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    甲氨蝶呤血清樣品的穩(wěn)定性觀察

    2010-03-28 02:11:14鄒德琴魏筱華鄭雪蓮
    實驗與檢驗醫(yī)學 2010年1期
    關(guān)鍵詞:雅培血藥濃度甲氨蝶呤

    鄒德琴,魏筱華,鄭雪蓮

    (南昌大學第一附屬醫(yī)院藥劑科,江西南昌 330006)

    大劑量甲氨蝶呤結(jié)合四氫葉酸鈣解救目前已成為治療兒童急性淋巴細胞白血病重要方案之一。應用該藥時,常發(fā)生嚴重的毒副作用,以胃腸道反應多見,其余依次為發(fā)熱、骨髓抑制、肝功能損害等[1]。由于甲氨蝶呤劑量血藥濃度的個體差異大,因此有必要監(jiān)測甲氨蝶呤用藥后的血藥濃度,以便更好地指導臨床安全用藥。甲氨蝶呤制劑要求密閉、避光保存[2],甲氨蝶呤血標本應當避光保存[3],沒避光保存的甲氨蝶呤血清樣品濃度是否準確,引起臨床醫(yī)生的關(guān)注。為此,我們對甲氨蝶呤血清樣品在室溫避光與不避光條件下的穩(wěn)定性進行了初步觀察,現(xiàn)將觀察結(jié)果報告如下。

    1 儀器與試劑

    1.1 儀器 全自動藥物濃度儀TDXFLX(美國雅培公司);高速離心機(美國雅培公司);H-1微型振蕩器(上??岛坦怆妰x器有限公司)。

    1.2 試劑 甲氨蝶呤標準曲線盒(批號:58050Q100)、甲氨蝶呤試劑盒 (批號:60018Q100)、甲氨蝶呤質(zhì)控盒 (批號:58644Q100),均為美國雅培公司生產(chǎn)。

    1.3 標本 取小兒急性淋巴細胞白血病患者外周血 (普通管)

    2 方法與結(jié)果

    2.1 定標 分別吸取甲氨蝶呤標準濃度(0.05、0.15、0.3、0.6和1.00μmol/L),制作標準曲線,同時測定低、中、高質(zhì)控。

    2.2 樣本測定 精確吸取被檢血清150μl于樣品杯中,置TDXFLX儀器內(nèi)測定。

    2.3 統(tǒng)計方法 雙側(cè)配對t檢驗,兩樣本均數(shù)的t檢驗,運用SPSS 10.0統(tǒng)計分析。

    2.4 不同條件下樣品的穩(wěn)定性實驗

    2.4 .1室溫避光保存 取甲氨蝶呤血清樣品6份,每人取血3份,于取血后立即、室溫避光保存1天、2天,分別用熒光偏振免疫法測定血清藥物濃度,比較測定結(jié)果,見表1。

    對保存1天和2天后測定的結(jié)果與保存前測定的結(jié)果進行雙側(cè)配對t檢驗,所得P值分別為0.186和0.629,P值均大于0.05,表明室溫避光保存1天和2天后測定結(jié)果與保存前差異無顯著性。

    2.4 .2室溫不避光保存 取甲氨蝶呤血清樣品6份,每人取血3份,于取血后立即、室溫不避光保存1天、2天,分別用熒光偏振免疫法測定血清藥物濃度,比較測定結(jié)果,見表2。

    對保存1天和2天后測定的結(jié)果與保存前測定的結(jié)果進行雙側(cè)配對t檢驗,所得P值分別為0.332和0.278,所得P值均大于0.05,表明室溫避光保存1天和2天后測定結(jié)果與保存前差異無顯著性。

    表1 甲氨蝶呤血清樣品在室溫避光條件下濃度的變化(μmol/L)

    表2 甲氨蝶呤血清樣品在室溫不避光條件下濃度的變化(μmol/L)

    3 討論

    本實驗中,依實驗需要量采取分管采血后保存,避免了因單管采血,從中取樣繼續(xù)非真空存放,可能引起微生物污染等對結(jié)果造成影響。

    本實驗結(jié)果表明:血樣在室溫不避光條件下至少可保存2天。我院通常從臨床采血到送達實驗室需1~2小時,如送血過程無避光措施不會影響測定結(jié)果。臨床醫(yī)生不必擔心血樣未避光保存影響測定結(jié)果的準確性,日常檢測時我們也可在保證結(jié)果準確的前提下靈活掌握測定時間,有利于工作安排。

    熒光偏振免疫法測定甲氨蝶呤血清藥物濃度是我院新開展的血藥濃度監(jiān)測項目,深入考察不同保存條件、保存時間對測定結(jié)果的影響,有助于保證測定結(jié)果的穩(wěn)定可靠性和適當?shù)撵`活性。甲氨蝶呤用藥方案的特點決定了甲氨蝶呤血藥濃度的測定必須準確快速,因此,我們只考察了甲氨蝶呤在室溫不避光條件下保存2天的穩(wěn)定性,考察的保存條件和保存時間還不夠多,考察的樣本量也不夠大,相關(guān)數(shù)據(jù)還有待不斷積累補充。

    [1]盧莉敏.大劑量甲氨蝶呤治療急性淋巴細胞白血病毒副作用觀察[J].中國小兒血液,2003,8(4):171~173.

    [2]陳新謙,金有豫,湯 光.新編藥物學[M].第16版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:733.

    [3]李金恒.臨床治療藥物監(jiān)測的方法和應用[M].第1版,北京:人民衛(wèi)生出版社,2003:130.

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