道地藥材的品質(zhì)評價現(xiàn)狀

李亞杰，覃大吉,2，楊永康,2，龍 瀾，向極釬,2

(1.恩施清江生物工程有限公司，湖北 恩施 445600;2.湖北省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新中心鄂西綜合試驗(yàn)站，湖北 恩施 445600)

道地藥材是中藥材的一個特定術(shù)語，通常指來自特定產(chǎn)區(qū)、生產(chǎn)歷史悠久、栽培加工技術(shù)精細(xì)、質(zhì)量優(yōu)良、療效顯著的藥材.道地藥材是一個約定俗成的概念，“道”是古代行政區(qū)的劃分，首先就具有明顯的地域特征，道地藥材的形成與產(chǎn)地的氣候、土壤、陽光、水分等自然地理?xiàng)l件和生態(tài)環(huán)境環(huán)境密切相關(guān)，這些因素不僅影響著藥材的生長發(fā)育和分布，而且影響其外部形態(tài)、內(nèi)部構(gòu)造和生理變異以及有效成分的形成和含量.除了突出的地域特征之外，名副其實(shí)的道地藥材，還與優(yōu)良的品種、成熟的栽培技術(shù)、最適宜的采收時節(jié)和經(jīng)典的加工炮制技術(shù)等因素相關(guān)[1].中藥成分復(fù)雜，沒有統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，藥材質(zhì)量穩(wěn)定、可控、安全、有效問題一直是制約中藥國際化、現(xiàn)代化的關(guān)鍵問題，成為近年來中醫(yī)藥研究的難點(diǎn)和熱點(diǎn)問題.隨著科技水平的不斷提高，中醫(yī)藥科研工作者們不斷努力，我國對道地藥材品質(zhì)評價也取得了一定進(jìn)展.目前，我國評價道地藥材的直接指標(biāo)通常是藥材性狀、化學(xué)成分和藥效， 其中化學(xué)成分分析被公認(rèn)為道地藥材的內(nèi)在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn).

1 根據(jù)生物性狀及遺傳信息對道地藥材進(jìn)行品質(zhì)評價

1.1 性狀鑒別法

藥材生長有其適宜的生態(tài)環(huán)境，因產(chǎn)地的土壤、氣候、日照、水分等自然條件的不同，藥材的形狀和質(zhì)量也有差異.藥材外觀形態(tài)是中藥質(zhì)量最直觀的反映，在科技不發(fā)達(dá)的古代，人們只能通過眼觀，鼻聞、口嘗、手摸、水試這些簡單的方法，通過藥材性狀去評價藥材品質(zhì)的優(yōu)劣，如枸杞以粒大飽滿、色紅、肉厚、油潤、籽少、味甜微苦等形狀特征的寧杞質(zhì)量優(yōu)于其他產(chǎn)地枸杞；又如蒼術(shù)以根莖上含有大量朱砂點(diǎn)的江蘇茅山所產(chǎn)的茅蒼術(shù)質(zhì)量為佳.性狀鑒別簡單直觀，適應(yīng)基層科研工作需要，成本低，實(shí)用性廣，但其由于主要依靠鑒定者的感官和經(jīng)驗(yàn)，鑒定者的經(jīng)驗(yàn)有別，標(biāo)準(zhǔn)亦有差異，其結(jié)果難免主觀，準(zhǔn)確性就不高.

1.2 顯微結(jié)構(gòu)鑒別法

19世紀(jì)以來，顯微鏡的發(fā)明和生藥解剖圖譜的建立為生藥的顯微鑒別奠定了基礎(chǔ).藥材的性狀不一，但其內(nèi)部組織形態(tài)均較穩(wěn)定，通過顯微鏡來觀察來的藥材組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)去評價藥材，尤其是對粉碎后藥材的鑒定更為準(zhǔn)確，成為中藥材品種鑒別和質(zhì)量評價的又一重要手段.早在1997年，肖小河等就實(shí)現(xiàn)了附子形態(tài)結(jié)構(gòu)計算機(jī)三維重建與動態(tài)顯示，為生藥學(xué)教學(xué)和鑒定供了三維圖像技術(shù)和資料[2].2004年，肖小河等[3]還利用顯微鏡對比觀察了郁金類中藥材的組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)和特征，并據(jù)此建立了郁金類中藥材顯微鑒別的分種檢索表，為郁金類中藥材鑒別提供參考.顯微鑒別在一定程度上彌補(bǔ)了性狀鑒別的不足.

