產(chǎn)貝毒裸甲藻共生海洋細菌ECSYW-28的分離鑒定及產(chǎn)類胡蘿卜素生物活性研究

張曉玲，楊 橋,*，吳文惠

(1.中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090；2.上海海洋大學食品學院，上海 201306)

產(chǎn)貝毒裸甲藻共生海洋細菌ECSYW-28的分離鑒定及產(chǎn)類胡蘿卜素生物活性研究

張曉玲1，楊 橋1,*，吳文惠2

(1.中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090；2.上海海洋大學食品學院，上海 201306)

從產(chǎn)貝毒裸甲藻中分離到一株新的產(chǎn)類胡蘿卜素共生細菌，對該菌株進行細菌多相分類學鑒定分析。16S rRNA序列(GenBank登錄號GU385809)同源性分析表明：該菌株與其進化關系最近的模式菌株Kocuria rosea DSM 20447T的同源性為95.1%(小于確定新種的閾值97%)，通過Sherlock MIDI脂肪酸鑒定系統(tǒng)確定其細胞壁主要脂肪酸為anteiso C15:0及iso C15:0。綜合生理生化、 BIOLOG細菌鑒定及分子生物學等特性，將該菌株確定為Kocuria屬的一個新種，命名為Kocuria sp. ECSYW-28。γ射線輻照及H2O2處理實驗結果表明，該菌株具有較強抗輻射性及抗H2O2能力。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析結果表明，其類胡蘿卜素組分主要為β-胡蘿卜素及未知結構物質(zhì)B。類胡蘿卜素抗氧化能力的ESR波譜分析表明，物質(zhì)B對超氧陰離子自由基(O2-·)具有顯著清除效果。對該菌株中參與類胡蘿卜素生物合成的八氫番茄紅素合成酶(phytoene synthase，crtB)及八氫番茄紅素脫氫酶(phytoene dehydrogenase，crtI)基因進行了PCR特異性擴增及生物信息學比對，證實該菌株中存在類胡蘿卜素生物合成的分子遺傳基礎。

貝毒；抗輻射；類胡蘿卜素；分類學鑒定；生物合成基因

赤潮是全球性海洋公害，其主要引發(fā)生物為海洋浮游微藻，而可合成毒素是赤潮藻類的一個常見特征。在諸多赤潮藻類毒素中，麻痹性貝毒(paralytic shellfish poisoning，PSP)是目前世界上分布最廣、發(fā)生頻率最高且對人類健康危害較大的一種藻類毒素，其主要來源以海洋單細胞甲藻門中的Alexandrium、Pyrodinium及Gymnodium 3個屬居多[1]。目前，人類因誤食因濾食有毒藻后產(chǎn)貝毒貝類水產(chǎn)品(如蚌類、牡蠣、蛤等)而頻發(fā)中毒甚至死亡事件已成為重要的全球性公共衛(wèi)生安全問題，而得到全球范圍內(nèi)的廣泛關注[2]。

現(xiàn)有研究表明，赤潮藻毒素的產(chǎn)生并非單由其自身遺傳因素決定，而可能屬于其共附生微生物的代謝產(chǎn)物[3]。已有報道表明，在海洋環(huán)境及實驗室內(nèi)培養(yǎng)的有毒藻液中均可分離到自產(chǎn)毒赤潮藻共附生微生物。1990年，Kodama等[4]從塔瑪亞歷山大藻(Alexandrium tamatense)中成功分離到一株可獨立產(chǎn)PSP貝毒的Moraxella屬細菌，首次為甲藻內(nèi)共生細菌產(chǎn)毒假說提供了實驗證據(jù)。海洋共附生菌對有毒藻產(chǎn)毒過程的影響機制復雜，是藻毒素產(chǎn)毒機理研究中一個易被忽視的重要因素。

