三種不規(guī)則抗體篩選方法對比分析

范少英 楊君青

紅細胞ABO血型以外的不規(guī)則抗體是引起輸血不良反應(yīng)、新生兒溶血病、血型鑒定困難及疑難配型等的主要原因［1］。交叉配血不合時，對有輸血史、妊娠史或短期內(nèi)需要接受多次輸血者必須按《全國臨床檢驗操作規(guī)程》有關(guān)規(guī)定作抗體篩選試驗［2］。本文采用微柱凝膠法、凝聚胺法和LIM抗人球法對獻血者血清進行不規(guī)則抗體檢測。

1 材料與方法

1．1 試劑 各種血型抗原抗血清均由Immucor Gamma公司提供?？笽gG，C3d由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。抗體篩查細胞由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供，由3個細胞組成，包括 Rh，Kidd，MNSs，Duffy，Diego，Kell，Lewis，P 等 8 個血型系統(tǒng)的19個抗原互補;抗體鑒定細胞由上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司提供。凝膠卡由達亞美公司提供。聚凝胺試劑盒由臺灣貝索公司提供。

1．2 儀器 KA-2200小型臺式離心機(日本久保田公司)，瑞士達亞美卡式血型配血系統(tǒng)。

1．3 方法

1．3．1 使用商品的篩選細胞分別采用微柱凝膠法、凝聚胺法、LIM抗人球法對倍比稀釋后的各種抗血清進行檢測，比較三種實驗方法對不同血型系統(tǒng)抗體的敏感性。見表1。

1．3．2 對用微柱凝膠法篩查存在不規(guī)則抗體的獻血者血清用凝聚胺法和LIM抗人球法進行確認，比較三種實驗方法用于抗體篩查的適用性。

2 結(jié)果 見表1。

表1 3種實驗方法測定不同血型系統(tǒng)抗體效價比較

表2 3種實驗方法測定獻血者不規(guī)則抗體的效價比較

3 討論

不規(guī)則抗體指不符合ABO血型系統(tǒng)規(guī)則的血型抗體，分為IgM抗體和IgG抗體。IgM分子量較大在鹽水介質(zhì)中能直接連接相應(yīng)的紅細胞，使之發(fā)生肉眼可見的凝集，IgG在鹽水介質(zhì)中不凝集而只能致敏帶有相應(yīng)抗原的紅細胞，必須通過其他介質(zhì)如酶法、低離子強度溶液法、抗人球蛋白法、聚凝胺法、凝膠法等血清學(xué)技術(shù)才能檢出［3］。

抗體篩選技術(shù)要求是盡量不漏檢有臨床意義的抗體，盡快完成抗體檢測。臨床常用的不規(guī)則抗體篩查技術(shù)中抗人球蛋白法被認為是理論上最明確、最準確的方法，但正是由于其繁瑣的操作，又不能同時對多份標本檢測，因此不適用于大批量篩查，只能將該實驗方法用在對少數(shù)標本的確定中。在抗人球法的基礎(chǔ)上加上LIM使試驗方法更加敏感。微柱凝膠法簡單、方便、敏感性高，結(jié)果易判斷又能較長時間保存，標本用量少，又能同時檢測多份標本［4］。微柱凝膠法可適用于常規(guī)的抗體篩查，但該方法相對于其他兩種方法成本較高。凝聚胺法靈敏度高、價廉、快速，且操作簡單方便，但是反應(yīng)溫度為室溫，因此無法排除室溫以下反應(yīng)的無臨床意義的冷抗體的干擾。

實驗結(jié)果可以看出微柱凝膠法靈敏度略優(yōu)于LIM抗人球法，凝聚胺法對有些血型系統(tǒng)靈敏度又高于其他兩種方法，對于Lewis血型系統(tǒng)凝聚胺法靈敏度明顯低于其他兩種方法。但是臨床上極少見到因Lewis抗體所致的溶血性輸血反應(yīng)，原因是a．Lewis抗原只是吸附在紅細胞上，且可以放散。b．供(受)者血漿中的可溶性Lewis抗原可中和受(供)者的循環(huán)抗體。除此以外，在生理的溫度下，大多數(shù)Lewis抗體不會廣泛地起反應(yīng)［5］。

綜上所述，筆者認為應(yīng)該根據(jù)實驗室的具體條件選擇適當(dāng)?shù)目贵w篩選實驗方法。對于基層實驗室用凝取勝胺法進行常規(guī)篩檢，遇到陽性標本再用微柱凝膠法或LIM抗人球法復(fù)檢不失為一個較好的選擇。

值得注意的是，在抗體篩查試驗陽性應(yīng)進一步明確抗體的反應(yīng)特性比如反應(yīng)溫度范圍、是否激活補體等，判斷該抗體是否具有臨床意義。如果條件允許最好能鑒定抗體類型，區(qū)分是自身抗體、類抗體還是同種抗體，了解抗體的來源，為交叉配血提供詳細的資料。

1 Moise KJ．Red blood cell alloimmunization in pregnancy．JSemin Hematol，2005，42:169-178．

2 中華人民共和國衛(wèi)生部．臨床輸血技術(shù)規(guī)范．2000．106．

3 雷再芬．1501例預(yù)輸血者血清抗體篩選的臨術(shù)意義．中國基層醫(yī)藥，2010，17:639-640．

4 李勇主編．實用血液免疫學(xué)血型理論與實驗技術(shù)．北京:科學(xué)技術(shù)出版社，2006．595．

5 劉達莊主編．免疫血液學(xué)．第1版．上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2002．77．