1.3 遺傳信息鑒別法

1995年，黃璐琦[4]教授首次提出了“分子生藥學(xué)”的概念，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，藥材的多樣性是基因多態(tài)性的結(jié)果，而基因多態(tài)性可在不同的水平上來進(jìn)行檢測，包括器官水平、組織水平、染色體水平和分子水平.近年來，中醫(yī)藥科研工作者通過DNA多態(tài)性分析(RAPD)技術(shù)找出道地藥材的DNA片段，并對此進(jìn)行測序，制備DNA探針來檢測相應(yīng)的藥材，由此來鑒別和判斷藥材的道地性，成為道地藥材品質(zhì)評價一種新的手段.陳永久等[5]利用的RAPD技術(shù)對冬蟲夏草進(jìn)行研究，為冬蟲夏草的道地性鑒別提供了分子水平的依據(jù)，其結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，證明RAPD技術(shù)可作為評價道地藥材道地性的新手段.魏玉清[6]利用RAPD標(biāo)記技術(shù)檢查了寧夏不同地區(qū)種植的枸杞基因組DNA的多態(tài)性，并對其遺傳背景進(jìn)行分析，構(gòu)建了寧杞1號的RAPD圖譜.肖小河等[7]運(yùn)用RAPD技術(shù)研究了國產(chǎn)姜黃屬藥用植物的遺傳背景差異，從DNA分子水平上為姜黃屬植物分類與中藥鑒定提供了參考依據(jù).近年來，分子遺傳標(biāo)記技術(shù)在道地藥材的質(zhì)量評價方面的優(yōu)勢也逐步凸顯，從基因水平上研究道地藥材，為道地藥材的質(zhì)量評價提供了更為準(zhǔn)確客觀依據(jù)，彌補(bǔ)了性狀鑒別、顯微鑒別、理化鑒別的不足，是道地藥材的質(zhì)量評價上的又一進(jìn)展[8].

2 根據(jù)化學(xué)成分對道地藥材進(jìn)行品質(zhì)評價

化學(xué)成分是中藥產(chǎn)生生物效應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，藥材種植的產(chǎn)地不同，內(nèi)、外界因素的影響著中藥化學(xué)成分變化[9].研究表明，即使不同產(chǎn)地的同種藥材，其活性成分的種類及含量也有所不同，從而導(dǎo)致藥效上的差異，道地產(chǎn)區(qū)的藥材在其活性成分的種類及含量方面有別于其他非道地藥材，道地藥材的“道地性”與其活性成分密切相關(guān)，從而說明，幾千年來中醫(yī)理論尤其注重藥材的道地性是有其科學(xué)道理的[10].

2.1 含量測定法

鑒于中藥的有效成分含量是中藥質(zhì)量的內(nèi)在標(biāo)準(zhǔn)，目前，對于道地藥材的品質(zhì)評價，有效成分含量測定最為常用，其結(jié)果也精確，避免了人為主觀因素的影響.近年來，高效液相色譜、高分辨率氣相色譜、毛細(xì)管電泳色譜等已廣泛應(yīng)用于中藥學(xué)研究領(lǐng)域，尤其是在對道地藥材與非道地藥材的化學(xué)成分鑒別對比研究中，成為道地藥材質(zhì)量評價的主要方法和手段.早在1986年，羅集鵬等[11]就用聚酰胺薄色譜-光密度含量測定法，對八種國產(chǎn)龍膽草中的龍膽苦甙、當(dāng)藥苦甙和當(dāng)藥甙進(jìn)行含量測定，根據(jù)含量測定的結(jié)果，對不同來源的龍膽草的生藥品質(zhì)進(jìn)行了評價，得出堅龍膽、三花龍膽、得欽龍膽、東北龍膽和遼寧海城龍膽所含龍膽苦甙和總苦甙的含量較高，品質(zhì)較優(yōu).王世清等[12]通過對吳茱萸揮發(fā)油進(jìn)行含量測定，得出貴州栽培的吳茱萸藥材品質(zhì)較好，吳茱萸揮發(fā)油含量較疏毛吳茱萸高1.73倍.貢濟(jì)宇等[13]采用RP-HPLC法對不同產(chǎn)區(qū)關(guān)黃柏所含主要活性成分小檗堿為指標(biāo)進(jìn)行了質(zhì)量分析，為道地藥材優(yōu)良品系及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范化研究提供了依據(jù).含量測定法結(jié)果精確，但中藥化學(xué)成分復(fù)雜，一個或幾個活性成分含量高低，并不能完全反映中藥的質(zhì)量好壞.

