血液分析儀與手工法計(jì)數(shù)兒童血小板誤差原因分析

陳　鳳　蘇芝軍

[摘要] 目的:分析血液分析儀與手工法對(duì)兒童血小板計(jì)數(shù)產(chǎn)生的誤差。方法:用兩種血液分析儀及手工顯微鏡計(jì)數(shù)法對(duì)600例血液標(biāo)本進(jìn)行血小板計(jì)數(shù),并進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果:成人血小板值高于正常參考上限(300×109/L)的比率低于兒童,兩種血細(xì)胞分析儀測(cè)的兒童血小板值無顯著性差異(P>0.05),血液分析儀分析時(shí)出現(xiàn)異常報(bào)警(URI),直方圖尾部有異常升高的血小板值與顯微鏡計(jì)數(shù)的結(jié)果有顯著性差異(P<0.05)。結(jié)論:使用血液分析儀計(jì)數(shù)兒童血小板時(shí)如出現(xiàn),計(jì)數(shù)有警示信號(hào)(URI);MCV<70 fl,且RBC直方圖顯示有<50 fl的小紅細(xì)胞存在,血小板直方圖出現(xiàn)尾部升高的表現(xiàn)或血小板直方圖曲線呈齒狀等以上情況時(shí)要進(jìn)行手工顯微鏡計(jì)數(shù)儀得到準(zhǔn)確的結(jié)果。

[關(guān)鍵詞] 血液分析儀;血小板計(jì)數(shù);兒童;顯微鏡計(jì)數(shù)

[中圖分類號(hào)]R55 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-7210(2009)08(c)-143-02

隨著醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展及各種高科技技術(shù)在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用,血液分析儀已經(jīng)成為各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)常規(guī)實(shí)驗(yàn)診斷中不可缺少的儀器,具有快速、方便、所測(cè)項(xiàng)目多等諸多優(yōu)點(diǎn),但由于設(shè)計(jì)原理的問題,某些情況下易造成結(jié)果的假性增高或減低。在日常工作中發(fā)現(xiàn),血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)的兒童血小板(platelet,PLT)值高于正常參考范圍的較成人偏多。我們隨機(jī)分析了日常工作中使用MEK-6108型血液分析儀測(cè)得的600例血小板值,其中,成人(14歲以上)400例,兒童(14歲及以下)200例。并對(duì)兒童的標(biāo)本同時(shí)用KX-21型血細(xì)胞分析儀和手工光學(xué)顯微鏡法計(jì)數(shù)血小板值。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

血液分析儀采用日本光電公司生產(chǎn)的MEK-6108型和日本東亞醫(yī)用電子株式會(huì)社生產(chǎn)的KX-21型;稀釋液、溶血?jiǎng)┑染褂酶髯耘涮自噭?光學(xué)顯微鏡計(jì)數(shù)血小板稀釋液由實(shí)驗(yàn)室自配。

1.2 標(biāo)本的采集

采用EDTA-2K抗凝的真空管,嚴(yán)格按規(guī)定要求(抗凝劑與血液比例嚴(yán)格控制、血流要順暢)采集靜脈血,標(biāo)本要求無凝塊和溶血。采集后在15 min～1 h測(cè)試完畢。

1.3 方法

400份成人標(biāo)本只用MEK-6108型分析儀測(cè)定。200份兒童標(biāo)本分別用兩種儀器進(jìn)行測(cè)定,且各測(cè)定兩次取其平均值,同時(shí)用光學(xué)顯微鏡法計(jì)數(shù)其血小板值,每份標(biāo)本計(jì)數(shù)兩次取其平均值。各儀器操作嚴(yán)格按說明書要求,手工法采用改良許汝法,按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》要求進(jìn)行。

2 結(jié)果

MEK-6108型血細(xì)胞分析儀所測(cè)的400例成人血小板值高于正常參考上限(300×109/L)者占6%,200例兒童血小板值高于正常參考上限(300×109/L)者占21%,兒童高于成人。

MEK-6108和KX-21兩種血細(xì)胞分析儀測(cè)得的兒童血小板值分別為(204.0±80.5)×109/L、(194.0±71.2)×109/L,兩者經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,無顯著性差異(P>0.05)。MEK-6108測(cè)得的值[(204.0±80.5)×109/L]與手工顯微鏡計(jì)數(shù)值[(190.0±65.3)×109/L]比較,無顯著性差異(P>0.05)。

將MEK-6108血液分析儀分析時(shí)出現(xiàn)異常報(bào)警(URI)的28例標(biāo)本的血小板值[(486.0±98.7)×109/L]與顯微鏡計(jì)數(shù)的結(jié)果[(279.0±76.5)×109/L]進(jìn)行比較,有顯著性差異(P<0.05)。

3 討論

不同的血液分析儀雖然有不同的生產(chǎn)廠家,且分析原理及試劑有所不同,但在分析時(shí)只要按其要求操作,所取標(biāo)本合格、操作時(shí)間控制在一定范圍內(nèi)(15～60 min),所得的血小板結(jié)果無明顯差異[1],筆者的結(jié)論也與之相符。