本研究從我國東海產(chǎn)貝毒的裸甲藻中分離到一株產(chǎn)類胡蘿卜素共生菌，對其進行細菌系統(tǒng)分類學鑒定，并以耐輻射球菌(Deinococcus radiodurans)及大腸桿菌作參照，比較其抗輻射特性，通過LC-MS及ESR波譜技術分別對其類胡蘿卜素組分及其抗氧化特性進行分析。對該菌株內(nèi)參與類胡蘿卜素生物合成的兩個關鍵性限速酶——八氫番茄紅素合成酶(phytoene synthase，crtB)及八氫番茄紅素脫氫酶(phytoene desaturase，crtI)基因進行PCR特異性擴增及生物信息學比對，確認了該菌株中類胡蘿卜素生物合成的分子遺傳基礎的存在。本研究旨在為開展產(chǎn)麻痹性貝毒赤潮藻共生微生物的研究及海洋產(chǎn)類胡蘿卜素資源的開發(fā)提供參考。

1 材料與方法

1.1 微生物菌株與培養(yǎng)基

產(chǎn)貝毒裸甲藻采自東海(北緯31.237ο，東經(jīng)124.605ο)，培養(yǎng)于F/2培養(yǎng)基，光照周期14L:10D，培養(yǎng)溫度(18± 1.0)℃，pH(7.2±0.05)；耐輻射球菌(Deinococcus radiodurans，R1)購自中國典型培養(yǎng)物保藏中心；大腸桿菌(E. coli)由本實驗室保存。

耐輻射球菌培養(yǎng)使用TGY培養(yǎng)基(0.1%葡萄糖、0.5%胰蛋白胨、0.3%酵母提取液、pH7.0)，30℃培養(yǎng)48h。大腸桿菌培養(yǎng)使用LB培養(yǎng)基(1.0%蛋白胨、0.5%酵母粉、1.0% NaCl、pH7.0)，37℃過夜培養(yǎng)。海洋細菌分離培養(yǎng)基：2216人工海水培養(yǎng)基。細菌多相分類學研究的生理生化實驗所用培養(yǎng)基參照文獻[5]配制。

1.2 方法

1.2.1 抗輻射細菌的分離純化

細菌分離：對藻細胞培養(yǎng)液進行梯度稀釋后，涂布于分離平板上，經(jīng)反復劃線、純化后獲得純培養(yǎng)物。獲得的菌株于最適生長溫度28℃下培養(yǎng)，待生長出明顯菌落后，挑取單克隆，接入2216液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3d后，取1mL液體培養(yǎng)物至無菌EP管中，置60Coγ射線輻照源下進行照射，輻射劑量率0.8kGy/h，總劑量4kGy， 輻射后EP管中加入0.5mL生理鹽水，充分振蕩10min后進行梯度稀釋涂布，置28℃培養(yǎng)至生長出明顯菌落，經(jīng)劃線分離、純化后獲得純培養(yǎng)菌株。

1.2.2 細菌多相分類學鑒定

菌株培養(yǎng)48h后分別進行革蘭氏染色并觀察菌體形態(tài)。細菌運動性采用電子顯微鏡觀察。革蘭氏染色、芽孢染色、異染粒染色、抗酸染色、鞭毛染色均參照文獻[5]方法。菌體及鞭毛采取銅網(wǎng)制片，通過日本日立H-600型透射電子顯微鏡放大10000倍后觀察。

耐鹽實驗(NaCl質(zhì)量分數(shù)分別為0.5%、1.0%、2.5%、5.0%、7.5%、10.0%、12.5%)、耐酸/堿實驗(pH值分別為4、5、6、7、8、9、1 0、1 1、1 2)、生長溫度實驗(溫度分別為4、20、30、35、40、45、50、55℃)。氧化酶、M.R、V.P、淀粉水解、產(chǎn)H2S、硝酸鹽還原實驗，碳源利用(BIOLOG系統(tǒng))和抗生素敏感性檢測參照文獻[5-7]進行。

全細胞脂肪酸分析參照Zhou等[8]的方法。采用安捷倫6890型氣相色譜儀。其制備與測定按照安捷倫脂肪酸Sherlock MIDI(Microbial identification system)測定儀操作手冊進行，使用安捷倫19091B-102UL TRA2脂肪酸分析柱及氫火焰離子化檢測器(FID)。

菌株16S rRNA序列測定參照文獻[8]方法進行。通用引物為5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG及5′-GGTTACCTTGTTACGACTT。PCR擴增產(chǎn)物使用0.8%瓊脂糖凝膠電泳檢測，經(jīng)Omega膠回收試劑盒回收后送上海英杰(Invitrogen)公司測序。根據(jù)測序結果，使用MEGA軟件(Version 3.1)及Neighbor-joining(NJ)法構建16S rRNA序列系統(tǒng)發(fā)育進化樹。