2.2 指紋圖譜法

近年來，很多學(xué)者用化學(xué)指紋圖譜對道地藥材進(jìn)行鑒定識別，通過把復(fù)雜的化學(xué)成分進(jìn)行分離，形成高低不同的峰，組成一張圖譜，整個圖譜表達(dá)了該樣品所含化學(xué)成分的多少和量的大小[14].指紋圖譜己成為國際公認(rèn)的控制中藥質(zhì)量的最有效手段，代替原來以主要藥效成分含量作為質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的辦法[15].馬英麗等[16]采用指紋圖譜對大黃、三七、黃芪等藥材的道地性進(jìn)行了分析.王晶彬等[17]利用中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件對不同產(chǎn)地決明子指紋圖譜進(jìn)行相似度分析，綜合指標(biāo)成分定量測定及化學(xué)指紋圖譜分析方法，較全面地反映不同產(chǎn)地決明子的內(nèi)在成分差異，為決明子內(nèi)在質(zhì)量控制提供了一定參考.古銳等[18]以民族藥廣棗、翼首草、沙棘及川產(chǎn)道地藥材川芎為例，從藥材品種鑒定、道地特征分析、用藥部位鑒定及產(chǎn)地加工四個方面對HPLC指紋圖譜技術(shù)應(yīng)用進(jìn)行分析，證明HPLC指紋圖譜作為一種定性與定量技術(shù)，在藥材品種品質(zhì)評價方面具有反映特點(diǎn)清晰、適用性廣等優(yōu)勢.對于中藥而言，雖然指紋圖譜不能完全取代含量測定，但是它提供的有關(guān)質(zhì)量的信息卻比單一成分含量測定豐富有用得多，因此建立指紋圖譜對道地藥材品質(zhì)評價研究具有重要的意義.

3 根據(jù)生物效應(yīng)對道地藥材進(jìn)行品質(zhì)評價

中藥是用于醫(yī)療保健的，對其的最終質(zhì)量檢驗(yàn)是臨床療效，因此，歸根結(jié)底對中藥材的質(zhì)量評價，要把安全性和有效性放在首位對中藥材質(zhì)量進(jìn)行評價[19].通過測定某一種、某幾種化學(xué)成分或指紋圖譜評價道地藥材與非道地藥材之間的差異，難以闡明其在療效上的優(yōu)劣，不能反映其臨床安全性和有效性.有學(xué)者指出，孤立地研究道地藥材和中成藥的“有效”成分或指紋圖譜實(shí)際意義不是很大.從嚴(yán)格意義上來講，藥材和藥品質(zhì)量評價的最后一關(guān)不是指紋圖譜，而是藥效[20].

