妊娠期高血壓疾病患者瘦素水平的變化及其意義

陜西省婦幼保健院(西安 710003) 賀譯平 劉娟弟 周 欣

妊娠期高血壓疾病患者瘦素水平的變化及其意義

陜西省婦幼保健院(西安 710003) 賀譯平 劉娟弟 周 欣

目的:研究瘦素在妊娠期高血壓疾病患者的表達(dá)及其臨床意義。方法:對(duì)60例妊娠期高血壓疾病患者,其中妊娠期高血壓組(20例)和子癇前期組(20例重度、20例輕度),正常妊娠組(20例),用 ELISA法分別測(cè)定分娩前以及分娩后1周母體靜脈血、臍靜脈血瘦素的濃度;采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)瘦素在胎盤(pán)中的定位和表達(dá)。結(jié)果:妊娠期子癇前期組的瘦素濃度明顯高于同期正常妊娠組,差異均有顯著意義(P＜0.05);分娩后1周后所有病例母體血漿瘦素水平急劇下降,接近正常未孕水平;子癇前期的臍靜脈血瘦素水平明顯高于妊娠期高血壓和正常組,差異有顯著性(P＜0.05);瘦素在胎盤(pán)絨毛合體滋養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞胞漿中均有表達(dá);瘦素蛋白表達(dá)強(qiáng)度在正常妊娠、妊娠期高血壓、子癇前期依次上升,差異均有顯著意義(P＜0.05)。結(jié)論:妊娠期高血壓疾病患者隨著病情加重,瘦素水平逐步增加,可作為預(yù)示妊娠期高血壓疾病病情嚴(yán)重程度的敏感指標(biāo)之一。

瘦素是肥胖基因的蛋白產(chǎn)物,主要是由脂肪細(xì)胞合成和分泌,參與機(jī)體的能量代謝。但近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),除脂肪組織外,胎盤(pán)組織也可以分泌瘦素[1],瘦素與妊娠和生殖調(diào)節(jié)存在密切關(guān)系[2,3]。妊娠期高血壓疾病是妊娠期特發(fā)性疾病,其病因尚未明確。目前關(guān)于妊娠期高血壓疾病瘦素水平的研究報(bào)道不一[4～6],本研究采用放射免疫法檢測(cè)了 60例妊娠期高血壓疾病患者及 20例正常妊娠婦女分娩前后血清及臍血的瘦素水平,并用免疫組化方法檢測(cè)胎盤(pán)組織的瘦素水平,以探討妊娠期高血壓疾病患者血清瘦素水平的變化及其臨床意義。

對(duì)象與方法

1 研究對(duì)象 選擇2008年 7月至2009年5月在本院產(chǎn)科住院的妊娠期高血壓疾病患者 60例,其中妊娠期高血壓20例、輕度子癇前期 20例、重度子癇前期20例,診斷及分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)參考全國(guó)統(tǒng)編教材第 6版《婦產(chǎn)科學(xué)》,孕周為35～ 41周。以 20例正常住院分娩產(chǎn)婦作為對(duì)照,其年齡、孕周、孕前體重指數(shù)均與妊娠期高血壓組相匹配。所有孕婦均為非肥胖初產(chǎn)、單胎。既往無(wú)糖尿病、心臟病及腎病史,無(wú)胎膜早破、早產(chǎn)和感染征象,無(wú)吸煙史。

2 方 法 收集產(chǎn)婦的年齡、體重、身高,同時(shí)計(jì)算體重指數(shù)(PI)。所有病例均于分娩前空腹抽取肘靜脈血2m l,產(chǎn)時(shí)抽取臍血2m l,分娩后1周空腹抽取肘靜脈血2m l,2400rpm離心10m in,取血清置-80℃冰箱保存待測(cè)。胎盤(pán)娩出后立即無(wú)菌狀態(tài)下取胎盤(pán)中央母體面 1cm×1 cm× 1cm的胎盤(pán)組織,用無(wú)菌 PBS緩沖液沖洗標(biāo)本數(shù)次,立即置入10% 甲醛溶液中固定12h后,常規(guī)石蠟包埋。