血液分析儀所測(cè)得的血小板值高于正常參考上限的兒童多于成人,考慮可能有以下幾方面原因:①某些疾病如肺炎、支氣管炎、溶血性貧血、川崎病、上呼吸道感染、哮喘喘息發(fā)作期、腎病綜合征等疾病可引起血小板增高,這可能與血小板活化參與其發(fā)病機(jī)制有關(guān)[2],而這幾種疾病兒童的發(fā)病幾率要大于成人。②在采集兒童靜脈血液時(shí)由于兒童與工作人員難以很好地配合,采集到的標(biāo)本很容易造成紅、白細(xì)胞破壞形成碎片。由于血液分析儀對(duì)血小板的測(cè)定是與紅細(xì)胞在同一個(gè)計(jì)數(shù)池中進(jìn)行,其原理是在一定體積(2～24 fl)范圍內(nèi)的顆粒被計(jì)數(shù)為血小板[3]。當(dāng)所測(cè)標(biāo)本中有大量小紅細(xì)胞或紅、白細(xì)胞碎片,其體積進(jìn)入血小板計(jì)數(shù)范圍的被誤認(rèn)為血小板,使血小板計(jì)數(shù)假性增高[4]。③兒童多有厭食、偏食等不良飲食習(xí)慣,易發(fā)生營養(yǎng)不良性小細(xì)胞貧血,如缺鐵性貧血。④有少數(shù)兒童在生理狀況及操作因素的影響下其血小板本身就高于正常。

因血球計(jì)數(shù)儀具有“浮動(dòng)界標(biāo)”糾正功能,并非只要當(dāng)血液標(biāo)本中存在小紅細(xì)胞時(shí)就可以使計(jì)數(shù)的血小板值偏高于實(shí)際值,即使其體積<20 fl,也不至于影響血小板計(jì)數(shù),只有當(dāng)多量的小紅細(xì)胞存在時(shí),超出其功能糾正范圍才出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果[4],并且當(dāng)出現(xiàn)此類錯(cuò)誤時(shí)儀器一般會(huì)有URI報(bào)警提示,URI報(bào)警即提示小紅細(xì)胞或紅細(xì)胞碎片會(huì)對(duì)血小板計(jì)數(shù)有影響而造成計(jì)數(shù)誤差,血小板直方圖也會(huì)出現(xiàn)異常的表現(xiàn),其曲線尾部并不是呈下降趨勢(shì)與橫坐標(biāo)相交,而是呈上升走勢(shì)。

平均紅細(xì)胞體積(MCV)是反映體內(nèi)紅細(xì)胞大小的一項(xiàng)指標(biāo),當(dāng)血液內(nèi)小紅細(xì)胞數(shù)量增多時(shí),MCV值就會(huì)低于正常參考值,而小紅細(xì)胞數(shù)量增多到一定數(shù)量時(shí)又會(huì)影響血球計(jì)數(shù)儀對(duì)血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性,故而MCV值也可間接判斷血球計(jì)數(shù)儀所計(jì)數(shù)血小板值的準(zhǔn)確與否。和強(qiáng)等[2]報(bào)道MCV<70 fl時(shí)對(duì)血小板計(jì)數(shù)有影響,我們所分析的28例異常血小板直方圖標(biāo)本中有26例MCV<70 fl,與報(bào)道的基本一致。

鑒于上述結(jié)果,筆者建議在使用血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)兒童血小板值時(shí),并不需要每一標(biāo)本都進(jìn)行手工顯微鏡計(jì)數(shù),即使其結(jié)果高于正常參考范圍。但只要當(dāng)出現(xiàn)下列情況之一時(shí),就必須用人工顯微鏡計(jì)數(shù)加以補(bǔ)充,以得到準(zhǔn)確的結(jié)果:①血小板計(jì)數(shù)有警示信號(hào)(URI);②MCV<70 fl,且RBC直方圖顯示有<50 fl的小紅細(xì)胞存在;③血小板直方圖曲線呈齒狀,表示有血小板聚集,此時(shí)血小板計(jì)數(shù)儀器法測(cè)得的結(jié)果偏低。

[參考文獻(xiàn)]

[1]章文,徐剛,陳月生.血液分析儀計(jì)數(shù)小兒血小板升高因素淺析[J].國外醫(yī)學(xué):臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè),2005,26(3):188-191.

[2]和強(qiáng),廖志勤,虞靖虹.哮喘患兒血小板計(jì)數(shù)與平均血小板容積水平變化的臨床觀察[J].中國小兒血液,2002,7(2):54-55.

[3]張軍力,高健鋼.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用指南[M].呼和浩特:內(nèi)蒙古人民出版社,2001:12-44.

[4]叢玉隆.當(dāng)代血液分析技術(shù)與臨床[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1997:97-100.

(收稿日期:2009-03-11)