3.1 生物效價檢測法

鄢丹等[21]提出了建立基于道地藥材和生物效價檢測的中藥生產(chǎn)質(zhì)量管理模式的構(gòu)想.生物效價檢測法是通過比較標(biāo)準(zhǔn)品和供試品對生物體或離體器官與組織產(chǎn)生的特定生物效應(yīng)去評價供試品，常用通過測定酶活力、凝集素活性、抗菌活性、抗炎活性和抗病毒測試等去評價藥材的質(zhì)量或活性.在目前《中國藥典》所收錄的藥材中，水蛭的質(zhì)量和毒性評價就是采用的生物效價檢測方法.近年來有研究發(fā)現(xiàn)，生命體新陳代謝過程中能量轉(zhuǎn)移和熱變化，這種生命體能量和產(chǎn)熱的變化可以間接地反映生物體的生長代謝變化，通過測定其能量和產(chǎn)熱變化，可以判斷藥物的生物活性，生物熱動力學(xué)法成為又一種有效的生物效價檢測手段用于中藥品質(zhì)評價研究領(lǐng)域[22].代春美等[23,24]研究發(fā)現(xiàn)不同生長年份黃連作用于大腸桿菌生長代謝過程的部分熱動力學(xué)參數(shù)與熱生物活性和化學(xué)成分之間具有顯著的相關(guān)性，產(chǎn)地亦可對生藥的質(zhì)量產(chǎn)生影響，生物熱力學(xué)方法和指標(biāo)，生物熱力學(xué)方法可作為評價中藥品質(zhì)評價的一種新方法.趙艷玲等[25]建立了基于生物熱活性表達(dá)的中藥板藍(lán)根品質(zhì)評價研究模式和方法.生物效價檢測方法用于道地藥材的品質(zhì)評價，不僅可以鑒定藥材的品種，還可以評價藥效和藥物毒性，對成分復(fù)雜甚至是成分不明確的中藥尤為適用，比單純的中藥指標(biāo)性成分定性定量分析更具說服力.

4 結(jié)語與展望

在道地藥材的品質(zhì)評價上，傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)評價方法直觀、簡便易行，具有廣泛的實(shí)用性；現(xiàn)代中藥材有效成分、含量測定精確，能深層次揭示中藥的性質(zhì)，發(fā)展迅速，前景廣闊.隨著科學(xué)技術(shù)水平的發(fā)展，現(xiàn)代的高科技儀器和分析方法用于道地藥材的研究，單一的分析方法研究已達(dá)到一定的深度，但也存在一定的不足.首先，低水平重復(fù)研究居多，對同一藥材用相同的方法反復(fù)研究，耗費(fèi)大量人力財力.其次，各級科研機(jī)構(gòu)由于受科研工作者水平和儀器設(shè)備的限制，研究的深度亦不一樣.再次，就道地藥材本身而言，影響藥材質(zhì)量的因素眾多，中藥成分的復(fù)雜性決定了鑒別方法的多樣性，單一的鑒別方法，難以滿足藥材復(fù)雜屬性的需要.

鑒于上述不足，建議國家出臺相關(guān)政策，成立藥材質(zhì)量評價組織體系，形成一個完整的評價機(jī)構(gòu)網(wǎng)，有組織，有目的的分步分級進(jìn)行，避免低水平重復(fù).根據(jù)高校和各級科研機(jī)構(gòu)科研水平和力量的不同，確立不同的研究任務(wù)，最終實(shí)現(xiàn)構(gòu)建適用于不同中藥材的統(tǒng)一質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系.研究方法方面，由于藥材遺傳信息，化學(xué)成分與生物效應(yīng)之間相互關(guān)聯(lián)，采用適宜的方法或多種方法綜合運(yùn)用，找出其聯(lián)系所在，才是解決道地藥材質(zhì)量評價問題的根本之道.受我國不健全的道地藥材質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)體系的制約，中藥一直難以走出國門，研究制定統(tǒng)一的道地藥材質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)，是解決中藥國際化的必經(jīng)之路.

[1] 萬德光,彭成,趙軍寧.四川道地中藥材志[M].成都:四川科學(xué)技術(shù)出版社,2005:1.

[2] 肖小河,舒光明,方清茂,等.中藥附子形態(tài)結(jié)構(gòu)計算機(jī)三維重建與動態(tài)顯示[J].中草藥,1997,28(3):167-170.

[3] 肖小河,趙祥軍,趙慶國,等.郁金類中藥材的顯微鑒別[J].解放軍藥學(xué)學(xué)報,2004,20(2):84-87.

