微小活檢組織的石蠟包埋及切片的制作方法

趙曉東，舒紅，姜衛(wèi)國，楊向紅

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬盛京醫(yī)院病理科，沈陽 110004）

微小活檢組織的石蠟包埋及切片的制作方法

AMethod about Paraffin Embedding and Section of Biopsy Microsample

趙曉東，舒紅，姜衛(wèi)國，楊向紅

（中國醫(yī)科大學(xué) 附屬盛京醫(yī)院病理科，沈陽 110004）

介紹一種環(huán)保、簡易、有效的微小組織的石蠟包埋方法。

微小組織；石蠟包埋；制片

微小組織的病理制作是病理技術(shù)工作中的一個難題，由于體積小，組織經(jīng)脫水浸蠟等處理后，會變得更小、易丟失或不易找到；同時，由于脫水透明時間掌握不好，易使組織變脆，切出的片子裂隙多，不利于病理診斷?，F(xiàn)將工作中摸索出的一種較好的微小組織蠟塊及切片的制作方法報告如下：

1 材料與方法

1.1 取材

將臨床送檢的0.3c m以下的小標(biāo)本，包括胃鏡、腸鏡、氣管鏡、膀胱鏡、宮腔鏡及各種穿刺的組織（已固定于10%的福爾馬林溶液中），置于微孔包埋盒中，立即投入含有2‰伊紅的0.9%的氯化鈉溶液中，浸泡30m i n左右，使組織著紅色。

1.2 蠟塊制作

取出包埋盒，放到脫水筐中，置自動脫水機（美國，Th e rm o）中，設(shè)置程序為：10%福爾馬林溶液中固定2h；分別在85%、90%、95%的乙醇中20m i n，100%乙醇2次各30m i n；二甲苯溶液3次各10m i n；浸蠟2次，分別為10m i n及30m i n。常規(guī)包埋，制成蠟塊。

1.3 切片及染色

把蠟塊放于切片機（德國，Le i c a）上，切片厚度為3μm，烘片后，用自動染色機（德國，MICROM）染色。

2 結(jié)果

制成的蠟塊及切片見圖1、圖2。

3 討論

一般情況下，所取的材料放入包埋盒后，或于空氣中暫時放置，或直接投入福爾馬林固定液中。如果在送檢的小標(biāo)本較多時，取材時間較長，先取的微小組織暴露在空氣中容易干燥變硬，影響染色；如果直接投入福爾馬林固定液中，由于其中乙醛的揮發(fā)等原因，久而久之，對取材的工作人員健康會造成傷害，對環(huán)境造成污染［1］。0.9%的氯化鈉溶液是與人體組織等滲的溶液，不會對組織標(biāo)本及工作人員造成任何損傷，所以我們采用此溶液作為取材時臨時保存組織的液體，既維持了組織結(jié)構(gòu)，又保持了組織的濕潤，尤其有利于工作人員健康及環(huán)境的保護。

微小組織在技術(shù)員包埋過程中需仔細(xì)觀看、查找、核對取材的塊數(shù)，有時與凝固的石蠟碎屑無法區(qū)別。我們在0.9%氯化鈉溶液中加入2‰的伊紅，使組織著紅色。由于適當(dāng)?shù)囊良t染料在一系列處理過程中不脫色，所以使組織在包埋過程中易識別，大大提高了包埋速度和質(zhì)量。伊紅染料是切片染色的染料之一，所以組織上的紅色不會影響切片的染色效果。

小組織的脫水、透明及浸蠟的時間要嚴(yán)格掌握，一旦處理不好，組織就會硬脆，切出的片子都是刀痕，無法進(jìn)行病理診斷。我們確定了脫水、透明及浸蠟的時間，切片質(zhì)量非常理想。

在日常切片過程中，經(jīng)常由于無法確定小組織的邊界，而使切片組織不全或蠟塊切修過度，造成組織丟失。由于加入伊紅，使紅色組織在白色的蠟塊中非常醒目，很容易掌握蠟塊的切修深度，保證了切片的質(zhì)量。

［1］張藝濱，吳傳楠，楊慧敏，等.甲醛毒性作用的研究進(jìn)展［J］.吉林醫(yī)藥醫(yī)院學(xué)報，2008，29（4）：232-235.

（編輯 武玉欣，英文編輯 鄭華川）

R361

B

0258-4646（2010）01-0076-01

趙曉東（1962-），男，技師，中專.

舒紅，E-mail：shuhong0302@hotmail.com

2009-05-22