1.2.3 菌株對γ射線輻射及H2O2抗性的測定

挑取D. radiodurans R1、E. coli及ECSYW-28菌株單菌落，分別于30、37℃及28℃培養(yǎng)至對數(shù)生長期，適當稀釋后重懸于10mmol/L生理鹽水中，室溫下使用60Co γ射線照射至設定劑量。輻照后各取100μL菌液，分別稀釋涂布于TGY、LB及2216瓊脂固體平板上，分別于最適溫度下培養(yǎng)至生長出明顯菌落后進行菌落計數(shù)。分別以R1菌株及E. coli作為陽性及陰性對照菌株。細胞存活率計算采用相同條件下的未照射細菌作對照，

每個處理取3次實驗的平均值。H2O2敏感性實驗參照文獻[9]進行。

1.2.4 菌株所產(chǎn)類胡蘿卜素的提取及HPLC-MS分析

細菌發(fā)酵產(chǎn)生類胡蘿卜素的提取及HPLC-MS分析參照文獻[10]進行。β-胡蘿卜素標準品(純度＞95%)購自美國Sigma- Aldrich公司。采用美國熱電公司Finnigan LCQ DECA XP MAX型大氣壓電離-液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(APCI-HPLC-MS)進行分析，儀器配置APCI電離源及Finnigan surveyor LC系統(tǒng)，色譜柱：安捷倫XDB RPC18分析柱(2.1mm × 150mm，5μm)；流動相：(A)乙腈、二氯甲烷、甲醇(體積比80:15:5)，(B)水；梯度洗脫：100% A(0～20min)，85% A(20～40min)；流速：1.0mL/min；柱溫：3 0℃。

1.2.5 細菌crtB及crtI基因的PCR檢測

ECSYW-28菌株中類胡蘿卜素生物合成途徑中crtB及crtI基因的PCR檢測參照文獻[10]進行。其中用于擴增crtB基因的引物為crtB-F：5′-TATCCATTATCGC AACTGTTTTCGC-3′及crtB-R：5′-GTATAGTGA CAGGCCGTATTCGTCG-3′。擴增crtI 基因引物為crtI-F：5′-CATTTAGTTCGGGTCAAGGAGGGCG-3′及crtI-R：5′-CTTGGTTGGGATGTTGTGGTGC TTG-3′。擴增后的PCR產(chǎn)物經(jīng)膠回收試劑盒純化后測序，提交至NCBI(http:// www.ncbi.nlm.nih.gov)數(shù)據(jù)庫進行基因同源性比對。

1.2.6 類胡蘿卜素抗氧化能力的ESR檢測

類胡蘿卜素抗氧化能力的電子自旋共振波譜(ESR)測定參照文獻[10]進行。使用德國Bruker ESP300型ESR儀。檢測條件：中心磁場：3420G；微波功率：10mW；掃場寬度：100G；調(diào)制頻率：25Hz；調(diào)制幅度：0.5mT；響應時間：81.9ms；增益：2；操作溫度：25℃；自旋捕集劑：二甲基吡啶N-氧化物(DMPO，0.8mol/L)。全部實驗均使用直徑1mm標準石英毛細管。超氧陰離子自由基(O2-·)酶學產(chǎn)生體系采用次黃嘌呤/黃嘌呤氧化酶體系(X/XO)。以Trolox作為陽性對照。在體系中加入不同濃度的類胡蘿卜素提取液，測定其ESR波譜強度，根據(jù)加入物質(zhì)對ESR信號強度的抑制率計算其抗氧化能力。

1.2.7 統(tǒng)計學分析

所有結果均以平均值±標準差表示。數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析使用SPSS軟件(Version 11.0)及Student’s t檢驗，P ＜0.05為顯著差異。

2 結果與分析

2.1 菌株的形態(tài)學觀察

從經(jīng)4kGyγ射線輻射后的樣品中分離純化到一株菌落呈鮮紅色的菌株。其在2216瓊脂平板上的生長形態(tài)如圖1a所示，菌落形態(tài)呈圓形，邊緣規(guī)則。在28℃固體平板上培養(yǎng)36h后逐漸產(chǎn)生紅色色素并隨生長時間延長其顏色逐漸加深。電鏡觀察其細胞多呈二聯(lián)體結構，菌體直徑1.0～1.2μm(圖1b)。