3 結(jié)果判定 陽(yáng)性表達(dá)水平以綜合計(jì)分法進(jìn)行半定量分析。隨機(jī)選取5個(gè)400倍視野計(jì)數(shù)滋養(yǎng)細(xì)胞總數(shù)和陽(yáng)性細(xì)胞數(shù),得出陽(yáng)性細(xì)胞百分比并計(jì)分。無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為0分,陽(yáng)性細(xì)胞占 1%～ 25%為 1分,26%～49%為2分,≥50%為3分。根據(jù)多數(shù)細(xì)胞的著色強(qiáng)度進(jìn)行強(qiáng)度計(jì)分。細(xì)胞內(nèi)無(wú)棕黃色顆粒或呈均勻一致的淡黃色,與背景一致為 0分,胞漿內(nèi)可見(jiàn)淡黃色顆粒明顯高于背景為 1分,胞漿內(nèi)可見(jiàn)較深棕色顆粒為2分,胞漿內(nèi)可見(jiàn)大量深棕色顆粒為 3分。2種計(jì)分方法相加,0～ 1分為陰性 (-),2為 (+ ),3～ 4分為 （),5～ 6分為 ()。

結(jié) 果

1 不同組別瘦素水平比較 見(jiàn)表1。正常孕婦產(chǎn)前體內(nèi)瘦素水平與各妊娠期高血壓疾病組孕婦產(chǎn)前體內(nèi)瘦素水平存在顯著性差異(P＜0.05),妊娠期高血壓疾病組明顯高于正常孕婦,且隨妊娠期高血壓疾病的加重,體內(nèi)瘦素水平亦增加,各組兩兩比較有顯著性差異(P＜0.05)。重度子癇前期、輕度子癇前期的臍靜脈血瘦素水平組間差異有顯著性,且均高于妊娠期高血壓和正常組,差異有顯著性(P＜0.05),后兩組水平無(wú)明顯差異(P＞0.05)。產(chǎn)后1周各組間產(chǎn)婦瘦素水平無(wú)顯著性差異。

表 1 不同組別瘦素水平比較(±s,μg/L)

表 1 不同組別瘦素水平比較(±s,μg/L)

組 別 分娩前 臍血 分娩后正常組 26.12± 3.55 6.32± 3.35 15.21± 4.56妊娠期高血壓 28.50±5.03 6.45± 3.61 16.35±4.64輕度子癇前期 33.07± 7.82 7.25± 4.02 17.13±5.28重度子癇前期 37.14± 8.35 8.33± 4.33 17.53±5.46

2 不同組別胎盤(pán)瘦素表達(dá)水平比較 見(jiàn)表2。所有觀察病例胎盤(pán)絨毛合體滋養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿內(nèi)均有不同程度瘦素蛋白表達(dá),但絨毛血管內(nèi)皮細(xì)胞以及間質(zhì)細(xì)胞中均無(wú)陽(yáng)性染色。瘦素在胎盤(pán)中由弱至強(qiáng)的表達(dá)順序分別為:正常妊娠、妊娠期高血壓、輕度子癇前期、重度子癇前期。妊娠期高血壓與正常妊娠比較,差異有顯著性(P＜0.05);子癇前期組與正常妊娠組比較,差異有顯著性(P＜0.05);子癇前期組與妊娠期高血壓組比較,差異有顯著性(P ＜0.05)。

表 2 不同組別胎盤(pán)瘦素表達(dá)水平比較

討 論

瘦素(Lep)是由OB基因編碼,主要由脂肪細(xì)胞分泌的蛋白質(zhì)激素,在體內(nèi)具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)。除可調(diào)節(jié)攝食活動(dòng),影響脂質(zhì)及糖類(lèi)代謝外,還可通過(guò)激活交感神經(jīng)參與血壓的調(diào)節(jié)與內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定[7]。最初認(rèn)為L(zhǎng)ep都由白色脂肪組織表達(dá),以后研究發(fā)現(xiàn),Lep在下丘腦、垂體、肺等多種組織都有表達(dá)。近年來(lái)研究表明胎盤(pán)參與 Lep的合成和分泌,是妊娠期 Lep的重要來(lái)源之一。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),當(dāng)給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射大劑量瘦素后,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物心率加快,血壓升高;并且發(fā)現(xiàn)高血壓患者血清瘦素水平和血漿腎素活性及血漿醛固酮濃度有關(guān)[8]。在妊娠期高血壓疾病時(shí),臍血及母血中瘦素含量都明顯升高,并且隨著病情的加重而增長(zhǎng),因此,瘦素分泌的增多與血壓的升高有直接關(guān)系。

