規(guī)模豬場口蹄疫O型合成疫苗免疫程序檢測

周志平 朱曉路 范坤曉 周繼勇

我國規(guī)模豬場主要使用O型來活疫苗免疫，近年來隨著O型合成肽疫苗的上市，因其副作用小、免疫效果較好而在豬場得到越來越多的試用。

（1）試驗分組：將懷孕母豬分為試驗組和對照組，每組10頭，分別用合成肽苗和濃縮苗免疫，跟蹤觀察其所產(chǎn)仔豬至70日齡抗體消退情況。仔豬70日齡開始一部接種合成肽疫苗，并分為3組，每組8頭，即70日齡首次免疫組、70～100日齡二次免疫組、70～100～132日齡3次免疫組，觀察免疫抗體產(chǎn)生情況。

（2）免疫程序：母豬：產(chǎn)前45d首免、產(chǎn)前17d二免。濃縮苗肌肉注射3.5ml/頭合成肽苗肌肉注射2.0ml/頭。仔豬：70日齡肌肉注射1.5ml/頭；70、100日齡分別肌肉注射1.5ml/頭；70、100、132日齡分別肌肉注射1.5ml/頭。

（3）飼養(yǎng)管理：懷孕母豬籠養(yǎng)限飼，仔豬26日齡斷奶即轉(zhuǎn)保育舍飼養(yǎng)30d，后轉(zhuǎn)育成舍飼養(yǎng)50d，再轉(zhuǎn)入育肥舍飼養(yǎng)至出售。保育舍采用半漏縫地面、育成開始均采用水泥地面欄位飼養(yǎng)，自由采食，自動飲水器飲水。

（4）采血日齡：母豬首免前1d、二免后15d，仔豬30、50、70、100、132、176日齡。每次采集血樣后凝固分離血清并冷凍保存，全部血樣采集結(jié)束后一起檢測。

（5）檢測方法：根據(jù)VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗診斷試劑盒說明書進行，VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA的抗體效價≥25為合格，即將血清作32倍稀釋呈陽性為合格。并計算樣品吸光值與臨界值比值分析結(jié)果。正向間接血凝方法（IHA）檢測O型口蹄疫抗體方法參照《口蹄疫診斷技術(shù)》（NY/SY150-2000），以抗體效價27為合格。全部血清樣品同時用上述兩種方法檢測，比較兩者結(jié)果。

（6）結(jié)果：① 兩種方法均檢測到兩組母源抗體的陽性率及數(shù)值隨日齡增長而逐漸下降，但消失的速率有明顯差異。試驗組抗體陽性率VP1檢測至70日齡降到50%、IHA檢測至30日齡降到25%，對照組VP1檢測至50、70日齡逐漸降到58.33%和25%、IHA檢測至30、50日齡降到91.67%和25%。同時可見，用VP1檢測兩組的抗體均要比IHA檢測的敏感性好，陽性率下降較IHA檢測的要慢，試驗組至少要慢40d，對照組慢20d。根據(jù)VP1檢測結(jié)果，試驗組首免可定在70～75日齡，對照組首免可定在50～55日齡。IHA檢測濃縮苗免疫抗體有較好的敏感性，檢測合成肽疫苗抗則不理想。② 用VP1檢測3個組的陽性率、比值和用IHA檢測的陽性率、對數(shù)值在首免后都呈現(xiàn)相反的趨勢。在濃縮苗或合成肽苗免疫的母抗基礎(chǔ)上，接種一次合成肽疫苗后均能迅速獲得較高的陽性率，至176日齡，3個組之間在陽性率上幾乎沒有差異。

3個組在70日齡首免后其S/C比值均逐漸上升，尤其是首免后30d時上升2.5倍以上，之后仍小幅度上升，至176日齡時以第一組比值最高為9.06、第二組次之為8.68、第三組最低為8.47，組間差異不明顯。70日齡開始用IHA檢測已不顯示陽性反應(yīng)，對數(shù)值雖總體呈逐漸下降趨勢，但實際上較多樣本對數(shù)值已小于1，已和VP1檢測結(jié)果大相徑庭。可見IHA方法不適用于合成肽疫苗免疫抗體的檢測。