圖1 菌株ECSYW-28的顯微鏡(a)和掃描電鏡(b)圖Fig.1 Microscopic and scanning electron micrographs of ECSYW-28 strain cultured on 2216 agar plate at 28℃ for 48 h

2.2 菌株的生理生化特征

表1 ECSYW-28菌株與Kocuria屬代表性模式菌株生理生化特征比較Table 1 Comparison of physiological and biochemical characteristics of ECSYW-28 strain with three representative strains ofKocuriasp.

菌株ECSYW-28在2216培養(yǎng)基中生長良好，接種后培養(yǎng)至96h，菌體濁度均達到最高。生長溫度范圍15～40℃。生長pH值范圍6.0～10.0，最適pH7.2。生長NaCl質(zhì)量分數(shù)范圍為0.5%～7.5%，最適NaCl質(zhì)量分數(shù)為1.6%。嚴格需氧生長。該菌株生長對羧芐青霉素、氯霉素、先鋒霉素、卡拉霉素、羅紅霉素敏感。利用BIOLOG細菌鑒定系統(tǒng)測定該菌株的碳源利用情況，并與該屬的3個模式菌株K. varians、K. kristinue及K. rosea進行比較。結果見表1，該菌株在碳源利用方面與K. rosea DSM 20447T更為相似[11]，但又存在著一定差異：菌株ECSYW-28可利用山梨醇、丙氨酸作為唯一碳源生長。

2.3 菌株全細胞脂肪酸成分的GC分析

通過Sherlock MIDI脂肪酸鑒定系統(tǒng)對該菌株全細胞脂肪酸組分進行分析測定。結果表明，其主要脂肪酸組分為anteiso C15:0及iso C15:0，分別占其總脂肪酸含量的29.6%及12.6%(圖2)。在Sherlock MIDI系統(tǒng)脂肪酸鑒定比對數(shù)據(jù)庫內(nèi)的比對結果表明，菌株ECSYW-28與Kocuria屬相似性最高(SIM值0.514)。

圖2 菌株ECSYW-28的全細胞脂肪酸組分的GC MIDI分析圖譜Fig.2 Whole-cell fatty acids analysis of ECSYW-28 strain by GC MIDI system

2.4 菌株的16S rRNA系統(tǒng)發(fā)育分析

圖3 基于16S rRNA序列構建的菌株ECSYW-28的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 Phylogenetic tree of ECSYW-28 strain based on the 16S rRNA sequence

采用PCR技術擴增了ECSYW-28菌株的16S rRNA序列，經(jīng)測序得其長度為1466bp(GenBank登錄號：GU385809)。將得到的基因序列在GenBank中進行序列搜索比對，構建其系統(tǒng)發(fā)育進化樹。由圖3可見，該菌株與Kocuria屬菌株的16S rRNA基因同源性介于93.2%～95.1%之間，其中與Kocuria rosea DSM 20447T的同源性最高，為95.1%(小于新種確立的閾值97%)。綜合該細菌的多相分類學實驗結果，確定菌株ECSYW-28屬于Kocuria屬，為該屬的一個新種，將其命名為Kocuria sp. ECSYW-28。

2.5 菌株對γ射線輻射及H2O2抗性

圖4 菌株ECSYW-28對γ射線輻射及H2O2抗性比較Fig.4 Comparison of irradiation-resistant capacity of ECSYW-28 strain withD. radioduransR1 andE. colisubjected to60Coγirradiation and H2O2treatment

由圖4a可見，當輻射總劑量為0.8kGy時E. coli即全部死亡，但該劑量對菌株ECSYW-28及D. radiodurans R1的存活率幾乎無影響，二者均呈現(xiàn)出與E. coli截然不同的“肩型”存活曲線。當輻射總劑量高達8kGy時，菌株ECSYW-28仍可存活。圖4b結果表明，菌株ECSYW-28可在H2O2濃度高達80mmol/L時存活，抗性為E. coli的近30倍。以上結果表明，菌株ECSYW-28具有較強的抗輻射性及抗H2O2能力。

