)行全身麻醉。麻醉成功后左側(cè)臥位于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上,將大鼠左側(cè)面頰部備皮,脫毛,碘伏消毒,鋪無菌巾,手術(shù)顯微鏡下,做左側(cè)面頰部斜行切口,長(zhǎng)約1.5cm,切開 ,分離顯露面神經(jīng),找到面神經(jīng)頰支,分開腮腺咬肌筋膜,將面神經(jīng)頰支解剖出來,距頸乳孔1cm處將面神經(jīng)頰支切斷;外膜縫合組,用10-0尼龍線吻合神經(jīng)外膜,4點(diǎn)、8點(diǎn)、12點(diǎn)方向各一針;耳腦膠粘合組,根據(jù)神經(jīng)外膜血管的走向,將面神經(jīng)頰支的兩斷端盡量對(duì)齊,耳腦膠滴于吻合端,30秒左右耳腦膠凝固,即可見粘合對(duì)位佳;將所有動(dòng)物左側(cè)面神經(jīng)頰支吻合好埋入頰肌,縫合切口,碘伏再次消毒。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

1.4.1 大體及手術(shù)顯微鏡下觀察

在術(shù)后8周取材時(shí),肉眼及在手術(shù)顯微鏡下觀察大鼠左側(cè)面神經(jīng)的恢復(fù)情況。

1.4.2 神經(jīng)電生理檢查

術(shù)后8周各組取8只大鼠再次進(jìn)行腹腔麻醉,顯露左側(cè)面神經(jīng),用丹麥產(chǎn) KEYPON T高速肌電誘發(fā)電位系統(tǒng),檢測(cè)神經(jīng)肌肉動(dòng)作電位,測(cè)定其潛伏期和波幅值。信號(hào)經(jīng)電腦分析程序處理。

1.4.3 組織學(xué)觀察

術(shù)后8周各組取8只電生理檢測(cè)結(jié)束后,于神經(jīng)吻合口處取材,用3/0尼龍線縛住神經(jīng)兩端,固定在小木板上,置于10%福爾馬林溶液內(nèi)固定,做縱切片進(jìn)行組織學(xué)觀察。每組其余2只大鼠迅速取吻合口處面神經(jīng),即投入3%的戊二醛中固定2h,然后從吻合口處切取1mm3小塊,用1%鋨酸固定,用于半薄切片亞甲藍(lán)-復(fù)紅染色和超薄切片透射電鏡觀察,病理切片計(jì)算機(jī)圖像分析,計(jì)算再生軸突數(shù)量、神經(jīng)纖維直徑及髓鞘厚度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 大體及手術(shù)顯微鏡下觀察

術(shù)后8周時(shí),外膜縫合組神經(jīng)吻合處有大量的瘢痕,與周圍組織界限不清;耳腦膠粘合組神經(jīng)清晰可見,吻合口處瘢痕很小,可見神經(jīng)生長(zhǎng)良好,且未見神經(jīng)瘤形成。

2.2 神經(jīng)電生理檢查

耳腦膠粘合組神經(jīng)潛伏期值小,波幅值大;而外膜縫合組神經(jīng)潛伏期值大,波幅值小。

2.3 組織學(xué)觀察

術(shù)后8周,縱向切片見耳腦膠粘合組扭曲較輕,瘢痕形成較少;外膜縫合組扭曲較明顯,呈盤旋狀 ,瘢痕形成較多。

在透射電鏡下觀察,術(shù)后8周時(shí)耳腦膠粘合組再生神經(jīng)中髓鞘結(jié)構(gòu)好,厚度基本接近正常,板層結(jié)構(gòu)清晰,軸突內(nèi)神經(jīng)絲和微管及線粒體結(jié)構(gòu)重現(xiàn),部分髓鞘呈灶性崩解;外膜縫合組再生神經(jīng)纖維中有髓神經(jīng)纖維分布較疏散,髓鞘厚薄不一致,軸突內(nèi)神經(jīng)微絲、微管結(jié)構(gòu)模糊,神經(jīng)絲密集,有空泡樣變性。

表1 粘合組與縫合組面神經(jīng)電生理及其他檢測(cè)指標(biāo)(±s,n=8)

表1 粘合組與縫合組面神經(jīng)電生理及其他檢測(cè)指標(biāo)(±s,n=8)

組 別 潛伏期(ms) 波幅(mv) 髓鞘厚度(nm) 軸突直徑(nm) 有髓纖維數(shù)(個(gè))粘合組 1.87± 0.29 1.02± 0.32 741.11± 192.44 3036.67± 647.54 443± 139.14縫合組 2.07± 0.12 0.82± 0.17 444.70± 96.27 3178.25± 611.07 279± 53.61 P＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＜0.05