瘦素介導(dǎo)妊娠期高血壓的發(fā)病機(jī)制,具體可能包括下列途徑:①交感神經(jīng)系統(tǒng)(SNS):目前認(rèn)為 SNS和脂肪組織之間存在一個(gè)反饋環(huán)路,瘦素就是正反饋環(huán)節(jié)上的信號(hào)之一;②腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS):瘦素和 RAS通過(guò)影響人體 SNS、水電解質(zhì)代謝以及血管重塑來(lái)參與血壓的調(diào)控。血清瘦素水平、血管緊張素水平、平均動(dòng)脈壓三者之間呈正相關(guān),但瘦素如何影響RAS的機(jī)制尚不清楚;③瘦素影響胰島素敏感性:高胰島素血癥和胰島素抵抗是引起高血壓病的危險(xiǎn)因素,其機(jī)制是多方面的。瘦素可能在胰島素抵抗性高血壓的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中扮演了重要的角色;④瘦素促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生:瘦素在 10～ 40 ng/L劑量范圍內(nèi)可引起人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞增生,且金屬間質(zhì)蛋白酶(MMPs)MMP-2、MMP-9、金屬蛋白酶的組織抑制因子(TIMPs)TIMP-1及 TIMP-2的表達(dá)與瘦素水平呈劑量正相關(guān)關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示,子癇前期孕婦血清及臍血瘦素水平明顯高于正常孕婦,據(jù)此推測(cè)瘦素與妊娠期高血壓的發(fā)生發(fā)展有關(guān),不同程度的妊高征孕婦血漿瘦素水平有明顯差異,提示瘦素與妊高征的嚴(yán)重程度有關(guān);產(chǎn)后 1周各組間產(chǎn)婦瘦素水平無(wú)顯著性差異,這說(shuō)明妊高癥患者的瘦素水平增高主要與胎盤(pán)來(lái)源的瘦素增加有關(guān),胎盤(pán)功能異常是妊高癥發(fā)病的主要原因;子癇前期患者胎盤(pán)組織瘦素表達(dá)與正常孕婦胎盤(pán)瘦素表達(dá)部位相同,但子癇孕婦胎盤(pán)瘦素表達(dá)水平顯著高于正常妊娠晚期孕婦,這提示子癇前期血清中升高的瘦素主要來(lái)源于胎盤(pán)組織,其可能參與了子癇前期的發(fā)病。因此,血清瘦素水平可作為監(jiān)測(cè)妊娠期高血壓疾病嚴(yán)重程度的臨床指標(biāo)。

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Change and its signifiance of leptin level in PIH patients

Shaanxi Maternity and Child Care Centers(Xi’an 710003) He Yiping Liu Juandi Zhou Xin

Objective:To investigate the change and its signifiance of leptin level in PIH patients.Methods:The materna l p lasma samples o f 60 PIH p regnant w omen and 20 norma l p regnant w omen w ere obtained before and 7 days after delivery.And the umbilical p lasma samples o f them also w ere obtained a fter delivery.The level o f lep tin w as valued by enzyme-linked immunoradioassay technique.The correlativeanalysis between the levels of serum lep tin w as performed.And the expression and location of leptin in placenta w ere exp lored by immunohistochemistry(SP).Based on pregnancy outcomes,the subjects were divided into healthy norma l pregnant group(20 cases),gestationa l hypertension group(20 cases)and p reeclam ptic group(20 severe and 20mild).Resu lts:The levels o fmaternal plasma lep tin in p reeclampsia were significantly higher than those in healthy normal pregnant group at the same stages(P＜0.05,respectively),but no change existed betw een gestational hypertension and norma l pregnant group(P＞ 0.05,respectively).The levels of maternal p lasma leptin rapid ly dropped into the levels of non-pregnancy on all subjects after delivery.The levels of umbilical blood leptin in p reeclampsia w ere significantly higher than those in hea lthy normal pregnant group.The location of lep tin in placentas was existed in the cy toplasm o f villous syneytiotrophob last,cy totrophoblast and vascu lar endothelial cells.The expressional intensions of leptin protein w ere higherthan in gestationalh ypertension(P＜0.05,respectively),and the intensions in gestational hypertension group w ere higher than those in healthy norma l p regnancy group by turn(P＜0.05,respectively).Conclusion: The lep tin levels in PIH patients are higer than those in normal pregnaney,and related to the severity of PIH.The level of leptin can be a clinica marker of the degree o f preeclampsia.

Hypertension,pregnancy-induced Pre-eclam psia Lep tin

高血壓,妊娠性 先兆子癇 瘦素

R714.24

A

1000-7377(2010)02-0174-03

(收稿:2009-09-25)

·短篇論著·