2.6 類胡蘿卜素的HPLC分析及抗氧化能力測定

經(jīng)HPLC及標準品比對分析，并與已報道文獻數(shù)據(jù)進行比較，發(fā)現(xiàn)菌株ECSYW-28可產(chǎn)生10余種類胡蘿卜素(圖5)，含量較高的兩種物質(zhì)分別為β-胡蘿卜素(色譜峰A)及未知物質(zhì)B(色譜峰B)，分別占其類胡蘿卜素總量的22.3%及55.4%。物質(zhì)B的相對分子質(zhì)量經(jīng)質(zhì)譜分

析確定為582.25，紫外-可見吸收光譜掃描顯示其特征性吸收峰分別為488、523、552nm，根據(jù)類胡蘿卜素的物理特性分析，物質(zhì)B的化學結構中共軛雙鍵數(shù)目多于12個。類胡蘿卜素的抗氧化能力與其共軛雙鍵數(shù)目直接相關，共軛雙鍵越多，其抗氧化能力越強。物質(zhì)B的詳細化學結構解析正在研究中。

圖5 菌株ECSYW-28產(chǎn)類胡蘿卜素的HPLC分析圖譜Fig.5 HPLC profile of carotenoids produced by ECSYW-28 strain

圖6 菌株ECSYW-28所產(chǎn)類胡蘿卜素物質(zhì)B抗氧化能力評價的ESR波譜圖(a)及其定量比較(b)Fig.6 ESR spectrum and quantitative comparison for evaluating antioxidant capacity of the carotenoid compound B isolated from ECSYW-28 strain

由圖6a可以看出，菌株ECSYW-28所產(chǎn)類胡蘿卜素物質(zhì)B對O2-·具有顯著清除效果。當作用濃度為200nmol/L時，其對ESR信號強度的抑制率可達74.2%(圖6b)，是同等濃度下Trolox抑制能力的3.4倍。而O2-·是γ射線輻射后在細菌細胞內(nèi)誘導產(chǎn)生的主要自由基類型之一[12]。利用該體外模型可在一定程度上模擬γ射線輻射的胞內(nèi)自由基誘導及損傷效應。

2.7 類胡蘿卜素生物合成基因的PCR及生物信息學分析

八氫番茄紅素合成酶(crtB)催化兩分子牻牛兒基焦磷酸(G G D P，C20)縮合生成無色的八氫蕃茄紅素(phytoene)，后者在八氫番茄紅素脫氫酶(crtI)的催化下轉(zhuǎn)化為有色的ζ-胡蘿卜素(圖7a)。crtB及crtI是微生物類胡蘿卜素生物合成途徑中的兩種限速酶[13-14]。為在分子生物學水平確認菌株ECSYW-28內(nèi)的確存在類胡蘿卜素生物合成基因。通過設計同源性引物及PCR擴增了該菌株的crtB及crtI基因?；驍U增產(chǎn)物長度分別為533bp及756bp(圖7b)。通過NCBI核酸數(shù)據(jù)庫對兩個基因序列進行生物信息學分析(圖7c)，其基因同源性搜索及比對結果表明，菌株ECSYW-28與菌株Kocuria rhizophila DC2201的crtB酶及crtI酶蛋白同源性分別達96.7%及95.6%。表明菌株ECSYW-28中存在類胡蘿卜素生物合成的分子遺傳基礎。

圖7 推測的菌株ECSYW-28所產(chǎn)類胡蘿卜素合成通路及其crtB、crtI基因PCR擴增和生物信息學分析Fig.7 Speculated carotenoid biosynthetic pathway in ECSYW-28 strain, PCR amplification results ofcrtBandcrtIgenes and multiple sequence alignment of two genes by bioinformatic method