[4] 黃璐琦.展望分子生物技術(shù)在生藥學(xué)中的應(yīng)用[J].中國中藥雜志,1995,20(11):643-645,702..

[5] 陳永久,王文,楊躍雄,等.冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)DNA及遺傳分化[J].遺傳學(xué)報,1997,24(5):28-34.

[6] 魏玉清,許興,王掌軍,等.寧夏不同地區(qū)主要栽培枸杞的RAPD分析[J].西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)報,2007,35(1):72-75.

[7] 肖小河,劉峰群,史成和,等.國產(chǎn)姜黃屬藥用植物RAPD分析與分類鑒定[J].中草藥,2000,31(3):51-54

[8] 曹暉,劉玉萍.DNA分析技術(shù)在中藥質(zhì)量研究中的應(yīng)用[J]中藥新藥與臨床藥理,1997,8(2)：112-115.

[9] 張藝,賈敏如,周厚成.試論藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范與中藥質(zhì)量.世界科學(xué)技術(shù)-中藥現(xiàn)代化,1999,1(4)：39-41

[10] 柳先平,黎先春,李磊..道地藥材“道地性”與其活性成分關(guān)系[J].現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐,2004,18(增刊):24-29

[11] 羅集鵬,樓之岑.中藥龍膽中苦甙類的薄層色譜-光密度法含量測定與生藥的品質(zhì)評價[J].藥學(xué)學(xué)報,1986.21(1):40-46.

[12] 王世清,鄧韓琦,楊衛(wèi)平.貴州道地藥材吳茱萸的品種鑒定與品質(zhì)評價研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2009年,20(11):2797-2798.

[13] 貢濟(jì)宇,趙躍剛,張皎月.等.不同產(chǎn)區(qū)關(guān)黃柏的質(zhì)量分析[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2003,31(4):26-27.

[14] 郭宏彥,涂禾,馮光富..指紋圖譜評價中藥質(zhì)量的研究現(xiàn)狀[J].四川中醫(yī),2007,2(25):50-51.

[15] 王薇,康云鷹.論中藥指紋圖譜利弊及其應(yīng)用前景[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2009,29(2):70-72.

[16] 馬英麗,趙懷清,田振坤,等.黃芪質(zhì)量的化學(xué)模式識別研究[J].中草藥,2003,45(5):79-81.

[17] 王晶彬,周旭,胡志方,等.基于指標(biāo)成分和HPLC指紋圖譜檢測的決明子化學(xué)品質(zhì)評價研究[J].中草藥,2008,39(6)：917-919.

[18] 古銳,張藝,王平,等.HPLC指紋圖譜在中藥及民族藥品質(zhì)評價中的應(yīng)用[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2006,29(2):40-45.

[19] 萬德光.中藥材質(zhì)量評價概論[J].重慶中草藥研究,1999,40(2):3-6.

[20] 蔣文躍.尋找物質(zhì)基礎(chǔ)并非非當(dāng)前中藥現(xiàn)代化關(guān)鍵[J].中草藥,2003,34(1):1-3.

[21] 鄢丹,肖小河,金城,等.論中藥質(zhì)量管理模式的挑戰(zhàn)與發(fā)展[J].中草藥,2006,11(6):11-14.

[22] 肖小河,王永炎,劉義.從熱力學(xué)角度審視和研究中醫(yī)藥[J].國際生物信息與中醫(yī)藥論從,2004:334-335

[23] 代春美,肖小河,王迪,等.微量熱法對不同生長年份黃連品質(zhì)的評價[J].中草藥,2006,37(2):205-208.

[24] 代春美,王迪,孫玉琦,等,不同產(chǎn)地黃連對大腸桿菌生長代謝影響的微量熱學(xué)研究[J].錦州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2005,26(1)：5-7.

[25] 趙艷玲,山麗梅,金城,等.基于生物熱活性表達(dá)的中藥板藍(lán)根品質(zhì)評價研究[J].中藥材,2008,31(5)：743-747.