3 討論

神經(jīng)斷端獲得正確的軸向?qū)ξ皇巧窠?jīng)修復(fù)的關(guān)鍵,目前臨床上常采用顯微外科技術(shù)進(jìn)行神經(jīng)外膜縫合。神經(jīng)外膜縫合能使神經(jīng)端端吻合,缺點(diǎn)是通過手術(shù),神經(jīng)纖維不能達(dá)到解剖復(fù)位,即精確對(duì)合,且會(huì)發(fā)生錯(cuò)誤生長(zhǎng),如雖為神經(jīng)纖維對(duì)合,但感覺神經(jīng)長(zhǎng)到運(yùn)動(dòng)神經(jīng)中,外膜縫合后,雖無張力,但在神經(jīng)中心區(qū)仍有空隙[2]。由醫(yī)用耳腦膠組成的快速醫(yī)用粘合劑,組織相容性好,適應(yīng)于人體組織,具有粘合強(qiáng)度大,快速完成止血、粘合,在體內(nèi)可快速固化、分解、排泄等特點(diǎn)。有人[3]將其歸類于軟組織醫(yī)用膠,可用于不同部位組織的粘合,已用于普外科和婦產(chǎn)科的一些手術(shù),但用于神經(jīng)外科手術(shù)的報(bào)道較少,用于面神經(jīng)的損傷修復(fù)少見報(bào)道。

我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中在解剖顯微鏡下,根據(jù)神經(jīng)外膜血管的走向,盡量將離斷的面神經(jīng)準(zhǔn)確對(duì)位,然后用耳腦膠滴到對(duì)合神經(jīng)斷端處粘合,這種方法操作較簡(jiǎn)便,且耳腦膠在凝固后可在神經(jīng)對(duì)合處形成一個(gè)凝膠環(huán),可起到再生室的作用,即便粘合過程中有少量的凝膠深入吻合端,也不會(huì)影響神經(jīng)的生長(zhǎng)[4]。用膠粘合修復(fù)面神經(jīng)損傷有以下優(yōu)點(diǎn):①可以避免由縫線引起的組織反應(yīng)。②操作相對(duì)簡(jiǎn)便,易于掌握,縮短了手術(shù)時(shí)間,不需要特殊設(shè)備,術(shù)中不會(huì)損傷神經(jīng)的內(nèi)部結(jié)構(gòu),吻合的神經(jīng)對(duì)位理想。③在某些特定部位的神經(jīng)修復(fù),如有骨性管道阻擋及一些難以顯露的手術(shù)區(qū)域,應(yīng)用膠粘合非常方便[5]。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示,耳腦膠粘合組和顯微縫合組在神經(jīng)吻合部位近端電刺激后口輪匝肌處神經(jīng)動(dòng)作電位潛伏期和波幅的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞ 0.05),這說明應(yīng)用耳腦膠粘合在神經(jīng)功能上的恢復(fù)可以達(dá)到和神經(jīng)外膜縫合相同的效果,且在大體觀察和手術(shù)顯微鏡下觀察,面神經(jīng)吻合口處形成的瘢痕組織很小,且沒有神經(jīng)瘤形成,神經(jīng)恢復(fù)效果較好,從長(zhǎng)遠(yuǎn)看來可加速神經(jīng)的恢復(fù),留下的后遺癥應(yīng)該很小。進(jìn)一步的組織學(xué)觀察和電鏡觀察結(jié)果顯示,耳腦膠粘合組再生的神經(jīng)纖維排列整齊,髓鞘結(jié)構(gòu)較好,板層結(jié)構(gòu)清晰,神經(jīng)纖維較外膜縫合組生長(zhǎng)好,可見應(yīng)用耳腦膠粘合修復(fù)神經(jīng)的效果較好。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,兩組的軸突直徑相比較,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但髓鞘厚度和有髓纖維數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,說明應(yīng)用耳腦膠粘合可以使神經(jīng)恢復(fù)的更好,對(duì)于神經(jīng)恢復(fù)遠(yuǎn)期效果好。這可能是由于耳腦膠既達(dá)到了使神經(jīng)相結(jié)合的目的,發(fā)揮了再生室的作用,且沒有縫線形成異物反應(yīng),使神經(jīng)組織生長(zhǎng)良好。

綜上所述,我們可以看出應(yīng)用耳腦膠修復(fù)面神經(jīng)的損傷,具有一定的優(yōu)勢(shì),能及時(shí)有效的連接上離斷的神經(jīng) ,使神經(jīng)可再生并很好的恢復(fù);且有效的防止了形成神經(jīng)瘤,使?fàn)I養(yǎng)因子聚集,促進(jìn)神經(jīng)再生。

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