3 結 論

在對產(chǎn)毒藻研究過程中發(fā)現(xiàn)，同一地區(qū)、同一種

藻中有毒及無毒品系可同時共存；實驗室培養(yǎng)的有毒藻有時會突然失去產(chǎn)毒能力；自然海域中即使無明顯赤潮發(fā)生，貝類仍表現(xiàn)出毒素累積。上述現(xiàn)象均表明，毒素并非僅僅來自有毒藻本身，同時也揭示了赤潮藻共附生菌對有毒藻產(chǎn)毒影響及機制的復雜性[2]。因此，藻菌關系研究已成為毒藻毒素產(chǎn)生機制研究中的一個熱點[1-2]。有毒藻共附生細菌可獨立產(chǎn)生貝毒，其貝毒組成與有毒藻染色體密切相關且可穩(wěn)定遺傳。此外，共附生菌和赤潮藻間的相互作用是調(diào)節(jié)兩者群體數(shù)量和藻毒素產(chǎn)生的重要原因之一。共附生菌是否對赤潮毒素產(chǎn)生有促進或抑制作用及其作用機理和作用效應如何？此方面的研究結果目前尚較為缺乏。積極開展有毒藻共附生微生物的分離及鑒定，探明產(chǎn)毒基因在共附生菌或其他細胞中的分布，可進一步揭示微生物種屬特異性與特殊藻毒合成內(nèi)在機制及產(chǎn)毒基因在不同種屬間可能的分子轉(zhuǎn)移機制。探索有毒藻共附生菌與藻毒素產(chǎn)生的關系及相互作用，亦可為闡明其機理并尋找赤潮災害生物防治的有效途徑提供有益探索。

類胡蘿卜素的生物合成基因在微藻及其共附生微生物之間可能發(fā)生的基因水平轉(zhuǎn)移，是海洋天然藥物研究的關注熱點之一[16]。海洋共附生微生物是發(fā)掘新類胡蘿卜素結構的巨大資源庫。目前在世界各個海域中均分離到了產(chǎn)新類胡蘿卜素的海洋微生物菌株。一批海洋微生物新種屬如Flammeovirga yaeyamensis sp.[17]、Owenweeksia hongkongensis[18]得到了系統(tǒng)分類學鑒定，隨之分離出了如saproxanthin、keto-nostoxanthin[19]等新的類胡蘿卜素結構。極大擴充了天然類胡蘿卜素資源庫，并為后續(xù)開展類胡蘿卜素的生物活性評價等研究提供了豐富的研究材料。

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Isolation, Identification and Biological Activity of ECSYW-28 Strain

ZHANG Xiao-ling1，YANG Qiao1,*，WU Wen-hui2
(1. East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China；2. College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China )

A new carotenoid-producing symbiotic bacterium was isolated from a poison-producing paralytic shellfish Gymnodium sp., and then the heterogeneous taxonomic identification of this strain was performed. The 16S rRNA sequence (GU385809) homology analysis exhibited that the strain had 95.1% similarity with Kocuria rosea DSM 20447T. The cell wall was mainly composed of fatty acids that were identified as anteiso C15:0and iso C15:0by Sherlock MIDI system. This strain was identified as a new strain Kocuria sp. ECSYW-28 belonging to the genus of Kocuria based on physiological and biochemical characteristics, BIOLOG identification system and molecular evolution analysis. Meanwhile, this strain was confirmed to have stronger resistance to60Coγ -ray irradiation and H2O2 treatment. Liquid chromatography-mass spectrometry analysis showed that this strain could produce carotenoids that are composed ofβ-carotene and an unknown-structural carotenoid-compound B. Antioxidant capacity analysis was analyzed by using ESR spectroscopy to reveal stronger scavenging effect of compound B on superoxide anion free radicals, one of the major free radicals generated duringγ-ray ionizing irradiation. The phytoene synthase (crtB) and phytoene dehydrogenase (crtI) genes involved in carotenoid biosynthesis pathway in ECSYW-28 strain were subjected to PCR amplification and bioinformatic comparison to confirm the molecular basis of carotenoid biosynthesis in the strain.

poison-producing paralytic shellfish；resistance to irradiation；carotenoids；heterogeneous taxonomic identification；biosynthesis gene

Q949.3

A

1002-6630(2010)23-0198-06

2010-04-07

中央級公益性科研院所基本科研業(yè)務費專項資金(中國水產(chǎn)科學研究院東海水產(chǎn)研究所)資助項目(2008M17)

張曉玲(1978—)，女，助理研究員，博士，主要從事水產(chǎn)品安全控制及海洋天然產(chǎn)物研究。E-mail：nyyqxl@126.com

*通信作者：楊橋(1979—)，男，副研究員，博士后，主要從事海洋天然藥物及其功能基因研究。E-mail：cctcc2004@whu.edu.cn